流式细胞术在水体微型生物研究中的应用

综述了流式细胞术（flow cytometry)在水体微型生物研究中的应用。包括微型生物的识别、记数和生物量研究,微型生物的细胞周期分析以及生态与生理学研究。讨论了FCM在淡水微型生物和环境生物学中的应用。FCM技术与食品的改进将促进水体微型生物的研究,从而有助于对水生生态系统的深入认识。     

一中国白酒酒曲中的丝状真菌菌群

采用6种不同的培养基,分别于25℃、32℃、42℃以及50℃培养分离从而对某一中国白酒酒曲中的丝状真菌菌群进行研究.从酒曲中共分离得到886株丝状真菌,分属于接合菌,子囊菌和无性型真菌的20属,45种.其中最为丰富的是无性型真菌(28种),其次是接合菌(10种)和子囊菌(7种).对发酵起主要作用的为那些嗜热和耐热的种属,包括:宛氏拟青霉,伞枝梨头霉,梳棉状嗜热丝孢菌,微小根毛霉,金孢霉属一种和红曲属的几个种.文中还对一些在发酵中起重要作用的丝状真菌的特性进行了探讨.     

Vectoring ability of aphid clones of Rhopalosiphum padi (L.) and Sitobion avenae (Fabr.) and their capacity to retain barley yellow dwarf virus

Vectoring ability of four aphid clones, Rp-M and Rp-R26 of Rhopalosiphum padi and Sa-R1 and Sa-V of Sitobion avenae, to transmit barley yellow dwarf (PAV, MAV and RPV) luteoviruses (BYDV) was compared in controlled conditions. Significant differences between highly efficient vectors (HEV), Rp-M and Sa-Rl, and poorly efficient vectors (PEV), Rp-R26 and Sa-V, were found in transmission of their specific viruses with acquisition and inoculation access periods (AAP, IAP) of 5 days. BYD-RPV was occasionally transmitted by both clones of S. avenae. None of 150 tested apterous adults of the Rp-R26 transmitted BYD-MAV, while 10% of transmission was observed from those of the Rp-M in a parallel test. An improved ELISA and immuno-PCR were adapted to test for viruses in aphids. The results obtained by the improved ELISA indicated there was a good correlation between virus detection in single aphids of HEV clones after a 5 day AAP and virus transmission by them. In contrast, the percentages of virus-carrying aphids of PEV clones were generally higher than those of their transmission rates. BYD-MAV and BYD-RPV were also detected by the improved ELISA in single aphids of their PEV clones, with the exception of BYD-RPV in those of Sa-V. However, after a 2-day IAP, the improved ELISA in most cases failed to detect these viruses in single aphids of PEV clones. Detection by immuno-PCR demonstrated that all three viruses could be acquired and retained by the aphids of both HEV and PEV clones. But, as visualised from electrophoretic bands, after the 2-day IAP the amplified products from aphid extracts of PEV clones were reduced. The detection in a batch of nine aphids by the improved ELISA revealed that virus content in PEV clones decreased more rapidly than that in HEV clones during transmission. Thus, the difference in transmission efficiency of the aphid clones within species was not caused by an inability to acquire virus, but was determined by variation in vectoring ability between them. This was due to differences in ability to prevent the passage of virions from haemocoel to salivary duct and/or different capacities for the retention of BYDV.     

人骨保护素N端片段在大肠杆菌中的表达及其活性分析

骨保护素 (OPG)成熟肽N端D1～D4结构域仅由 2个外显子编码 .以人基因组DNA作为模板 ,采用重叠延伸PCR得到N端D1～D4域编码序列 ,并在其上游引入 2×His密码子序列 ,然后克隆入载体pQE 30进行表达 ,SDS PAGE表明 8×His融合蛋白主要以包涵体形式存在 ,可被抗OPG抗体识别 .变性条件下通过Ni NTA金属螯合亲和层析对表达产物进行纯化后再经梯度透析进行复性 ,采用破骨细胞样细胞 (osteoclast likecell ,OLC)诱导分化实验来检测重组蛋白的生物活性 ,证实单核 巨噬细胞集落刺激因子 (M CSF)和破骨细胞分化因子 (ODF)可协同促进多核OLC的生成 ,但加入重组OPG片段后 ,OLC生成显著减少 .     

人质子感知受体G2A和OGR1在低氧性肺动脉高压患者外周血细胞中的表达

目的：检测人质子感知受体G蛋白偶联受体2A （G2A）和卵巢癌G蛋白偶联受体1（OGR1）在低氧性肺动脉高压（HPH）患者外周血细胞中的变化。方法：研究对象选取31例HPH患者为低氧性肺动脉高压组（HPH组）,男性16例,女性15例,年龄（65.19 ±5.86）岁。同时符合中华医学会呼吸病学分会慢性阻塞性肺疾病学组诊断标准和呼吸衰竭诊断标准,选取30例健康体检者为正常组（NC组）,男15例,女15例,年龄（63.47 ±6.16）岁。心脏彩超计算HPH组肺动脉压力、进行血气分析和肺功能检测,采集外周血检测G2A、OGR1基因mRNA表达水平、血清肿瘤坏死因子α（TNF-α）水平。结果：HPH组PaCO₂较NC组明显增高（P<0.05）,1 s用力呼气容积占预计值的百分比（FEV1pro%）和1 s用力呼气容积与用力肺活量比值（FEV1/FVC）明显低于NC组（P<0.05）。HPH组外周血中G2A mRNA及TNF-α含量明显高于NC组（P<0.05）。OGR1 mRNA与NC组无差别。HPH组G2A mRNA及TNF-α表达与肺动脉压力呈显著正相关。结论：肺动脉高压患者外周血细胞中质子感知受体G2A表达增加,TNF-α水平增加,G2A的表达和TNF-α水平与肺动脉压力呈明显正相关。     

小麦苗期冷驯化相关cDNA的克隆

以中国春小麦幼苗为材料,利用改进的mRNA差异显示方法和银染技术,对不同低温驯化诱导表达的差异基因进行分离,共得到cDNA差异片段60条.经Reverse Northern验证,检出阳性表达片段8条,克隆并测序,分别命名为TIGW1~TIGW8.其中,TIGW2和TIGW3可能与抗冻蛋白积累、低温诱导蛋白的生成或低温信号的感受与传递有关;TIGW1、TIGW6、TIGW8中具有ACGT应答元件,TIGW3含有CAACA应答元件,说明可能获得了冷诱导基因的启动子序列.     

普者黑岩溶湖泊湿地湖滨带景观格局演变对水质的影响

湖滨带作为湖泊与陆地之间的过渡带,是健康湖泊生态系统的重要组成部分。湖滨带景观格局的演变会对湿地水质产生重要影响,因此探究影响岩溶湿地水质变化的湖滨带关键景观因子,对深入了解景观格局对岩溶湿地水质的影响过程与机制具有重要意义。选择普者黑岩溶湖泊湿地为研究对象,以2005、2007、2009、2011年共4年的Landsat遥感影像及水质监测数据为基础,通过划定湖泊湿地湖滨带缓冲区域,运用秩相关分析和冗余分析研究湖滨带景观格局对普者黑岩溶湖泊湿地水质的影响。结果表明,湖滨带不同缓冲区内景观结构类型比例差异较大;枯水期水质与土地利用类型和景观格局指数的影响大于丰水期;景观格局在不同缓冲区尺度对岩溶湿地的水质具有不同的效应;随着监测点缓冲距离的增加,个别景观指数可较好的揭示湖滨带景观格局演变对岩溶湿地水质的影响,其中,蔓延度指数(CONTAG)、斑块结合度指数(COHSION)、均匀度指数(SHEI)对水质参数的影响较大,边界密度(ED)、聚集度(AI)对水质参数的影响随缓冲距离的增加逐渐减弱,其他景观指数对水质影响差异并不明显,最大斑块指数(LPI)在缓冲距离≤300m的区域内与水质的关系较密切,面积加权平均斑块分维数(AWMPFD)与水质参数有显著负相关性,多样性指数(SHDI)对水质的影响具有不确定性;另外,大部分水质参数与土地利用面积比例有较好的相关性,且湿地面积比例是表征岩溶湖泊湿地水环境质量的主要指标。     

利用癌功能类从癌基因组突变谱中识别癌基因

从大规模癌样本基因突变扫查数据中识别癌基因具有重要的意义. 一些重要功能的改变对于癌的发生发展是必需的, 因此将它们定义为癌功能类, 并从GO(Gene Ontology)中选择一组显著富集已知癌基因的细致功能类来代表它们. 为了评价以癌相关功能类作为特征识别癌基因的效果, 将已知的蛋白激酶癌基因定义为阳性金标准, 而将其他的蛋白激酶基因定义为阴性金标准. 结果表明, 与利用选择压力作为特征的方法比较, 利用癌相关功能类作为特征的方法可以更有效地识别癌基因. 进一步结合癌相关功能类与基因非同义突变个数可以产生更可靠的预测结果. 最后, 将46个注释到癌相关功能类并且其非同义突变个数至少为3的蛋白激酶基因预测为癌基因, 预测精确率达到0.42.     

达乌尔黄鼠实验室饲养、繁殖及其冬眠阵

为探索实验室条件下达乌尔黄鼠饲养与繁殖的方法及冬眠阵的发生规律,参照野生黄鼠冬眠洞穴的主要生态环境参数,建立人工冬眠屋,采用传统锯末技术记录冬眠阵。结果显示: (1) 处于春季繁殖期的黄鼠应以大鼠饲料为主,辅以少量黄瓜等,夏季活跃期交叉饲喂大鼠饲料与兔饲料,辅以多水的瓜果蔬菜,秋季育肥期以大鼠饲料为主,辅以高脂肪高蛋白的花生、豆类等。(2)雌鼠怀孕期为28 d 左右,哺乳期约一个月,雌鼠每窝产仔4 ～ 8 只,平均5.52 只;初生幼鼠两周内忌换垫料,并避免将异味带入鼠房。(3)黄鼠冬眠期从当年11月下旬至次年3 月上旬,平均93.95 d;冬眠阵睡眠时长平均7. 44 d,阵间激醒时长平均1.36 d,睡眠天数占整个冬眠期的89.9% ;整个冬眠期,黄鼠冬眠阵平均7. 55 个。(4)2009 年秋至2011 年春季,自野外共捕回黄鼠185 只, 存活146 只,存活率78. 9% 。在2006、2009 和2011 年的黄鼠繁殖期,共配对25 对,产仔138 只,成活92 只,成活率为66.7% 。结果表明,野生达乌尔黄鼠可在人工饲养条件下实现繁殖,并可在人工冬眠屋成功冬眠。     

大杯伞华农2号菌株液体培养产生漆酶条件的研究

大杯伞(Clitocybe maxima)华农2号菌株具有分泌漆酶的能力,与静止培养相比,以110 r/min摇床培养能明显促进大杯伞华农2号菌株漆酶的分泌。以25 g/L可溶性淀粉为碳源,2.0 g/L酪蛋白胨为氮源,铜离子添加量为0.1 mmol/L进行液体培养,有利于大杯伞华农2号菌株漆酶的分泌,最高酶活可达到713 U/L。