Optimization of Electrofusion Parameters and Interspecific Somatic Hybrid Regeneration in Citrus

This study was primarily attempted to optimize the electrofusion parameters using protoplasts isolated from cell suspension cultures of "Page" tangelo ( Citrus reticulata Blanco x C. paradisi Macf) and mesophyll protoplasts of rough lemon ( Citrus jambhiri Lush) as fusion partners. It was shown that the binuclear heterokaryons frequency reached 15% with the following parameters: alternate current (AC) 125 V/cm, AC time 60 s, direct current (DC) 1 250 V/cm, DC pulse width 50 μs, DC pulse interval O. 5 s, No. of DC pulse 3. Considering the fact that different types of protoplasts have different specific weights, higher frequency of the binuclear heterokaryons was obtained by controlling the centrifugation time after fusion. The fusion products regenerated into plantlets after 3 to 4 months of culture. Chromosome counting of the root tips and morphological observation of the regenerants verified that 78% were tetraploids and the rest were diploids with the leaf morphology of mesophyll parent. Peroxidase (POX) isozyme and RAPD analysis indicated that interspecific somatic hybrids were obtained and an autotetraploid plant of mesophyll parent type was also verified.     

甘蔗过氧化物酶同工酶分析

以30个甘蔗品种为材料,用垂直平板聚丙烯酰胺凝胶电泳,分析甘蔗不同生长时期过氧化物酶同工酶。个别品种还进行同一品种在不同种植地区、同一植株不同叶位的同工酶酶谱比较,结果表明,不同品种的酶谱其酶带分布有明显的区别,但同一品种在不同种植地区、不同生长时期、不同植抹、同一植株不同叶位其酶带分布无差异,体现了同工酶作为品种标记具有多态性及稳定性。用单一酶系即可准确、方便地鉴定甘蔗品种。     

盐胁迫对柱胞鱼腥藻细胞结构和固氮作用的影响

在含KCl的条件下培养,柱胞鱼腥藻细胞膨大,球形化,色素质靠向细胞一侧,另一侧变成无色透明区。电镜检查,无色透明区形成液泡。此种结构改变是可逆的,CaCl2可抵消KCl的这种作用。在含KCl的无氮培养基中培养,柱胞鱼腥藻生长迟缓,细胞黄化,乙炔还原法测定固氮活性下降95％。     

病毒性肝炎肝硬化并脾功能亢进的治疗进展

病毒性肝炎肝硬化合并脾功能亢进是临床上常见的肝脏疾病,其产生的脾脏肿大占位效应和血细胞过度消耗及伴随骨髓移植等临床综合症状,严重影响了针对病毒性肝炎肝硬化的抗病毒治疗。目前通过非手术治疗难以控制脾脏肿大,且无特异性药物有效遏制,极易造成重度贫血和血小板减少症导致的出血现象,此时外科和介入治疗手段则为首选方式,一般包括脾脏切除、脾脏部分切除、介入治疗(目前以脾动脉栓塞为主)等,其中又以脾脏切除术疗效最直接和确切。然而脾切除对人体免疫功能的损害使人们认识到保脾的重要性,但如何最大限度的保留脾组织和脾功能,至今争议仍然存在。因此,本文综述了肝硬化脾功能亢进的发病原因及机制,脾亢的诊断标准以及脾功能亢进的外科和介入治疗方法,为脾功能亢进的研究提供一定的理论基础。     

神经刺激仪经肌间沟定位臂丛神经分支行臂丛麻醉效果分析

目的：比较神经刺激仪经肌间沟定位臂丛神经分支行肌间沟臂丛神经阻滞麻醉的效果及安全性。方法：选择拟行肌间沟臂丛神经阻滞的上肢手术的患者80例,ASAI或II级,随机均分为A组和B组,每组40例患者。两组均给予1％的利多卡因＋0．375％耐乐品20mL。记录完成操作所需时间、感觉神经阻滞起效时间、感觉神经阻滞完善时间、运动神经阻滞起效时间、运动神经阻滞完善时间;评价手术区域麻醉效果（优、良、差、失败）;观察并记录并发症。结果：A组完成操作所需时间（5．01±1．40）min,明显长于B组（2．83＋O．87）min（P〈0．01）。A组感觉阻滞起效时间（4．48±1．36）min,明显短于B组（7．0±2．06）min（P〈0．01）;A组运动阻滞起效时间（4．88＋±1．18）min,明显短于B组（7．0±1．67）min（P〈0．01）。A组感觉阻滞完善时间（11．73±3．62）短于B组（13．33±3．02）min（P=0．033）。A组运动阻滞完善时间（11．18±2．73）短于B组（12．41±2．48）min（P=0．038）;麻醉效果优等率A组为87．5％,B组为67．5％,差异有统计学意义x^2=4．588,P=0．032;优良率A组为97．5％,B组为90．0％,差异无统计学意义x2=1．920,P=0．166;A组、B组均未出现严重麻醉并发症。结论：A组行肌间沟臂丛神经阻滞比B组阻滞操作时间长,但神经阻滞麻醉效果好,神经阻滞完善率高。     

一种简便、快速的大肠杆菌质粒转化方法

将受体菌与质粒DNA混匀直接在Ca2+离子选择平板上进行转化和筛选,其转化过程仅需2 min左右,并能得到105以上的转化效率, 可满足一般克隆工作的需要。 Abstract：After mixing the recipient cells and plasmids DNA, directly spread the mixture on selective media containing Ca2+. The whole process of transformation just needs 2 min or so, and could acquire the transformation efficiency of more than 105, which is enough to common gene cloning.     

青扦胚性细胞悬浮培养中影响体细胞胚发生因素的研究

试验以青扦（Ｐｉｃｅａｗｉｌｓｏｎｉ）的胚性愈伤组织为材料,以改良５９基本成分附加２４－Ｄ１ｍｇ／Ｌ及ＫＴ１ｍｇ／Ｌ为培养介质,比较了液体悬浮与半固体二种培养方式对胚性愈伤组织增殖和体细胞发生的影响,研究了液体悬浮培养过程中影响体细胞胚发生的因素。结果表明：液体悬浮培养好于半固体培养,它的胚性愈伤组织的生长率为２６８％,是半固体培养的１２４倍;体细胞胚的分化率为９３％,是半固体培养的２２倍;悬浮培养较佳的培养条件为：初始细胞密度为２％（鲜重）,蔗糖浓度为２０ｇ／Ｌ,摇床转速为１００ｒ／ｍｉｎ,ｐＨ为５８。经过两个月悬浮培养,将培养物转至１／２改良５９附加ＡＢＡ１ｍｇ／Ｌ的分化培养基上,３个月后每ｇ培养物上可获得２８５个正常的子叶期体细胞胚。     

中国及荷兰人群vWF基因内含子40多态性分析

本文调查了中国汉族及荷兰高加索群体中人类ｖＷＦ基因内含子４０ｎｔ３１／２２１５～２３８０区域ＨＵＭＦＡ３１（Ｃ）遗传多态性的基因频率及基因型频率分布。并对两群体之间的分布以拟然比方法进行比较。对９个等位基因片段测序的结果表明,在ｎｔ３１／２２３４～２２６５区域也有变异存在。提示该座位当被测等位基因ＤＮＡ片段长度相同时,仍可能存在遗传差异。     

补体攻膜复合体致肾小球脏层上皮细胞粘附性改变研究

为探讨膜性肾病中补体攻膜复合体(MAC)介导蛋白尿机制,本研究制作了MAC致肾小球脏层上皮细胞(GVEC)亚溶破模型。通过对细胞局部粘附及相关蛋白的观察发现,MAC亚溶破致伤GVEC后,其粘附性发生改变。其机理与ECM分泌失调、膜硫酸化物质及整合素减少、细胞骨架重排有关。这些改变导致体内GVEC脱附,足突退缩融合,从而参与膜性肾病的蛋白尿产生。