大肠杆菌精氨酰－tRNA合成酶的Lys306为酶活力所必需

将大肠杆菌精氨酰ｔＲＮＡ合成酶（ＡｒｇＲＳ）上Ｌｙｓ３０６用基因点突变的方法分别变为Ａｌａ和Ａｒｇ的密码子;得到变种基因ａｒｇｓ３０６ＫＡ和ａｒｇｓ３０６ＫＲ。变种基因重组在ｐＵＣ１８上,转化到大肠杆菌ＴＧ１中,转化子中ＡｒｇＲＳ及其变种ＡｒｇＲＳ３０６ＫＡ和ＡｒｇＲＳ３０６ＫＲ所表达的蛋白量至少为ＴＧ１表达ＡｒｇＲＳ蛋白量的１００倍。细胞粗抽提液中ＡｒｇＲＳ的比活ＴＧ１、转化子ｐＵＣ１８－ａｒｇｓ、ｐＵＣ１８－ａｒｇｓ３０６ＫＡ和ｐＵＣ１８－ａｒｇｓ３０６ＫＲ分别为１．６５、２１０、１．８和３８单位／毫克。结果表明ＡｒｓＲＳ的Ｌｙｓ３０６为Ａｌａ取代使活力完全丧失;若被Ａｒｇ取代,则活力丧失８０％以上。Ｌｙｓ３０６为ＡｒｇＲＳ活力所必需。     

大肠杆菌精氨酰－tRNA合成酶的变种ArgRS306KR的纯化和基本性质

本文从含ＡｒｇＲＳ３０６ＫＲ基因ａｒｇｓ３０６ＫＲ的ｐＵＣ１８重组质粒的大肠杆菌ＴＧ１转化子中经ＤＥＡＥ－Ｓｅｐｈａｃｅｌ和Ｂｌｕｅ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ两步柱层析,得到电泳一条带的ＡｒｇＲＳ３０６ＫＲ。纯酶的比活为２７９０单位／毫克。该酶氨酰化和ＡＴＰ～ＰＰｉ交换活力的最适ｐＨ分别为ｐＨ８．３和ｐＨ７．５。氨酰化活力对ＡＴＰ、Ａｒｇ和ｔＲＮＡ的Ｋｍ分别为２．６ｍｍｏｌ／Ｌ、１４．０μｍｏｌ／Ｌ和５．０μｍｏｌ／Ｌ：Ｖｍａｘ为７６３０单位／毫克;ｋｏａｔ为９Ｓ－１。ＡＴＰ～ＰＰｉ交换活力对ＡＴＰ和Ａｒｇ的Ｋｍ分别为８．３ｍｍｏｌ／Ｌ和９９μｍｏｌ／Ｌ;Ｖｍａｘ为１６３２０单位／毫克;ｋｃａｔ为１８Ｓ－１。     

低氧低二氧化碳对大鼠脑血流的调节作用

低氧下脑血流与急性高原病有关,许多研究已证明,低氧不适应者的ＣＢＦ明显高于低氧适应者,而高原世居者则低于海平正常值。低氧下低动脉血二氧化碳分压有对抗低氧扩血管及降低ＣＢＦ的作用。因此研究低氧下低ＰａＣＯ２对ＣＢＦ的调节作用对于研究急性高原病的防治及其机理分析具有重要意义。本项研究目的：（１）揭示低氧下低ＰａＣＯ２与ＣＢＦ之间的关系;（２）通过增加通气量使ＰａＣＯ２下降至合适水平,以保护脑血流维持在     

低浓度氢清除法测定大鼠局部脑血流量

利用氢清除法测量动物局部脑血流量已被广泛应用于研究中。本文采用低于爆炸范围下限的３％Ｈ２浓度,它可以与任何比例的氮氧气体安全混合,且可避免吸纯氢期间的短暂缺氧,更为严格地控制了实验条件,增加了安全和准确性。本工作对吸１００％Ｈ２和吸３％Ｈ２以及吸３％Ｈ２１－１．５ｍｉｎ和吸３％Ｈ２５ｍｉｎ测得脑血流量分析作了比较,结果表明短期低浓度氢清除法能较好地反映动物的局部脑血流量。     

肝癌组织中GD3合成酶的纯化

ＧＤ３合成酶是膜嵌合蛋白,定位于高尔基体,经过制作微粒体,Ｔｒｉｔｏｎ增溶、ＡＨ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ及ＧＭ３－Ｇｌａｓｓｂｅａｄｓｅ及ＧＭ３－Ｇｌａｓｓｂｅａｄｓ亲和层析等步骤,二乙基亚硝胺诱发大鼠肝癌组织中的ＳＴ２被纯化了３１５９７倍,得率为０．３５％。ＳＤＳ－聚丙烯酰胺凝胶电泳后银染色呈１条蛋白着色带,分子量为５５ｋｄ。     

金花茶花药愈伤组织的体细胞减数分裂

金花茶(Camellia petelotii)的小孢子单核期花药,经培养和继代培养6个月后的愈伤组织中,发现有少量体细胞进行减数分裂。在减数第一和第二次分裂中,同源染色体的配对和分离基本正常,最后形成四分体。该愈伤组织经石蜡切片和压片观察,发现其主要由大量的液化细胞和贮藏细胞所组成,此外,还有少部分分生细胞。没有发现进一步的分化。其染色体数目,2n=30者占71.7%其余则为非整倍体。     

The inhibitory effect of transthyretin gene on growth of human hepatoma cells

Transthyretin(TTR) gene was highly expressed in normal liver and it has been found to be deleted in part of DNA samples from human hepatic cancer.Its mRNA expression was suppressed in most hepatoma samples.In order to study the biological effect of TTR gene on the growth of hepatoma cells,a recombinant vector containing TTR cDNA was constructed by pCMV,then it was transfected into hepatoma cell lines SMMC-7721 and Q3.It has been demonstrated that the inhibition of growth rate of TTR cDNA transfected hepatoma cells was about 50% in strength compared with that of the control.This inhibition was further enhanced when the transfected hepatoma cells were treated with all-trans retinoic acid.Hepatoma cells of cell lines PLC/PRF/5,SMMC-7721 and Q3 as well as hepatoma cells SMMC-7721 transfected with pCMV or pCMV-TTR were analyzed for TTR expression by Northern hybridization.The low level of TTR expression was found in both hepatoma cell lines and in SMMC-7721 cells transfected with pCMV alone.However,a remarkable TTR mRNA expression was observed in hepatoma SMMV-7721 cells transfected with pCMV-TTR.It seems possible that TTR gene might be a candidate of cancer suppressor gene for human hepatic cancer.     

利用离体诱变技术选育小麦大粒种质的研究

以鲁麦１２等为材料进行幼层培养,转分化前辐照１０００ｒａｄ,在Ｒ２代调查千粒重变异情况,结果表明,后代千粒重发生了显著变化,变异范围为３９．５—６８．５ｇ．突变率高达６３．０８％,最高千粒重超过对照４０．９５％。已选出一批大粒材料应用于生产．其中核生二号新品种千粒重６５ｇ,杂交后代表明,大粒变异多为显性突变。     

长三角地区植被覆盖演变城乡差异及其原因

城市生态环境和城市化之间的关系是城市可持续发展的关键。研究不同城市化水平下植被覆盖的长时间演变趋势,对理解城市化过程对植被生长动态的影响,城市更新以及推进城市绿化的科学管理具有重要意义。然而,目前对城市内部沿城乡梯度植被生长趋势差异的认识还比较有限。以我国城市化发展最为强烈的长三角地区为研究对象,基于2000-2020年长三角归一化植被指数数据,采用趋势分析和地理探测器方法,探究了长三角地区城市内部植被覆盖演变城乡差异,并从土地利用/覆被变化和城市化发展的角度解析其成因。研究结果表明：（1）2000-2020年长三角地区植被总体呈绿化趋势,植被明显绿化占最大比例（52.06%）,轻微绿化与稳定不变地区占31.68%,零星分布的褐化区占6.82%。（2）城市老城区植被覆盖变化总体呈现返绿趋势（0.016/10 a）,新城区褐化明显（-0.019/10 a）,农郊区绿化突出（0.023/10 a）。在上海、南京和杭州等人口城市化水平较高的城市中,老城区土地利用变化强度最高,其绿化趋势也最高,体现了城市更新过程对绿地空间的促进作用;而在人口城市化水平相对较低的宣城、蚌埠和阜阳等城市,土地利用变化强度相对较低的农郊区也呈现明显的绿化趋势,更多的是受到区域生态保护的影响。（3）土地城市化是长三角地区老城区和新城区植被覆盖变化的主导因子,而城市化因子对农郊区解释程度总体不显著。从长三角总体区域看,城镇人口比重、不透水面积/总面积以及地区生产总值三者对植被覆盖演变存在显著影响,其中城镇人口比重影响最大。