麻黄碱对支气管平滑肌细胞增殖的影响

在前人工作的基础上,采用一种更简省的方法分离培养支气管平滑肌细胞;并且利用显微镜观察和MTT的方法,研究了麻黄碱对支气管平滑肌细胞形态和增殖的影响.结果表明:麻黄碱对支气管平滑肌细胞的形态没有明显影响,但是对平滑肌细胞的增殖有一定的抑制作用,并进一步阐述了麻黄碱治疗哮喘等呼吸系统疾病的作用机理.     

单核细胞趋化蛋白-1在糖尿病肾病中的作用

糖尿病肾病是多因素引起的复杂性疾病,近年研究发现炎症反应参与了该病的发生与发展.单核细胞趋化蛋白-1是趋化因子CC亚家族的一员,在募集巨噬细胞等炎性细胞参与炎症反应中扮演着重要的角色.其趋化单核巨噬细胞于糖尿病肾组织中,可介导溶酶体释放,产生氧自由基,促进单核巨噬细胞表达β1-转化生长因子(transforming growth factor β1,TGF-β1),而广泛浸润臣噬细胞加剧了肾小球基底膜增厚、细胞外基质堆积,进而发展为肾小球硬化和间质纤维化.深入研究单核细胞趋化蛋白-1在糖尿病肾病中的作用,可望为糖尿病肾病的预防和治疗提供新的思路和途径.     

HAP蛋白疏水区的聚合功能及其与细胞凋亡的关系

asy和hap是一对新的细胞凋亡诱发基因 .二者单独转染细胞均能诱发细胞凋亡 ,能在酵母和哺乳动物细胞中形成同源二聚体 ,二者共转染酵母和哺乳动物细胞能形成异源二聚体 .同源二聚体诱发细胞凋亡 ,异源二聚体降低同源二聚体诱发细胞凋亡的活性 .氨基酸序列表明 ,HAP(homologousofASYprotein)含有内质网挽回模体 (KKKAE)、第一疏水区和第二疏水区 .对 3个功能区的缺失突变体研究显示 ,缺失内质网定位信号的HAPΔERS蛋白保留着同源聚合和与ASY异源聚合的能力 ,而分别缺失第一、第二疏水区的突变体HAPΔ4 8 139、HAPΔ15 7 2 18则丧失以上功能 ;通过流式计数法计算 3个缺失突变体诱发细胞凋亡比率 ,用生物统计学方法说明不同的比率与HAP诱发细胞凋亡的比率相比都有显著差异 .说明内质网定位信号、疏水区在HAP蛋白的诱发细胞凋亡过程中起重要作用 ,进一步揭示了HAP诱发细胞凋亡的机制 .     

人纤溶酶原Kringle 1—4.5结构域的表达及活性鉴定

利用RT PCR的方法从人肝癌细胞株HepG2细胞内获得了编码人纤溶酶原 (hPlasminogen)的Kringle 1到 4及部分Kringle 5结构域 (简称K1- 4.5 )的cDNA ,将其克隆到表达载体pHIL S1中。将重组载体pHIL K 1- 4.5转化毕赤酵母GS115 ,得到的重组菌株用甲醇进行诱导表达 ,并利用赖氨酸亲和柱纯化重组蛋白质 ,得到的蛋白质纯度大于 95 %。重组蛋白质能特异性地按剂量依赖的方式抑制碱性成纤维细胞生长因子 (bFGF)刺激的牛主动脉内皮细胞 (BAEC)的增殖 ,浓度为 2mg/L达到最大抑制效果的 5 0 % ;K1- 4.5还能抑制bFGF引起的BAEC的迁移 ,作用浓度为 1mg/L时对BAEC迁移的抑制率为 40 %。     

超活性胰高血糖素的分泌表达

通过多肽化学合成方法 ,人们对胰高血糖素的结构与功能关系有了比较深刻的了解 ,其中最引人注目的成就之一是发现 [Lys17,18,Glu2 1] 胰高血糖素具有比天然胰高血糖素更高的生物活性 ,称之为超活性胰高血糖素(superactiveglucagon ,下称SA glucagon)。为了通过基因工程途径获得SA glucagon ,用PCR方法从以前构建的胰高血糖素表达载体pAGluT得到SA glucagon的基因 (SAG) ,构建了含PL 启动子 ,phoA信号肽和SAG的分泌表达载体pBLSG7。pBLSG7转化到大肠杆菌BL2 1中 ,进行SAG的分泌表达 ,在摇瓶条件下 ,该菌种能分泌表达SA glucagon达 3.6 5mg/L(A60 0 =1) ,占上清液中蛋白质的 19.5 % ,并进一步研究了诱导温度和菌株对表达的影响。     

转基因(SAG12-IPT)青菜的迟衰特性

利用根癌农杆菌感染方法将融合基因SAG12 IPT导入青菜 ,转基因植株明显表现出衰老延迟的生理现象。SAG12 IPT的抗衰老作用表现为 :在衰老过程中转基因青菜叶片中叶绿素含量高于未转基因的青菜 ,PCR分析结果表明该融合基因已经转入青菜中。激素检测结果表明转基因青菜叶片中细胞分裂素含量高于未转基因植株 ,说明抗衰老与叶片内细胞分裂素含量提高有关。另外 ,转基因植株不仅表现出活体植株衰老延迟 ,而且长在植株上的与离体的叶片滞绿时间延长。这些为蔬菜的耐储存育种提供了新的思路 ,同时为该融合基因在十字花科经济作物中的应用提供了理论依据。     

毛竹茎秆纤维细胞发育过程中ATP酶的超微细胞化学定位研究

采用磷酸铅沉淀技术,对毛竹茎秆纤维细胞发育过程中的ATP酶进行了超微细胞化学定位研究.在初生壁形成时期,大量的ATP酶的活性产物沉积在质膜、质膜内陷、运输小泡、胞间连丝等膜体系以及细胞核和各种细胞器上;在次生壁形成的初期,ATP酶在多泡小体和裂解的液泡膜上出现,凝聚并边缘化的染色质上仍然具有ATP酶活性;随着次生壁的逐渐加厚,在前四年中持续存在具有ATP酶活性的质膜内陷结构,以后消失;而在六年生纤维细胞的质膜、运输小泡、纹孔、胞间连丝和凝聚化的染色质上仍然发现有明显的ATP酶分布,并发现在染色质上ATP酶活性会随着凝聚程度的加深而增强.结果表明,ATP酶在毛竹茎秆纤维细胞壁的整个形成过程中发挥重要作用,而纤维细胞的次生壁形成过程是一个由核基因控制的主动的PCD过程;并证实毛竹茎秆纤维细胞的发育有别于其它木本植物纤维细胞的发育过程,这种纤维细胞是一种典型的长寿细胞.     

植物氮代谢硝酸还原酶水平调控机制的研究进展

氮代谢是植株体内最基本的物质代谢之一,硝酸还原酶是植物氮代谢的关键酶。主要对植物氮代谢在硝酸还原酶水平上调控的研究新进展,尤其是其合成／降解及活性调控机制进行了较为系统的综述。硝酸还原酶合成的调控主要发生在转录水平和翻译水平上,硝酸还原酶降解的调控主要发生在翻译后水平上,同时NO3^-及光在硝酸还原酶转录水平调控上的作用重大,硝酸还原酶编码基因转录的mRNA的稳定性强弱影响植物的氮代谢,而影响mRNA稳定性的因素很多,机理复杂;磷酸化／去磷酸化在硝酸还原酶活性调控中占举足轻重的地位,研究也比较深入。钝化蛋白也能够影响硝酸还原酶活性,许多小分子物质对硝酸还原酶活性有影响。     

水稻物质生产与氮、磷、钾、硅素积累特点及其相互关系

大田条件下研究了30个水稻基因型的干物质与N、P、K、Si积累特性及其相互关系．结果表明,水稻干物质积累总量随N、P、K和Si积累总量的增加呈直线增加,其相关系数早季和晚季均达极显著水平．同时,N、P、K、Si积累的平衡有利于干物质积累,干物质积累量随NBI(养分平衡指数)直线增加,随NDI(养分偏离指数)直线下降．30个水稻品种平均N、P、K、Si积累总量比值早季为3．76：1：4．55：7．10,晚季为2．88：1：4．54：8．09．干物质积累能力以中期最强,前期最弱,而N积累能力却以前期最强,后期最弱．水稻抽穗前积累的干物质主要分配在茎鞘中,当抽穗期茎鞘比率达到最大时,茎鞘重约为叶片重的2倍,而抽穗前积累的N主要分配在叶片中,叶片中N的分配比率全生育期均比干物质分配比率高．成熟期积累的干物质、N和P主要分配在穗部,早、晚季稻的平均分配比率分别为58．01％、66．42％和70．06％,而K主要分配在茎鞘中,早、晚季稻的平均分配比率为62．08％．早季Si在茎中的分配比率(43．11％)最大,而晚季却以穗中的分配比率(46．99％)最大．