应用降落PCR和正交设计优化AtSUC9 PCR反应体系

目的:建立最适的AtSUC9 PCR反应体系。方法:应用降落PCR和正交设计,从Mg2 、dNTPs、引物、甘油4种因素3个水平,对拟南芥AtSUC99 PCR反应体系进行优化。结果:确立了适合拟南芥AtSUC99 PCR反应体系:在20μl反应体系中,含模板1μg,引物(20μmol/L)0.5μl,dNTPs(10mmol/L)0.3μl,10×PCRbuffer2μl,Mg2 (25mmol/L)1.2μl,TaqDNAPolymerase1U,甘油10μl。结论:降落PCR和正交设计是一种有效的植物基因PCR体系优化方法。     

模拟放牧干扰对黄土丘陵区生物结皮坡面土壤水分入渗的影响

水分是黄土高原地区植被恢复的关键影响因子,该区广泛分布的生物结皮显著影响土壤水分入渗。干扰影响生物结皮土壤水分入渗,但目前不同强度的干扰对生物结皮土壤水分入渗的影响仍不明确。本研究以黄土丘陵区吴起县合沟小流域的生物结皮坡面为对象,模拟羊蹄踩踏干扰,研究10%、20%、30%和40%干扰强度(以生物结皮破损度表征)对生物结皮坡面地表覆被的影响,采用线源入流入渗法观测了不同强度干扰后土壤水分入渗特征,通过结构方程模型和相关性分析,探索了干扰对生物结皮坡面土壤水分入渗的影响机制。结果表明:与对照(不干扰)相比,10%干扰强度下藻结皮盖度显著增加33.6%,20%干扰强度对藻结皮盖度无显著影响,30%和40%干扰强度下藻结皮盖度分别显著降低了36.1%和75.0%;40%干扰强度显著增加了枯落物盖度(34.3%),其他处理无显著影响;10%、20%和30%干扰强度下地表粗糙度分别显著降低了22.3%、11.1%和5.6%,40%干扰强度下增加了8.2%;40%干扰强度下初始入渗率显著增加了77.1%,其他干扰强度无显著影响;不同干扰对土壤稳定入渗率和平均入渗率无显著影响。可见,干扰主要通过降低藻结皮盖度,增加枯落物盖度和改变地表粗糙度,进而促进了土壤水分初始入渗。本研究可为黄土高原退耕地生物结皮管理提供科学依据。     

miR-252-5p通过靶向调控保幼激素酸甲基转移酶基因JHAMT的表达而影响果蝇变态发育

【目的】保幼激素酸甲基转移酶(juvenile hormone acid methyl transferase, JHAMT)是保幼激素(juvenile hormone, JH)合成通路中的关键限速酶。本研究旨在筛选并验证靶向调控黑腹果蝇Drosophila melanogaster JHAMT转录表达的miRNA,揭示miRNA在JH生物合成中的作用机理。【方法】首先通过miRanda, TargetScan和microT-CDS在线网站对靶向黑腹果蝇JHAMT的miRNA进行预测,取3个网站均能预测到的miRNA作为候选靶向JHAMT的miRNA;利用双荧光素酶系统对候选miRNA与JHAMT的靶向关系进行验证;qRT-PCR检测候选miRNA与JHAMT在黑腹果蝇生长发育中的表达模式;利用qRT-PCR和果蝇GAL4-UAS系统分别检测黑腹果蝇咽侧体中超表达miRNA对JHAMT的表达以及对黑腹果蝇变态发育的影响。【结果】 miRanda, TargetScan和microT-CDS分别预测到5, 18和16个靶向JHAMT的miRNA,共同预测到4个miRNA,分别是miR-252-5p, miR-277-3p, miR-1002-5p和miR-987-5p。双荧光素酶检测结果表明,miR-252-5p mimics可显著降低野生型JHAMT 3′UTR荧光素酶报告基因载体所表达的荧光素酶活性,而JHAMT 3′UTR区中miR-252-5p结合位点突变后,该抑制作用被解除。qRT-PCR检测结果表明,miR-252-5p与JHAMT在黑腹果蝇卵、幼虫及预蛹期的转录表达模式相反。咽侧体中超表达miR-252后,可显著降低JHAMT和JH初级反应基因Kr-h1的表达水平;且表现出类似JH缺失的表型,如化蛹时间推迟、体重变轻以及蛹期死亡增加。【结论】miR-252-5p可通过靶向作用于JHAMT参与JH生物合成调控,从而影响果蝇变态发育。     

基于文本挖掘的城市园林绿化信息化管理的需求分析方法

利用信息化的手段辅助园林绿化管理的日常工作能够大幅提高管理效率和管理的精准化水平。准确、充分和前沿的用户需求分析,是建立城市园林绿化信息化管理系统和平台顶层架构、功能组成、模块设计等的基础。但由于信息化建设和园林绿化行业管理在专业上存在偏差,使得信息化的需求分析和行业的预测工作沟通壁垒较高。结合大数据的特点,提出一套充分结合用户使用评价、网络新闻、会议记录等文本型大数据,利用文本挖掘方法进行城市园林绿化信息化管理的需求分析和预测的科学方法。分析了三类文本挖掘得出的高频词特点,结合前期对城市园林绿化信息化行业的实际调研,得出了当前中国园林绿化的管理目标在层级转变,办公自动化、物联网感知等前端管理逐步突显的需求特点,为推动园林绿化行业信息化工作提出了建设方向。     

低温大曲酵母菌分离和计数培养方法优化

低温大曲是清香型白酒酿造的核心因素之一,为酿造过程提供了物系、酶系和菌系。酵母菌是白酒发酵过程中最重要的功能微生物类群,研究大曲中的酵母菌种类和含量具有重要意义,对大曲质量评价也具有重要参考价值。但用常规酵母菌分离技术和培养基从大曲中分离酵母菌时易受优势丝状真菌（霉菌）的干扰,霉菌常常很快长满培养皿,将酵母菌覆盖,难以对酵母菌进行定量计数、观察和分离纯化。本研究根据酒醅发酵过程中随乙酸和乳酸含量的升高,霉菌含量急剧降低而酵母菌含量逐渐升高的现象,用常规培养基YPD为基础培养基,测试了添加不同量的乙酸、乳酸和丙酸（后者为常用食品防腐和防霉剂）,以及不同比例的乙酸乳酸组合物,对低温大曲中霉菌的抑制效果和对酵母菌生长的影响进行探究,发现在灭菌后的YPD中添加3.3mL/L乙酸、2.0mL/L丙酸或在乙酸乳酸1:3的情况下添加2.0mL/L乙酸,30℃培养3-5d之内可有效抑制低温大曲中的霉菌,实现对酵母菌的有效分离、计数和纯化培养,而单加乳酸对霉菌,特别是黄曲霉的抑制效果差。随后测试了以前我们从清香型白酒大曲和酒醅发酵过程中分离的13属18种酵母菌在这些培养基上的生长情况,发现这些酵母菌中的绝大多数,尤其是大曲和酒醅中的优势酵母菌种,均可以在这些加酸培养基上良好生长。综合考虑培养基的成本、配制的简便性及分离效果等因素,本研究推荐将灭菌后添加3.3mL/L乙酸的YPD固体培养基作为低温大曲酵母菌分离和定量计数的优化培养基。     

高粱体胚发生的组织细胞学观察

以Sb33高粱非胚性、胚性愈伤组织和体胚为材料,用传统石蜡切片法对各组织材料进行组织化学染色,对高粱胚性与非胚性愈伤组织以及体胚进行组织细胞学观察。结果表明：高粱非胚性愈伤组织无淀粉粒积累,高粱胚性愈伤组织淀粉粒积累较多,而与胚性愈伤组织相比,高粱体胚淀粉粒积累更多,这说明淀粉粒的积累与高粱体细胞的胚胎发生密切相关。此外,高粱可通过鱼雷胚基部产生球形胚的方式实现体胚的增殖,高粱离体再生途径以体细胞胚发生为主,并同时存在少量器官发生途径。在高粱体细胞胚胎发生中,外起源和内起源同时存在。本研究为高粱体细胞胚胎发生提供细胞学理论基础。     

射血分数保留的老年心力衰竭患者的临床特征

目的:分析和比较射血分数保留的心力衰竭(HFp EF)、射血分数中间值(HFmr EF)及射血分数降低的老年心力衰竭(HFr EF)患者临床特征的差异。方法:选取2017年9月至2018年8月哈尔滨市第一医院收治的老年慢性心力衰竭患者共287例,根据心动超声所测左室舒张末期内径(LVEF)值将其分为3组:HFpEF组175例、HFmr EF组50例和HFr EF组62例。比较各组患者一般情况、心动超声检查结果、血清学指标的差异。结果:(1)与HFr EF组患者比较,HFpEF组患者年龄、性别、吸烟史、体重指数(BMI)、原发冠心病、高血压、2型糖尿病患者比例、房颤发生率及心功能分级构成比均具有统计学差异(P0.05);(2)与HFr EF组相比较,HFpEF组患者的E/A比值,左房内径、肺动脉内径、LVEDD较小,而室间隔厚度较厚(P0.05);(3)与HFr EF组患者相比,HFpEF组血清总胆固醇、甘油三酯较高;血肌酐、血尿素氮、血尿酸、超敏C反应蛋白、N-末端脑钠肽前体水平较低,具有统计学差异(P0.05)。结论:老年HFpEF心力衰竭患者以女性居多,体重指数较大,以向心性肥胖为主,血压水平较高,心功能II级者比例高,有明显的舒张功能不全,易发生房性心律失常,房颤发生率高,主要病因为高血压。     

控制通气在全麻患儿支气管异物取出术中的应用研究

目的:探讨静脉全麻下小儿支气管异物取出术中控制通气的应用效果。方法:选择2014年1月～2018年7月本院收治的支气管异物患儿138例为研究对象,所有患儿均在静脉全麻下行支气管异物取出术,采用随机数字表法将其分为对照组(采用自主呼吸通气,69例)和观察组(采用控制通气,69例),比较两组手术时间、麻醉时间、苏醒时间、置镜首次成功率、置镜时间、置镜难易程度、心率、平均动脉压(MAP)、血氧饱和度(SpO_2)及不良反应发生率。结果:观察组手术时间、麻醉时间、苏醒时间均短于对照组(P0.05);观察组置镜首次成功率高于对照组,置镜难度低于对照组,置镜时间短于对照组(P0.05);观察组麻醉后心率、MAP水平低于对照组,SpO_2水平高于对照组(P0.05);观察组不良反应发生率均低于对照组(P0.05)。结论:静脉全麻患儿支气管异物取出术中,采用控制通气的方式效果较好,其具有较强的可控性,且安全性高,是一种较理想的手术麻醉方案。     

比较沙库巴曲缬沙坦与缬沙坦对慢性心衰患者心肾功能的影响

目的:比较沙库巴曲缬沙坦与缬沙坦在慢性心力衰竭(Chronic heart failure, CHF)患者治疗中对心功能及肾功能的影响。方法:按WHO诊断标准随机选择CHF患者,对照组30例,给予缬沙坦80 mg/qd起,2-4周后增至160 mg/qd;研究组30例,给予沙库巴曲缬沙坦100 mg/bid,2-4周后增至200 mg/bid。治疗8周后,比较两组治疗后LVEF、LVESD和LVEDD的变化,以及对Scr、Cys C的影响。结果:(1)两组患者的性别、年龄、NYHA心功能分级等一般情况,以及治疗前LVEF、LVESD、LVEDD、Scr、Cys C等指标比较均无显著性差异(P0.05),具有可比性。(2)治疗8周后,对照组的LVEF较治疗前显著升高(38.87±6.95%VS.34.73±7.89%,P0.05),LVESD、LVEDD均较治疗前显著降低(44.43±8.26 mm VS.50.77±8.31 mm,P0.05;54.77±5.84 mm VS.59.87±7.57 mm,P0.05),Cys C较治疗前显著降低(1.00±0.33 mg/LVS.1.27±0.52 mg/L,P0.05),Scr较治疗前无显著性差异(82.24±30.38μmol/LVS.91.19±36.81μmol/L,P0.05)。研究组的LVEF较治疗前显著升高(38.70±7.29%VS.33.53±9.12%,P0.05),LVESD、LVEDD均较治疗前显著降低(43.33±9.10 mm VS.49.47±6.84 mm,P0.05;54.53±6.20 mm VS.60.23±8.30 mm,P0.05),Cys C较治疗前显著降低(1.01±0.26 mg/LVS.1.32±0.53 mg/L,P0.05),Scr较治疗前无显著性差异(84.31±32.25μmol/LVS.94.43±38.73μmol/L,P0.05)。比较两组治疗后各项指标均无显著性差异(P0.05)。结论:在CHF的治疗过程中,沙库巴曲缬沙坦与缬沙坦均能改善心功能,且在短时间内具有一定的肾功能保护作用。     

Hydrophilic C terminus of Salicornia europaea vacuolar Na+/H+ antiporter is necessary for its function

Plant vacuolar Na⁺/H⁺ antiporters play important roles in cellular ion homeostasis, vacuolar pH regulation and sequestration of Na⁺ ions into the vacuole. Previous research showed that hydrophilic C-terminal region of Arabidopsis AtNHX1 negatively regulates the Na⁺/H⁺ transporting activity. In this study, we truncated the hydrophilic C terminus of a vacuolar Na⁺/H⁺ antiporter gene from Salicornia europaea (SeNHX1) to generate its derivative, SeNHX1- ΔC. Expression of SeNHX1 and SeNHX1- ΔC in yeast mutant showed that SeNHX1 significantly improved the tolerance to NaCl; however, the expression of SeNHX1- ΔC enormously decreased the tolerance to NaCl. Overall, these results suggest that the hydrophilic C-terminal region of SeNHX1 is required for Na⁺/H⁺ exchanging activity of SeNHX1.