大叶藤黄叶片角质层的酶分离技术

角质层运输特征的研究在生态学、环境和农用化学等方面都具有非常重要的意义 ,完好地分离角质层是进行这方面研究的前提。本文以生长在西双版纳热带雨林中的大叶藤黄为材料 ,探讨了角质层的酶分离技术。结果表明 ,30℃时用 2 % (w/v) ,pH 3 0的果胶酶和纤维素酶溶液浸泡大叶藤黄叶圆片 9h ,叶圆片边缘角质层分离 ,浸泡 5d可分离到完整的角质层 ,角质层在硼酸盐缓冲液 (0 0 1mol·L-1,pH 9 0 )中充分浸泡数日去除石炭酸 ,空气中干燥 ,室温下于聚乙烯的盒子保存备用     

苦参碱注射液对急性病毒性心肌炎的治疗作用

目的：观察苦参碱注射液治疗急性病毒性心肌炎（AVM）的临床疗效。方法：将AVM患者120例随机分为治疗组63例及对照组57例,对照组采用常规疗法,治疗组在对照组基础上给予苦参碱注射液治疗,连用2周。观察临床疗效。结果：治疗组总有效率90.5%,对照组总有效率73.7%,两组比较有显著性差异。治疗组治疗后血清肌酸磷酸激酶（CPK）、天冬氨酸转氨酶（AST）及血清乳酸脱氢酶（LDH）较对照组治疗后明显降低,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论：苦参碱对急性心肌炎有良好疗效。     

改良手术方法在腮腺肿瘤手术中的运用

目的:改良腮腺肿瘤手术方法,以期最大程度恢复术后患者美容及功能。方法:采用以下改良术式:①采用隐蔽的面部除皱切口,避免了常规术式的颈部切口;②采用总干法解剖面神经,减少了面神经周围支损伤的机率;③保留耳大神经,避免术后耳垂麻木;④采用口腔修复膜,减少了术后Frey综合征的发生;⑤采用蒂在上方的胸锁乳突肌肌瓣填塞腮腺切除后的凹陷区,避免了常规术式后的面部畸形。结果:采用该方法对36例患者行腮腺切除术,术后随访6月～4年,患者面部疤痕不明显,外形恢复良好,无面瘫,无Frey综合征出现。结论:改良的腮腺切除术克服了传统术式的缺陷,值得进一步推广和普及。     

用超大孔树脂吸附和低乙醇浓度洗脱提纯异黄酮的研究

传统大孔吸附树脂吸附分离中草药有效成分通常需要高浓度的有机溶剂作为洗脱剂,在大规模生产中具有安全隐患和对环境的污染。本文以异黄酮为目标产物,考察了8种不同骨架、不同孔径的树脂对异黄酮的吸附分离性能,其中包括本实验室自制的孔径为1000nm的超大孔树脂。实验结果表明,与传统大孔树脂吸附层析法相比,超大孔树脂吸附层析不仅工艺简单、快速而且大幅度降低了有机溶剂的使用量。洗脱时,乙醇浓度由70％降低到20％。     

合欢皮提取物抑制血管生成的体内药效学研究

为了探讨合欢皮提取物体内对血管生成的抑制作用。本文采用MTT法和Matrigel plug方法考察合欢皮提取物对人血管内皮细胞(HMEC)增殖和体内Matrigel胶小管形成的影响,运用Lewis肺癌转移小鼠模型,观察合欢皮提取物对小鼠Lewis肺癌的疗效。结果表明合欢皮提取物可明显抑制HMEC细胞的体外增殖(IC50为30μg/mL),并且呈明显的剂量依赖性,同时具有抑制Matrigel plug中的血管新生的作用。合欢皮提取物还能够明显抑制Lewis肺癌肿瘤细胞生长,减少转移病灶。提示合欢皮提取物具有明显抑制血管生成的作用,有可能成为有效的血管生成抑制剂。     

胞外ATP对AlCl3诱导的细胞死亡过程中胞内H2O2和Ca2+水平的影响及其生理机制分析

该实验以烟草悬浮细胞 BY 2 为材料,在烟草悬浮细胞中分别加入0.05、0.10、0.15、0.20 mmol·L^-1AlCl₃,以等体积去离子水处理的悬浮细胞液为对照,并依据前述实验结果选择0.15 mmol·L^-1 AlCl₃,分别添加5 mmol·L^-1 DMTU(H₂O₂ 抑制剂)、20 μmol·L^-1CaCl₂、15 μmol·L^-1 LaCl₃(Ca²⁺通道抑制剂)和50 μmol·L^-1 ATP设计多项处理,分析胞外ATP(eATP)对铝离子(Al³⁺)胁迫引起的植物细胞死亡及其胞内H₂O₂、Ca²⁺的影响,以揭示Al³⁺胁迫下植物调节细胞死亡的可能机制,进一步扩展对eATP功能的认知。结果显示：(1)随着 AlCl₃ 胁迫浓度的提高,细胞死亡水平和胞内H₂O₂水平上升,而胞内Ca²⁺和eATP水平则逐渐降低。(2)外援施加H₂O₂抑制剂 DMTU(二甲基硫脲)和Ca²⁺能够有效缓解AlCl₃诱导的细胞死亡水平的上升;而Ca²⁺通道抑制剂LaCl₃(三氯化镧)则加剧了AlCl₃胁迫下的细胞死亡。(3)在AlCl₃胁迫下对细胞添加外源ATP,能够缓解AlCl₃胁迫下胞内H₂O₂水平上升和Ca²⁺水平下降的同时,并显著降低AlCl₃胁迫导致的细胞死亡。研究表明, Al³⁺以剂量依赖的模式提升细胞死亡和细胞内H₂O₂的水平并降低胞内Ca²⁺和eATP水平,AlCl₃诱导的细胞死亡受到H₂O₂和Ca²⁺水平变化的调节,eATP可以通过调节H₂O₂与Ca²⁺水平缓解AlCl₃诱导的细胞死亡。推测Al³⁺胁迫可能通过抑制钙离子通道而破坏了细胞内H₂O₂和Ca²⁺之间的协同关系,外源ATP对Al³⁺诱导H₂O₂上升的缓解作用可能是由于其提升了细胞的抗氧化能力。     

Overexpression in tobacco of a tomato GMPase gene improves tolerance to both low and high temperature stress by enhancing antioxidation capacity

GDP-mannose pyrophosphorylase (GMPase: EC 2.7.7.22) plays a crucial role in the synthesis of l-ascorbate (AsA) and the consequent detoxification of reactive oxygen species (ROS). Herein, a GMPase (accession ID DQ449030) was identified and cloned from tomato. The full-length cDNA sequence of this gene contains 1,498 bp nucleotides encoding a putative protein with 361 amino acid residues of approximate molecular weight 43 kDa. Northern blot analysis revealed that the GMPase was expressed in all examined tomato tissues, but its expression level was up-regulated in tomato plants subjected to abnormal temperatures. We then overexpressed this tomato GMPase in tobacco plants and observed that the activity of GMPase and the content of AsA were significantly increased by two- to fourfold in the leaves of transgenic tobacco plants. The effect of this gene overexpression was superimposed by the treatments of high or low temperature in tobacco, since the activities of both chloroplastic SOD (superoxide dismutase EC 1.15.1.1), APX (ascorbate peroxidase EC 1.11.1.7) and the content of AsA in leaves were significantly higher in transgenic plants than those of WT, while the contents of H₂O₂ and O₂ ^−· were reduced. Meanwhile, relative electric conductivity increased less in transgenic plants than that in WT, and the net photosynthetic rate (P _n) and the maximal photochemical efficiency of PSII (F _v/F _m) of transgenic plants were notably higher than those of WT under temperature stresses. In conclusion, the overexpression of GMPase increased the content of AsA, thereby leading to the increase in tolerance to temperature stress in transgenic plants.