全文获取类型
收费全文 | 1969篇 |
免费 | 297篇 |
国内免费 | 1207篇 |
出版年
2024年 | 28篇 |
2023年 | 57篇 |
2022年 | 102篇 |
2021年 | 108篇 |
2020年 | 106篇 |
2019年 | 113篇 |
2018年 | 70篇 |
2017年 | 79篇 |
2016年 | 87篇 |
2015年 | 132篇 |
2014年 | 153篇 |
2013年 | 145篇 |
2012年 | 186篇 |
2011年 | 188篇 |
2010年 | 164篇 |
2009年 | 185篇 |
2008年 | 200篇 |
2007年 | 182篇 |
2006年 | 196篇 |
2005年 | 164篇 |
2004年 | 147篇 |
2003年 | 119篇 |
2002年 | 95篇 |
2001年 | 110篇 |
2000年 | 96篇 |
1999年 | 48篇 |
1998年 | 25篇 |
1997年 | 20篇 |
1996年 | 24篇 |
1995年 | 17篇 |
1994年 | 16篇 |
1993年 | 8篇 |
1992年 | 10篇 |
1991年 | 13篇 |
1990年 | 5篇 |
1989年 | 11篇 |
1988年 | 3篇 |
1987年 | 5篇 |
1986年 | 3篇 |
1985年 | 8篇 |
1984年 | 5篇 |
1983年 | 5篇 |
1982年 | 9篇 |
1981年 | 3篇 |
1976年 | 2篇 |
1965年 | 2篇 |
1963年 | 2篇 |
1958年 | 2篇 |
1957年 | 4篇 |
1953年 | 3篇 |
排序方式: 共有3473条查询结果,搜索用时 390 毫秒
181.
182.
183.
方瑶毛旭虎 《现代生物医学进展》2012,12(22):4358-4359
RAW264.7细胞具有很强的黏附和吞噬抗原的能力,是研究微生物学、免疫学的常用细胞株.很多研究者发现这种细胞形态极不稳定,细胞状态的评价也很困难.本文作者结合RAW264.7培养经历及文献资料探讨RAW264.7细胞培养的经验教训和评价细胞状态的方法,旨在为培养该细胞的科研工作者提供一定的借鉴. 相似文献
184.
目的:探讨表皮生长因子受体(EGFR)在肺内的表达对博莱霉素(BLM)诱导小鼠肺纤维化中上皮-间质转分化的影响。方法:将40只4~6周龄C57BLB/c雄性小鼠随机分为正常对照组(气管滴入PBS),纤维化组(气管滴入BLM 3 mg/kg),EGFRRNAi组(气管滴入BLM 3 mg/kg+气管滴入siRNA 20μl)和RNAi阴性对照组(气管滴入BLM 3 mg/kg+气管滴入siRNA阴性对照20μl)。实验第10天处死小鼠,收获肺组织,检测羟脯氨酸含量;采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测EGFR和α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)mRNA的表达;肺组织切片行HE染色观察肺组织病理改变,免疫组化染色检测EGFR和α-SMA表达。结果:纤维化组EGFR和α-SMA两者的mRNA和蛋白表达均较正常对照组显著增加;RNAi组肺病理损伤较纤维化组减轻,气道上皮下胶原沉积及肺羟脯氨酸含量减少(P<0.05),肺组织EGFR和α-SMA两者的mRNA和蛋白表达均较纤维化组显著下降(P<0.05)。结论:在博来霉素诱导的肺纤维化中EGFR RNAi抑制EGFR活化,下调α-SMA的表达,减轻了博莱霉素诱导的肺纤维化病理改变。其抑制肺纤维化病理过程可能与其抑制上皮-间质转分化(EMT)有关。 相似文献
185.
186.
支链氨基酸的抗疲劳作用 总被引:2,自引:0,他引:2
支链氨基酸作为必需氨基酸,不仅是合成机体蛋白质的原料,而且具有特殊的生理、生物学功能。其代谢与抗疲劳作用的机理在本文中进行了详细阐述。 相似文献
187.
188.
189.
构建含有单链鼠白细胞介素12(mIL-12)基因,并可经米非司酮调控表达的真核载体,在体外鉴定其调控表达效果.用PcR技术从GCp35Ep40PN质粒上获取白细胞介素12的p40和p35亚基的基因,通过2次PCR技术引入linker后得到单链白细胞介素12基因,将其与米非司酮诱导调控系统克隆入pDC312质粒,构建成真核表达载体pDC-RumIL-12,通过限制性内切酶和PCR鉴定其正确性.在体外用脂质体转染法将pDc-RumIL-12载体转染HEK293细胞株,以不同的剂量米非司酮诱导载体表达,然后用ELISA法检测培养液上清中mIL-12蛋白的含量.测序结果表明所得鼠白细胞介素-12融合单链基因序列与设计相一致.酶切分析和PCR证实载体pDC-RumIL-12构建正确.将pDc-RUmlL-12转染HEK293细胞并经米非司酮诱导表达后,ELISA检测结果表明该栽体有良好的调控能力.没有诱导剂米非司酮时,只有极少量的mIL-12蛋白表达,而加入诱导剂米非司酮后,mIL-12表达量明显增加,并在一定范围内与米非司酮剂量呈正比.成功构建了含有单链鼠白细胞介素12(mIL-12)基因,并可经米非司酮调控表达的真核栽体,可用于肿瘤的基因治疗研究. 相似文献
190.
克雷伯氏菌甘油脱氢酶dhaD的克隆表达、纯化及酶学性质研究 总被引:1,自引:0,他引:1
以克雷伯氏菌基因组DNA为模板,扩增得到编码甘油脱氢酶(GDH)的基因dhaD,将其克隆到大肠杆菌表达载体pET-28a(+)上,在E.coliBL21(DE3)中诱导表达,利用表达载体pET-28a(+)上的6·His-Tag标记选用Ni柱亲和层析法纯化表达具有活性的甘油脱氢酶(GDH),纯化后比酶活达到156U/mg,纯化倍数达4.6倍,回收率为67.4%。并初步研究了该酶的酶学性质,酶反应的最适pH为11.0,在pH7.0~12.0范围内稳定;酶反应的最适温度为30℃,稳定范围为25~45℃; 酶动力学参数以甘油为底物的Km为0.54 mmol/L, Vmax为0.49 μmol/(mL·min)。 相似文献