人-禽双价流感新型DNA疫苗构建及免疫保护实验研究

流感病毒是威胁人类和动物健康的重要病原. 研究表明, 流感大流行株的形成与人流感和禽流感毒株基因重配密切相关. 因此在目前流感流行趋势下, 在人流感和禽流感疫苗开发中考虑对人流感和禽流感流行亚型进行共预防具有重要意义. 本研究针对人-禽多价流感疫苗进行了尝试, 构建了共表达H5亚型HA和H3亚型主要抗原区HA1的DNA疫苗pVAX1-H5/H3, 并进行了小鼠免疫攻毒研究. 结果表明, 攻毒前pVAX1-H5/H3有效诱导小鼠产生了针对 H5HA和H3HA1的体液抗体和细胞免疫应答. 当采用H5亚型和H3亚型流感病毒攻击时, pVAX1-H5/H3实验组小鼠对病毒攻击产生了抵抗作用, 显示了更快的体重回复及肺部病毒清除速度. 在H3亚型流感保护方面, pVAX1-H5/H3作用显著优于单表达H3HA1的pVAX1-H3. 结果证实, 共表达双亚型HA策略可对相关流感病毒攻击产生保护, 不同HA间未发现免疫干扰现象, 同时存在潜在的增益效果. 本研究为人-禽多价流感疫苗的研发奠定了基础.     

西伯利亚蓼PsGRX基因的克隆及其在NaHCO_3胁迫下的表达

采用cDNA末端快速扩增（RACE）技术从西伯利亚蓼叶cDNA文库中克隆到谷氧还蛋白基因（PsGRX）的完整编码区cDNA序列（GenBank注册号为GU139794）,长度为465bp,编码106个氨基酸。根据与其他植物谷氧还蛋白的氨基酸序列的比对以及系统进化分析的结果,初步确定此基因为谷氧还蛋白基因家族成员。实时定量PCR的结果显示,PsGRX在西伯利亚蓼的叶、茎、地下茎中均有表达,叶中表达量最高,地下茎和茎中较低。在NaHCO3胁迫的过程中,此基因在叶、茎和地下茎中的表达模式也有较明显的差异。     

昆虫的听觉器官

昆虫的听器是一类对声波具有特异感受作用的器官,对其生存具有非常重要的意义。昆虫的听器主要有听觉毛、江氏器和鼓膜听器3种类型。本文主要介绍了昆虫3种听器的结构和功能特点,并从系统发生和个体发育角度介绍了鼓膜听器的演化过程。     

蜂毒肽抑杀病原菌的超微结构观察

本研究比较了蜂毒肽对4种不同病原菌生长的影响及其抑杀菌作用的差异,并利用电子显微镜观察了蜂毒肽抑杀菌过程中超微结构的变化.结果表明,蜂毒肽对白菜软腐病菌的杀菌作用最强,而且速效;对酵母菌和番茄叶霉病菌孢子同样具有很强的杀灭作用,但作用时间延长;对金黄葡萄球菌为低浓度抑菌,高浓度杀菌作用.实验中观察到,蜂毒肽在抑杀菌过程中超微结构的变化有3种方式致死细胞：一是膜孔洞式,即蜂毒肽作用后在细胞膜区形成小空泡,随之由内向外扩展穿透细胞壁形成孔洞,引起菌体内容物泄漏死亡,显示了膜孔洞的形成过程;二是质壁分离式,小空泡以横向扩展使细胞产生类似质壁分离样空腔,最后细胞裂解死亡;三是细胞质空腔式,蜂毒肽进入细胞后与细胞质中的类膜系统的膜结合引起解体,细胞质固缩,出现空腔,细胞死亡.值得注意的是蜂毒肽抑杀菌作用的强弱及速效性与其不同杀菌方式相关.综上结果,蜂毒肽各种抑杀菌方式的共同点是蜂毒肽与膜磷脂分子结合相互作用所致.     

14种菊科植物提取物对菜青虫的杀虫活性

用胜红蓟、黄花蒿、青蒿、艾蒿、鬼针草、三叶鬼针草、鱼眼草、小鱼眼草、紫茎泽兰、千里光、希签草、万寿菊、肿柄菊、苍耳等１４种菊科植物的石油醚、氯仿、丙酮、乙醇、甲醇和水提取物对菜青虫５龄幼虫的生测结果表明,黄花蒿、青蒿、艾蒿、鱼眼草、小鱼眼草、紫茎泽兰、万寿菊等７种菊科植物甲醇和乙醇提取物具有较高的杀虫活性。此结果为进一步从菊科植物中提取,分离和筛选高活性杀虫活性成分奠定了基础。     

濒危植物蒙古扁桃花粉活力和柱头可授性研究

用过氧化氢酶法测定蒙古扁桃花粉的活力和寿命,用联苯胺-过氧化氢法测定柱头可授性。结果表明,蒙古扁桃花粉活力在散粉后第2天最高,3d后活力迅速下降,三种类型的植株的花粉活力下降速度存在差异,其活力可持续30d左右。短柱头植株柱头在开花后1d可分泌黏液,长柱头和中柱头花植株的柱头在开花后2d才分泌黏液,短柱头分泌黏液的持续时间较后者长。柱头可授性持续时间同种之间也存在差异,长柱头和中柱头植株可达6d,而短柱头花植株可持续10d左右。     

肠道病毒71型灭活疫苗免疫恒河猴在攻毒实验中的感染动力学

本文旨在根据前期研究建立的恒河猴感染动物模型,对同期研制的肠道病毒71型(EV71)实验性灭活疫苗免疫动物进行全面的免疫保护性评价。评价指标包括病毒攻击后动物体内病毒载量及病理学变化,根据所得结果进行实验性疫苗免疫后动物在病毒攻击中的感染动力学分析。3个疫苗剂量(20、80、320EU)免疫的恒河猴均出现不同效价的中和抗体,80EU和320EU剂量组在二次免疫后第6周抗体效价达1∶128～1∶256,经104.5CCID50病毒鼻腔攻击后均未检出阳性病毒载量。20EU剂量组中,淋巴器官、中枢神经系统及其他主要脏器均出现比对照组低但仍为阳性的病毒增殖现象。病理学方面,各剂量组免疫恒河猴的中枢神经系统以及肺等器官均未出现相关病理损伤。本实验在确定该疫苗对恒河猴有效保护性的同时,亦为明确EV71灭活疫苗免疫剂量提供了直接的实验依据。     

电晕电场对沙生植物愈伤组织诱导及分化的影响

用不同电场剂量处理花棒和杨柴的下胚轴后进行愈伤组织诱导及分化培养,以探讨电晕电场对其愈伤组织诱导与分化的影响.结果表明,电场处理可以显著提高愈伤组织诱导率和分化率,并有效降低愈伤组织的褐化率.花棒在电场强度为5 kV/m下处理60 min时,出愈率可达90.5%,分化率可达88.7%;杨柴在电场强度为3 kV/m下处理100 min时,出愈率可达95.8%,分化率可达78.9%.     

MAGE-A1,A2,A3,A4在膀胱移行细胞癌组织及细胞株中基因表达的研究

目的研究膀胱移行细胞癌(TCC)中黑色素瘤抗原(MAGE)基因表达。方法逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测20例膀胱TCC患者癌组织和3株膀胱TCC细胞株T24、EJ、BIU87中MAGE-A1、A2、A3、A4基因mRNA表达。结果20例膀胱TCC癌组织中19例(95%)至少表达一种MAGE-A基因,12例MAGE-A1阳性(60%),16例MAGE-A2阳性(80%),11例MAGE-A3阳性(55%),18例MAGE-A4阳性(90%),MAGE-A1-4均阳性8例(40%)。膀胱TCC细胞株T24中MAGE-A1-4基因均表达,EJ中MAGE-A3、A4基因表达,BIU87中MAGE-A2、A3、A4基因表达。结论MAGE基因在膀胱TCC中有较高表达,可望成为膀胱TCC免疫治疗的靶基因。