AFLP指纹图谱试验体系在甜菜无融合生殖系中的应用

目的：比较甜菜无融合生殖品系M14子代之间的同一性及亲缘关系,从而验证AFLP试验体系在甜菜无融合生殖系中的适用性。方法：利用已建立的AFLP试验体系,通过琼脂糖凝胶电泳和聚丙烯酰胺凝胶电泳检测以及遗传距离的比较来验证这一试验体系。结果：M14子代之间及二倍体甜菜之间的同一性较好,其亲缘关系也较近。结论：验证了所建立的AFLP试验体系的适用性,同时也确证了AFLP技术在构建DNA指纹图谱中的优越性,为无融合生殖的进一步研究奠定了基础。     

几种小分子化合物对P53蛋白与SV40大T抗原之间相互作用的影响

以P53蛋白与SV40大T抗原之间的相互作用作为药物分子靶标,利用酵母双杂交系统的α-半乳糖苷酶活力的测定方法,测定了两个系列的化合物对于P53蛋白与SV40大T抗原相互作用的影响。其中一个系列包括ZnCl2,MgCl2,CaCl2,和Cu-Cl2、BaCl2等二价金属盐;另一个系列是几种新疆特色植物的天然提取物,包括蒜氨酸、大蒜素、罗丹明B类物质AJ-8、黄酮、苦参碱、去氢骆驼蓬碱和骆驼蓬碱等。结果发现,ZnCl2能够特异使P53蛋白与SV40大T抗原之间的相互作用增强15％左右,而大蒜素和黄酮能够降低这两个蛋白的相互作用,降低程度分别为40％和30%,其它药物基本不影响两个蛋白的相互作用。     

APC蛋白的结构特征及其与细胞骨架的关系

编码APC蛋白(adenomatous polyposis coli,APC)基因的缺失突变会导致家族性和散发性的结肠癌,APC蛋白除了能直接参与Wnt信号途径调节β—catenin的浓度之外,最近的研究表明APC蛋白能够与细胞骨架的主要成分微管和微丝直接或间接结合,通过调节微管的解聚和聚合,间接调节染色体的分离,作为潜在的细胞骨架调节分子将细胞骨架与重要的细胞信号转导通路紧密联系在一起。     

亚贡叶中营养成分和功能性化学成分分析

亚贡[Smallanthus sonchifolius (Poepp. et Endl.) H. Robinson]为多年生草本植物[1],原产南美洲安第斯山脉,是当地印第安人的传统根茎食品, 在我国海南、台湾等地有种植.亚贡生长在亚热带气候、无霜冻、湿度大、常年云雾缭绕且海拔1 000 m以上的高山中.亚贡可生长至2～3 m,根茎在生长7～12个月后成熟.根茎中果寡糖含量丰富[2],其低热量、高甜度的特性适合糖尿病人及减肥者食用[3].     

盘基网柄菌发育中的细胞粘附分子及其信号转导

在盘基网柄菌发育早期,DdCAD-1和csA调节了变形虫细胞间的粘着,调控该过程的机制类似于胚胎发育中上皮细胞层的闭合。完成网柄菌发育的一个必需分子是gpl50异嗜性粘附分子。盘基网柄菌β-连环蛋白同源物Aardvark(Aar)的缺乏使细胞间失去粘着连接,Aar也有信号转导功能,调控了前孢子细胞基因的表达。因此,细胞间的粘着是盘基网柄菌发育的一个重要组成部分,并与调控形态发生过程的信号转导有密切相互作用关系。     

金双歧对早产儿坏死性小肠结肠炎预防作用的研究

目的探讨微生态制剂金双歧对早产儿早期应用是否能起到预防坏死性小肠结肠炎(NEC)的发生.方法对2000年1月～2002年12月入住青海省红十字医院新生儿,符合早产儿诊断126例,随机分治疗组、对照组.治疗组在治疗原发病的基础上,24 h内即加用双歧杆菌三联片(商品名:金双歧)口服或鼻饲,对照组只治疗原发病,观察2周内NEC的发生情况.结果治疗组62例,发生NEC 8例,对照组64例,发生NEC 20例.结论及早对早产儿补充微生态制剂,使其占据肠黏膜表面,作为生物屏障构成肠道的定植阻力,阻止致病菌入侵,或刺激机体免疫系统,增强机体免疫功能,从而起到降低早产儿NEC的发生.     

重组铜绿假单胞菌外毒素结构域Ia片段的佐剂功效研究

采用分子克隆技术,将铜绿假单胞菌PA103株编码的外毒素结构域Ia(Domain Ia)的基因重组于原核表达载体pET-42b( )上,构建了pET-EPA103蛋白表达载体。转化感受态大肠杆菌DE3。经IPTG诱导表达,初步纯化表达蛋白,用以免疫BALB／c纯系小鼠。制备小鼠脾淋巴细胞悬液,经刀豆素A(ConA)刺激后,用MTT比色法检测特异性淋巴细胞增殖反应。通过rEPA皮下注射BALB／c小鼠耳廓,诱导小鼠迟发型过敏反应(DTH)。采用特异性淋巴细胞增殖反应和DTH试验来检测pET-EPA103表达蛋白所引起的小鼠细胞免疫应答水平,淋巴细胞增殖情况与DTH均可间接反映细胞免疫应答水平,进而评价重组铜绿假单胞菌外毒素(rEPA)Domain Ia蛋白片段的佐剂功效。     

阴离子交换色谱纯化甲型肝炎病毒(YN5株)的研究

对阴离子交换色谱纯化HAV的合适条件进行了探索。先使用“试管法”研究DEAE Sepharose Fast Flow凝胶结合HAV及病毒解离的条件,然后分别使用线性阶段洗脱和阶段梯度洗脱在柱色谱上进行了HAV的纯化。结果表明经过阴离子交换色谱纯化得到的病毒保持有抗原性和免疫原性,HAV抗原回收率大于85％,杂蛋白去除率大于80％,纯化的病毒样品中的内毒素与宿主DNA的含量也大大降低,证明阴离子交换色谱可用于HAV疫苗的纯化。     

含谷胱甘肽硫转移酶基因工程菌表达条件研究

将重组谷胱甘肽硫转移酶 (GST)大肠杆菌表达株BL2 1(DE3 )PGEX 作为研究对象 ,进行了生长及表达条件的优化研究 ,分析比较了不同培养条件对菌体生长的影响以及诱导剂的添加量对产物表达量的影响。     

ESBLbla SHV-12基因片段的克隆和序列分析

分析黑龙江省分离的肺炎克雷伯菌产超广谱 β 内酰胺酶基因片段的序列 ,确定该基因所产ESBLs的亚型。用双纸片法初筛检测产ESBLs菌株 ,聚合酶链反应扩增ESBLs编码基因片段 ,并将其克隆至pUC19载体中 ,双脱氧链终止法测定核苷酸序列以确定亚型。测序结果证实所获得的ESBLs基因片段含10 4 7个核苷酸 ,其基因型为SHV型 ,与SHV 12型ESBLs编码基因相同。上述结果表明 ,黑龙江省内分离的产超广谱 β 内酰胺酶肺炎克雷伯菌含有SHV 12编码基因。