全文获取类型
收费全文 | 4954篇 |
免费 | 406篇 |
国内免费 | 108篇 |
专业分类
5468篇 |
出版年
2023年 | 37篇 |
2022年 | 83篇 |
2021年 | 174篇 |
2020年 | 128篇 |
2019年 | 163篇 |
2018年 | 199篇 |
2017年 | 138篇 |
2016年 | 188篇 |
2015年 | 258篇 |
2014年 | 291篇 |
2013年 | 389篇 |
2012年 | 399篇 |
2011年 | 336篇 |
2010年 | 223篇 |
2009年 | 189篇 |
2008年 | 243篇 |
2007年 | 208篇 |
2006年 | 215篇 |
2005年 | 186篇 |
2004年 | 172篇 |
2003年 | 161篇 |
2002年 | 157篇 |
2001年 | 132篇 |
2000年 | 98篇 |
1999年 | 97篇 |
1998年 | 51篇 |
1997年 | 35篇 |
1996年 | 36篇 |
1995年 | 28篇 |
1994年 | 15篇 |
1993年 | 21篇 |
1992年 | 30篇 |
1991年 | 26篇 |
1990年 | 23篇 |
1989年 | 27篇 |
1988年 | 25篇 |
1987年 | 24篇 |
1986年 | 18篇 |
1985年 | 25篇 |
1984年 | 20篇 |
1983年 | 12篇 |
1982年 | 12篇 |
1979年 | 16篇 |
1978年 | 15篇 |
1977年 | 14篇 |
1975年 | 11篇 |
1974年 | 10篇 |
1973年 | 11篇 |
1972年 | 12篇 |
1971年 | 12篇 |
排序方式: 共有5468条查询结果,搜索用时 15 毫秒
91.
多发性骨髓瘤细胞中一个表达上调基因的克隆与分析 总被引:1,自引:0,他引:1
根据GenBank收录的多发性骨髓瘤细胞株 (ARH 77)表达上调ESTAF4 2 5 30 0设计引物 ,运用RT PCR检测了 5例多发性骨髓瘤患者及 4例正常人骨髓细胞中该EST的表达水平 .Northern印迹杂交分析该EST在多种组织中的表达 .进一步利用该EST作探针 ,筛选ARH 77cDNA文库 ,获得全长cDNA克隆 ,对该序列进行了分析 .结果显示 ,该EST在多发性骨髓瘤患者骨髓细胞中亦有较高的表达 ,而在正常人骨髓细胞中低表达 .经测序证实 ,该cDNA全长为 4 5 2bp(GenBank收录号 :AF4 87338) .预测其编码一个 5 7个氨基酸的小分子量蛋白质 ,属于与DNA复制有关的解旋酶 引物酶基因家族的新成员 .该基因在多发性骨髓瘤细胞中表达上调 ,其表达水平的改变可能与多发性骨髓瘤的发生与发展有关 相似文献
92.
铁线蕨中间纤维的研究及某些植物类角蛋白的比较分析 总被引:1,自引:0,他引:1
应用整装电镜制样技术,结合选择性抽提方法在铁线蕨(AdiantumphilippenseL.)叶细胞中观察到直径10nm的纤维网络结构。免疫印迹结果显示:经选择性抽提得到的纤维蛋白与动物角蛋白抗体有免疫交叉反应,间接免疫荧光标记也得到类似结果,而且此类蛋白能在体外自组装为10nm或更粗的纤维。说明蕨类植物细胞中存在类角蛋白中间纤维网络。免疫印迹结果表明,螺旋藻(SpirulinasubtillisinaKutz.)细胞,地钱(MarchantiapolymorphaL.)叶状体,铁线蕨(A.philippenseL.)、银杏(GinkgobilobaL.)、白菜(BrasicapekinensisRupr.)的叶组织经选择性抽提后得到的蛋白均与动物角蛋白抗体有免疫交叉反应。其中,螺旋藻仅含有两种类酸性角蛋白,而其余4种植物材料均含有3种类酸性角蛋白及3种类碱性角蛋白。结合以往实验结果,我们认为类角蛋白在植物细胞中是普遍存在的。 相似文献
93.
建立了纯化光合膜蛋白质复合体Cytb6f的新方法。与现有方法相比,新方法简单明了,只包括透析离心和用硫酸铵分级沉淀两个步骤,而且适于大批量制备。按此方法从菠菜叶绿体分离纯化的制剂含9.8nmolCytf·mg-1;SDSPAGE显示4条主要区带及1条低分子量区带,背景干净;Cytb6(b型血红素)∶Cytf=2∶1(mol∶mol),Chla∶Cytf=1∶1(mol∶mol);酶活性(PQ2H2→Cytc)80μmolCytc·nmolCytf-1·h-1左右;产率可达38%。 相似文献
94.
Ibrahim M Hassan W Meinerz DF Leite Gde O Nogueira CW Rocha JB 《Biological trace element research》2012,147(1-3):309-314
It is widely accepted that oxidative stress plays a central role in alcohol-induced pathogenesis. The protective effect of binaphthyl diselenide (NapSe)2 was investigated in ethanol (Etoh)-induced brain injury. Thirty male adult Wistar rats were divided randomly into five groups of six animals each and treated as follows: (1) The control group received the vehicle (soy bean oil, 1 mL/kg, p.o.). (2) Ethanol group of animals was administered with ethanol (70% v/v, 2 mL/kg, p.o.). (3) (NapSe)2 1 mg/kg, 1 mL/kg plus ethanol 70% (v/v, 2 mL/kg, p.o. (5) (NapSe)2 10 mg/kg, 1 mL/kg) plus ethanol 70% (v/v, 2 mL/kg, p.o). After acute treatment, all rats were sacrificed by decapitation. Evidence for oxidative stress in rat brain was obtained from the observed levels of thiobarbituric acid reactive species, of non-protein thiol (NPSH) groups, and of ascorbic acid, as well as from the activities of catalase (CAT) and of superoxide dismutase (SOD). (NapSe)2 compensated the deficits in the antioxidant defense mechanisms (CAT, SOD, NPSH, and ascorbic acid), and suppressed lipid peroxidation in rat brain resulting from Etoh administration. It was concluded that ethanol exposure causes alterations in the antioxidant defense system and induces oxidative stress in rat brain. (NaPSe)2 at 5 mg/kg restored the antioxidant defenses in rat brain and mitigated the toxic effects of alcohol, suggesting that could be used as a potential therapeutic agent for alcohol-induced oxidative damage in rat brain. 相似文献
95.
蛋白质核心设计的序列组合文库筛选方法 总被引:1,自引:1,他引:1
本文提出一种新的蛋白质序列组合文库筛选方法,异型自系统最优法,用于从头设计蛋白质核心。经λ-阻遏蛋白、噬菌体434CRO蛋白、白介素-4、硫氧还蛋白、泛肽等的检验,表明此方法用于从头设计蛋白质的核心是可行的。 相似文献
96.
长白山白眉蝮蛇蛇毒磷脂酶A2的分离和初步表征 总被引:10,自引:0,他引:10
东北长白山白眉蝮蛇(AgkistrodonblomhoffiUsurensis)蛇毒经DEAESephadexA50离子交换层析柱,连续3步SephadexG75凝胶过滤柱得到了磷脂酶A2(PLA2)的纯品。SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDSPAGE)以及基质辅助激光解析电离飞行时质谱(MALDI/TOF/MS)表征为单一蛋白,其准确分子量为(14.008±0.007)kD。最适pH范围8.0~9.0,最适的反应温度为45℃。在溶液中有多聚体的存在。 相似文献
97.
应用凝胶过滤高效液相色谱,测定了两个两亲性多肽Amp1和Amp2进入磷脂酰甘油/磷脂酰胆碱脂双层的表观分配常数,并利用三硝基苯磺酸分析研究了与脂质体结合的多肽的氨基暴露状况。由结果推测,处于膜结合状态的多肽的氨基端是暴露于水相的;Amp1与脂双层相互作用强于Amp2,一方面表现为Amp1比Amp2埋膜较深,另一方面表现为Amp1与脂双层的结合能力比Amp2强,而主要表现在于后者。此外也发现两个多肽在缓冲液中处于几乎不存在暴露的氨基的聚合状态。 相似文献
98.
Tao Ke Filipe Marques Gonçalves Cinara Ludvig Gonçalves Alessandra Antunes dos Santos João B.T. Rocha Marcelo Farina Anatoly Skalny Aristidis Tsatsakis Aaron B. Bowman Michael Aschner 《生物化学与生物物理学报:疾病的分子基础》2019,1865(8):2068-2081
Mercury (Hg) exposure remains a major public health concern due to its widespread distribution in the environment. Organic mercurials, such as MeHg, have been extensively investigated especially because of their congenital effects. In this context, studies on the molecular mechanism of MeHg-induced neurotoxicity are pivotal to the understanding of its toxic effects and the development of preventive measures. Post-translational modifications (PTMs) of proteins, such as phosphorylation, ubiquitination, and acetylation are essential for the proper function of proteins and play important roles in the regulation of cellular homeostasis. The rapid and transient nature of many PTMs allows efficient signal transduction in response to stress. This review summarizes the current knowledge of PTMs in MeHg-induced neurotoxicity, including the most commonly PTMs, as well as PTMs induced by oxidative stress and PTMs of antioxidant proteins. Though PTMs represent an important molecular mechanism for maintaining cellular homeostasis and are involved in the neurotoxic effects of MeHg, we are far from understanding the complete picture on their role, and further research is warranted to increase our knowledge of PTMs in MeHg-induced neurotoxicity. 相似文献
99.
Paulo Roberto Melo-Sampaio Paulo Passos Antoine Fouquet Ana Lucia Da Costa Prudente Omar Torres-Carvajal 《分类学与生物多样性》2019,17(3):207-229
The Guiana Shield harbours one of the best preserved and largest extents of tropical forest on Earth and an immense biodiversity. The herpetofauna of this region remains poorly known. The species-rich snake genus Atractus contains ~140 species, many with complicated taxonomic histories, including A. schach. Examination of specimens in museums and newly collected material from French Guiana has allowed the illustration of hemipenial morphology for the first time and an expanded diagnosis. Concatenated molecular phylogenetic (mitochondrial and nuclear genes) and phenotypic (morphometrics, external and hemipenial morphology) analyses confirm non-monophyly of the A. flammigerus group and indicate that A. schach is a species complex with three new species described here. The geographic distribution of A. schach sensu stricto is restricted to Guiana, Surinam, and French Guiana north of Tumucumaque massif. Populations tentatively assigned to A. schach from the east from French Guiana in the Roura lowlands to Almeirim, and from central Amazonia between the Negro and Trombetas rivers in Brazil are also recognized as new species. Our results suggest that populations from south of the Amazon River are not conspecific with those from the Guiana Shield.
http://www.zoobank.org/urn:lsid:zoobank.org:pub:A7AE40BC-4716-4302-B3BE-1F43600B0A72 相似文献
100.
人胰岛素原C肽的合成及专一性抗体制备 总被引:4,自引:1,他引:4
利用固相多肽合成中的Boc途径合成了人胰岛素原C肽 ,经TSK柱层析一步纯化 ,产物达HPLC及毛细管电泳均一 ,蛋白质序列分析和质谱分析符合理论值 ,总回收率高达 41 %。为了提高寡肽抗体的专一性 ,我们将丙烯酰化的C肽经催化聚合形成了以聚丙酰为骨架 ,C肽为侧链的聚合体 ,分子量约为 2 5kD。免疫新西兰大白兔 1月 ,获得专一性抗体。用酶联免疫吸附法测得抗血清滴度达 2 .5× 1 0 4 ,与BSA无交叉反应。聚丙酰C肽抗原是制备C肽抗体的一种新的尝试 ,而且也可能成为新的多肽工程疫苗之一 ,为其他传染性疾病多肽疫苗的研究提供新的途径 相似文献