全文获取类型
收费全文 | 2536篇 |
免费 | 391篇 |
国内免费 | 1693篇 |
出版年
2024年 | 41篇 |
2023年 | 87篇 |
2022年 | 157篇 |
2021年 | 165篇 |
2020年 | 169篇 |
2019年 | 209篇 |
2018年 | 122篇 |
2017年 | 134篇 |
2016年 | 129篇 |
2015年 | 180篇 |
2014年 | 210篇 |
2013年 | 194篇 |
2012年 | 259篇 |
2011年 | 315篇 |
2010年 | 213篇 |
2009年 | 257篇 |
2008年 | 278篇 |
2007年 | 267篇 |
2006年 | 209篇 |
2005年 | 173篇 |
2004年 | 117篇 |
2003年 | 120篇 |
2002年 | 102篇 |
2001年 | 112篇 |
2000年 | 87篇 |
1999年 | 62篇 |
1998年 | 30篇 |
1997年 | 25篇 |
1996年 | 16篇 |
1995年 | 19篇 |
1994年 | 13篇 |
1993年 | 12篇 |
1992年 | 10篇 |
1991年 | 4篇 |
1989年 | 4篇 |
1988年 | 5篇 |
1987年 | 4篇 |
1985年 | 6篇 |
1983年 | 5篇 |
1982年 | 6篇 |
1958年 | 8篇 |
1957年 | 6篇 |
1956年 | 5篇 |
1955年 | 8篇 |
1954年 | 5篇 |
1953年 | 12篇 |
1952年 | 5篇 |
1950年 | 5篇 |
1949年 | 6篇 |
1948年 | 9篇 |
排序方式: 共有4620条查询结果,搜索用时 18 毫秒
191.
192.
目的:比较通过慢病毒方法获得的人诱导多能性干细胞(iPSCs)与人胚胎干细胞(hESCs)分化过程中全能性基因Oct4、Nanog的表达变化。方法:收集分化不同时间点的拟胚体(EBs),检测三胚层分化基因以及全能性基因Oct4/Nanog的表达,并通过畸胎瘤组织切片的荧光染色分析Oct4的表达。结果:iPSCs获得的EB中内外三胚层分化基因表达的出现明显晚于hESCs来源的EB。不同于hESCs,iPSCs悬浮培养获得的EBs在体外培养18天未见内源性Oct4、Nanog基因表达的下调。未分化的iPSCs注射严重联合免疫缺陷(SCID)小鼠培养10周后获得的畸胎瘤中仍存在Oct4阳性的细胞,但iPS-#2中明显少于iPS-#5。结论:通过慢病毒方法获得的iPSCs虽然具有向三胚层分化的能力,但在分化过程中仍维持较高水平的全能性基因Oct4、Nanog的表达。 相似文献
193.
王伟杜美陈欢陆婕 《现代生物医学进展》2011,11(5):830-833
目的:构建人胱硫醚β合成酶(human cystathionineβ-synthase,hCBS)基因原核表达载体,在E.coli BL21(DE3)中表达,并进行纯化和酶活性检测。方法:以胰腺细胞cDNA文库为模板,采用聚合酶链式反应(PCR)扩增hCBS基因蛋白编码区的全序列,克隆入原核表达载体pET32a(+),构建重组质粒pET32a(+)-hCBS。经限制性内切酶双酶切及DNA序列分析鉴定目的基因后与人CBS基因(基因bank号:BT007154.1)完全一致,转入E.coli BL21(DE3)中,由IPTG诱导表达融合蛋白。结果:经SDS-PAGE、Western blot分析,证明诱导表达的蛋白为重组人CBS(rhCBS)。再由Ni-NTA树脂亲和层析,并脱盐冷冻干燥后获得重组rhCBS(约19 mg/L培养物),并测得其比活力约为57 kU/g。结论:成功地表达纯化出具有功能活性的重组蛋白rhCBS,为进一步研究该酶的相互作用蛋白以及其在生物学和临床科学的作用奠定了基础。 相似文献
194.
DNA疫苗作为疫苗研制工业中的新成果已经得到了越来越多得关注。为了提高其免疫原性,发挥它最大的保护作用,人们进行了各种尝试。近几年来的研究表明,通过密码子优化的方式可以提高DNA疫苗的免疫原性,增强其免疫保护作用。本文即针对该问题做了一些总结。 相似文献
195.
196.
197.
采用多次顶空固相微萃取分析拟南芥绿叶挥发性物质 总被引:6,自引:0,他引:6
顶空固相微萃取作为一种新的挥发性和半挥发性物质分析技术,被广泛应用于植物样品的定性分析。由于进行顶空分析时,挥发性组分间的基质效应以及较为复杂的扩散和吸附过程,定量分析一直是SPME分析应用的难题。目标分析物的量看作是达到吸附平衡后单一萃取的物质量的总和,则无需考虑分析样品在顶空、萃取涂层间的分配,同时可以消除基质效应。在利用标准物质进行校正后只需要一次顶空萃取,即可求出分析物质的总量。首先利用DVB/CAR/PDMS定性得到拟南芥挥发性物质的组成,然后采用CAR/PDMS涂层定量,分析了拟南芥的3种绿叶挥发性物质,优化后萃取条件为40℃萃取20min,相对标准偏差小于12%,在3株植物样品中这些挥发性物质的量为78.6~158.4ng.g-1。 相似文献
198.
BIRNBAUM SM DU RUISSEAU JP GREENSTEIN JP WINITZ M 《Archives of biochemistry and biophysics》1956,64(2):355-367
199.
200.