棉花胚珠和叶片激素含量与纤维性状的相关分析

对具有同一遗传背景的 35份变异材料 ,在特定生育时期 ,进行了叶片和胚珠内源激素含量与其纤维性状的典型相关和主成分分析 .结果表明 ,棉花激素与纤维性状间存在一定的相关关系 ,胚珠和叶片激素含量与纤维性状的相关关系存在较大差异 .在胚珠中 ,IAA、ABA、GAs、ZRs 4种激素与纤维性状的相关关系中 ,ABA与衣分的显著正相关最重要 ,而在叶片中 ,GAs与纤维麦克隆值的极显著正相关则起着决定性的作用 .激素和纤维性状的主成分分析结果表明 ,第一主成分与激素有关 ,胚珠中的主要因子是 IAA和 ABA,叶片中则是 ABA、ZRs、GAs,第二主成分中最重要的因子为纤维强度和长度     

The Relationship between Aleuritopteris humatifolia and A-chrysophylla Based on Three Chloroplast DNA Sequences Analyses

Total DNA from 27 species including Aleuritopteris humatifolia and Achrysophylla and related taxa was extracted in this research, and the rbcL, trnL F and matK sequences were amplified and sequenced. The sequences were aligned by ClustalX. The phylogenetic trees were constructed by Maximum parsimony methods and the intraspecific and interspecific genetic distance were computed in MEGA 60. The results showed as follows: no significant difference among rbcL, trnL F and matK sequences of one sample of Ahumatifolia and two samples of Achrysophy lla, and the maximum genetic distance between Ahumatifolia and Achrysophylla were less than the minimum genetic distance between Ahumatifolia and other closely related species. Therefore, our study support the taxonomic treatment of reducing Ahumatifolia to synonym of Achrysophylla based on our phylogenetic analysis combining the evidences from their morphological characters of blades, spores, indusia, and rhizome scales.     

Ca~(2+)参与水霉菌丝细胞壁修饰的证据

以细胞壁崩溃酶－Driselase短时间处理水霉（Saprolegniaferax）菌丝,pH5．0时可使原生质从菌丝亚顶端喷出,pH6．0～8．0时则不导致该现象发生;适当浓度EGTA的存在,可提高pH5．0时酶解引起的原生质喷出频率、使pH6．0～8．0时生长菌丝的顶端原生质也喷出、并且喷出多发生在菌丝最顶端。外加CaCl2不抑制菌丝顶端原生质的喷出,排除了Ca2+抑制酶活性的可能。随后的跟踪观察显示,长时间以缺Ca2+培养介质培养菌丝,同样能够导致菌丝顶端原生质喷出。上述研究结果表明,培养介质中Ca2+和H+对菌丝完整性的维持起调节作用,细胞壁上的Ca2+可能参与了水霉菌丝细胞壁物理特性的修饰。     

黄芪甲苷对血管紧张素Ⅱ诱导肾小球系膜细胞增殖及炎症因子表达的影响

目的：研究黄芪甲苷（As-IV）对血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）诱导大鼠肾小球系膜细胞（GMCs）增殖及炎症因子表达的影响。方法：采用10^-6mol/L的AngⅡ刺激GMCs增殖,同时分别加入25,50,100 μmol/L的As-IV对GMCs作用48 h,运用MTT法检测各组细胞增殖状况;流式细胞术观察GMCs中细胞内活性氧（ROS）水平变化;ELISA法检测细胞上清液中单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）的含量;Western blot法检测细胞中转化生长因子β1（TGF-β1）蛋白的表达。结果：与AngⅡ刺激组相比,As-IV干预显著抑制GMCs细胞增殖,减少细胞内ROS水平,抑制MCP-1及TGF-β1的表达。结论：As-IV对于AngⅡ诱导GMCs的增殖具有抑制作用,且能降低相关炎症因子的表达。     

海洋产黑色素假交替单胞菌XH2的筛选及培养条件优化

利用微生物所产天然黑色素可以在食品、日用品和医疗制药等行业替代传统化学合成的黑色素。从大连星海湾海域筛选出1株产黑色素性状优良的菌株XH2,生理生化鉴定及16S r DNA鉴定XH2为假交替单胞菌(Pseudoalteromonas),并对XH2产黑色素及菌株生长的温度、pH值、盐度、L-Tyr含量、Ca Cl2含量等条件进行了优化。结果表明,XH2在20℃,pH值为7,Na Cl含量为1%(质量分数),L-Tyr含量0. 5 g/L,Ca Cl2含量0. 1 g/L时,产黑色素情况最好,连续培养72 h,产黑色素量为1. 164 g/L,相较于优化前产量提高了2. 6倍,测定了发酵液中酪氨酸酶活性,验证了酪氨酸酶的存在,为微生物产黑色素及微生物基因研究提供了新的研究对象及参考。     

p LA-PEDV-S1质粒拷贝数与发酵重组乳酸菌S1表达量之间的相关性研究

探究质粒拷贝数以及目标蛋白S1表达量与发酵时间的关系,从而确定放大生产p LA-PEDV-S1/Lactobacillus casei的最佳发酵时间。通过发酵重组干酪乳杆菌,绘制重组干酪乳杆菌的生长曲线,确定其生长的最佳时期。将p LA-PEDV-S1/L. casei分别接种至添加抗生素和不添加抗生素的MRS培养基中传代培养,进行稳定性实验。使用荧光定量PCR方法检测重组干酪乳杆菌中质粒的拷贝数,使用流式细胞术检测乳酸菌表达的目标蛋白。重组菌在7 h达到生长顶点,传至120代时外源质粒并无丢失情况出现。质粒拷贝数在9 h达到峰值29. 34,表达目标蛋白的重组菌在7 h达到峰值97. 98%。结果显示在细菌生长的对数生长期末期,质粒拷贝数最高且S1表达量最多;在平台期随着发酵时间的增加,质粒拷贝数逐渐降低,S1表达量也相应减少。发酵的最佳时间为7～10 h,质粒拷贝数与S1表达量之间存在着正相关性。     

ELP_(30)-tag蛋白纯化能力的原核表达研究

目的:探究一种小分子量类弹性蛋白标签(elastin-like protein tag,ELP tag)——ELP_(30)-tag在原核表达系统中的蛋白纯化能力。方法:人工合成ELP_(30)-tag基因并将其构建于pET-28a(+)载体,结合2种内含肽(intein1和intein2)基因和增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,eGFP)基因,构建4个含有不同元件序列的原核表达载体:pET-ELP_(30)、pET-ELP_(30)-eGFP、pET-ELP_(30)-intein1-eGFP和pET-eGFP-intein2-ELP_(30);将表达载体转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导重组蛋白表达,并通过可逆相变循环(inverse transition cycling,ITC)纯化重组蛋白ELP_(30)、ELP_(30)-eGFP、ELP_(30)-intein1-eGFP和eGFP-intein2-ELP_(30),随后通过调节溶液pH值或添加二硫苏糖醇(DL-Dithiothreitol,DTT)分别诱导intein1和intein2断裂,最后再经ITC分离获得纯eGFP。结果:利用设计的ELP_(30)-tag成功纯化获得了重组蛋白ELP_(30)、ELP_(30)-eGFP和eGFP-intein2-ELP_(30);重组蛋白ELP_(30)-intein1-eGFP和eGFP-intein2-ELP_(30)中的内含肽可经诱导发生断裂而释放eGFP,但未能分离获得纯eGFP。由此为小分子量ELP-tag的运用和优化设计奠定了一定基础。     

缺氮介导的莱茵衣藻油脂合成过程的内参及标志物蛋白质的筛选鉴定

微藻被认为是最有潜力的生物能源原料之一,了解油脂合成机理、提升油脂合成的效率是重要的生物学问题.莱茵衣藻缺氮胁迫是油脂合成机理研究的模式系统,组学研究已经积累了大量的数据,但针对莱茵衣藻缺氮介导的油脂合成过程的内参及标志物蛋白质还鲜有报道.本研究对莱茵衣藻进行了对照和缺氮胁迫培养,比较了多个时间点(0、1、2、4和6d)在2种处理条件下的培养物表型、细胞密度、油脂含量以及总蛋白质含量的变化等特征.结果显示:莱茵衣藻细胞在受到缺氮胁迫后表现为培养物颜色由绿变黄;A750和细胞计数结果显示细胞生长趋于停滞;尼罗红染色定量实验鉴定到油脂含量的显著升高;考马斯亮蓝染色实验检测到总蛋白质含量降低.以20个莱茵衣藻蛋白质为候选,利用蛋白质印迹技术(Western blot,WB)检测了其在不同处理和不同时间点的表达特征变化,通过计算总蛋白质和候选蛋白质含量的皮尔森相关系数(Pearson’s correlation coefficient, PCC)筛选了莱茵衣藻缺氮胁迫的内参蛋白质,发现Histone H3、 RBCL(ribulose-1, 5-bisphosphate carboxylase/oxygenase large subunit)和BCR1(biotin carboxylase,ACCase complex 1)在对照和缺氮胁迫条件下均与总蛋白质含量变化呈现极显著或显著正相关,所以被选作内参蛋白质.进而通过比较候选蛋白质的平均相对倍率变化(average relative fold change, ARF),鉴定了莱茵衣藻缺氮胁迫的标志物蛋白质,发现ATPs-β(ATP synthase CF1beta subunit)、 GAP2(glyceraldehyde 3-phosphate dehydratase 2)和RMT1(rubisco large subunit N-methyltransferase 1)蛋白质的ARF值分别为180.59、52.90和12.48,明显高出其他蛋白质,由此把它们选做缺氮胁迫的标志物蛋白质.接下来,对缺氮胁迫早期(0、2、4、8、12、18、24和48 h)的样品进行蛋白质印迹法分析,发现可检测的ATPs-β、GAP2和RMT1的缺氮诱导条带出现的时间分别是8、18和12 h.综上可以认为,在所有候选蛋白质中,ATPs-β是出现最早且变化幅度最大的缺氮处理标志物蛋白质.本研究鉴定的内参和标志物蛋白质对了解缺氮应答及油脂合成机理会有所帮助,所积累的蛋白质表达信息可供研究同行参考.     

雌激素水平与围绝经期妇女心血管疾病相关性研究

目的：研究雌激素水平与围绝经期妇女心血管疾病的相关性。方法：回顾分析258例围绝经期患者的临床资料,研究心血管疾病发生情况。选取以合并心血管疾病患者为观察组,另选择无心血管疾病的患者为对照组,测定并比较两组患者的血清雌二醇（E2）水平。结果：258例患者中患有心血管疾病患者共50例（19.38％）,观察组和对照组患者年龄差异无统计学意义（P〉0．05）,血清E2含量分别为12．35±2．56pmol／L和46．84±3．85μmol／L,观察组显著低于对照纽（P〈0．05）。结论：心血管疾病的发生与雌激素水平下降直接相关。     

竹节参总皂苷抑制急性低压缺氧大鼠脑和心肌损伤的形态学观察

在模拟海拔8000米高空的急性低压缺氧条件下,研究了竹节参总皂苷对Wistar大鼠的脑、心肌组织和细胞损伤的预防效果.实验结果表明未给药的阴性对照组Wistar大鼠的脑和心肌组织以及细胞均遭到了严重损伤.而竹节参总皂苷和红景天提取物给药组的Wistar大鼠,其脑和心肌组织以及细胞的损伤程度明显减轻.其中竹节参总皂苷给药组的效果最明显.