微生物学课程绪论课教学的探索与实践

绪论课教学在整个微生物课程教学中起着至关重要的作用。本文结合大连大学的教学目标从教学定位、教学实施2个方面对绪论课教学进行了探索,经过一定时间的实践,取得了较好的教学效果。     

不同剂量甲泼尼龙对急性百草枯中毒大鼠早期肺损伤干预研究

目的：探讨不同剂量的甲泼尼龙（Methylprednisolone,MPS）对急性百草枯（paraquat,PQ）中毒大鼠早期肺损伤的疗效。方法：采用腹腔注射20％的PQ溶液制作大鼠急性PQ中毒的模型,随机均分为五组,正常对照组（A组）、染毒组（B组）、5mg／kg甲泼尼龙干预组（C组）、15mg／kg甲泼尼龙干预组（D组）、30mg／kg甲泼尼龙干预组（E组）。分三个不同时间点（24、72、168h）处死大鼠（每组每时间点6只）。观察各时间点大体标本,组织病理、肺系数和氧合指数。结果：光镜下肺组织病理学观察,与B组比较C、D、E组大鼠肺的病理学改变,肺泡腔内出血、渗出,炎性细胞浸润、肺泡隔炎性细胞浸润相对较轻,其中以C、E组减轻最为明显。在各组相同时间点肺系数：在三个时间点的值均比B组低（P〈0．05）,其中E组在24h、72h时间点上与C、D组有显著差异（P〈0．05）。C、D、E组与B组的氧合指数的比较各个时间点上均与B组有差异（P〈0．05）,三组之间相互无明显差异。结论：本实验结果显示甲泼尼龙对急性百草枯中毒大鼠的肺损伤具有保护作用,且30mg／kg甲泼尼龙组要优于5mg／kg、15mg／kg甲泼尼龙组。     

6-OHDA 帕金森病大鼠快动眼睡眠状态下 皮层脑电及基底节场电位的异常变化

目的:了解帕金森病(PD)模型大鼠在快动眼睡眠状态下皮层脑电和基底节场电位的异常变化。方法:用6-羟基多巴胺(6-OHDA)脑内两点注射法建立PD大鼠模型,并经阿扑吗啡注射诱发旋转对模型进行评价。通过多导宏电极在体电生理记录技术结合视频录像,对正常大鼠和6-OHDA大鼠PD模型进行苍白球场电位和皮层M1、M2区脑电的多部位24小时同时记录。功率谱分析和相干分析用于揭示快动眼睡眠状态下各记录位点信号的频率成分以及不同记录位点神经元集群之间的变化。结果:与正常大鼠相比,6-OHDA帕金森病模型大鼠在REM期间的皮层脑电在θ和γ频段上都有变化:初级运动皮质M1区的θ频段成分消失,辅助运动区M2的θ频段成分略有增加,患侧苍白球的θ频段成分增大显著;M1区的γ频段成分增大,而γ频段成分在苍白球基本没有变化。结论:6-OHDA对中脑多巴胺能神经元的损害可造成大鼠双侧皮层M1区θ节律的消失和γ节律的增强,以及对侧M1-M2区之间在γ节律上的同步被显著增强,而γ节律在苍白球没有变化。这些异常电活动可能是由于VTA受损引起从而与帕金森病的快动眼睡眠行为障碍有关。     

Bmi1在肝癌组织中的表达及其与细胞增殖和凋亡的关系

目的：探讨Bmi1在肝细胞肝癌（HCC）中的表达及与增殖和凋亡的关系。方法：收集HCC标本54例及相应的癌旁组织,10例正常肝组织标本,采用免疫组织化学EnVision二步法显示Bmi1的表达并结合增殖与凋亡特征进行分析。结果：在肝癌组织、癌旁组织细胞中Bmi1表达定位于胞核中,阳性表达率分别为79.6%（43/54）,31.2%（17/54）,10例正常肝组织未见表达,3组差异有统计学意义（P〈0.005）。HCC中Bmi1的高表达与年龄、性别、肿瘤大小、肿瘤数目、临床TNM分期、是否有肝硬化及是否有HBsAg感染无显著相关（P〉0.05）,但与组织学分级有关,高、中分化组Bmi1表达率显著高于低分化组（P〈0.05）。肝癌Bmi1阳性组增殖指数（PI）（50.3±21.4）%显著高于阴性表达组（17.3±7.1）%（P〈0.05）,凋亡指数（AI）无明显差异（P〉0.05）。结论：Bmi1在HCC中高表达,其表达增高可能与HCC的进展相关。     

云南汉族酒精依赖综合征与COMT遗传多态性的关联研究

目的:研究儿茶酚胺氧位甲基转移酶(COMT)的不同基因型及等位基因频率在云南汉族酒精依赖综合征患者组和健康对照组的分布差异。方法:应用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性分析法,对COMT基因的rs2075507、rs737865、rs4680、rs165599四个基因位点进行特异性扩增,限制性内切酶酶切分型。结果:上述4个候选基因中,COMT基因rs737865位点C/C基因型频率在健康对照组较酒依赖组高,其基因型分布在两组中有差异,且具有统计学意义(P<0.05)其余3个位点统计学分析均无显著性差异(P>0.05)。单倍型分析:上述四个候选基因构建出12种主要单倍型(每种单倍型在对照组和酒依赖组中的频率至少有一个大于1%),单倍型A-C-A-A有可能是云南汉族酒精依赖发生的一种危险因子(OR:2.865,P=0.003347)连锁不平衡分析显示:云南汉族人群中,COMT基因的rs2075507和rs737865之间存在着强连锁(D>0.8)结论:在云南汉族人群中,COMT基因rs2075507、rs4680和rs165599位点与酒依赖无关联性,rs737865C/C基因型可能是酒精依赖的保护因子,可能降低嗜酒的发生率。单倍型A-C-A-A有可能是云南汉族酒精依赖发生的一种危险因子云南汉族人群中,COMT基因的rs2075507和rs737865之间存在着强连锁。     

柑橘全爪螨田间种群敏感性测定及三种主要解毒酶活性比较

为明确重庆地区柑橘全爪螨Panonychus citri(McGregor)对常用杀螨剂的抗性水平,本研究采用阿维菌素、哒螨灵、三唑锡、螺螨酯4种不同类型杀螨剂对柑橘全爪螨重庆北碚种群、璧山种群、武隆种群和忠县种群进行了田间敏感性测定。结果表明,柑橘全爪螨4个种群对三唑锡表现最不敏感,致死中浓度LC50在209.9～370.9mg/L之间。璧山种群对阿维菌素敏感性最高,武隆种群和忠县种群对阿维菌素的相对抗性分别达12倍和11倍。哒螨灵监测结果表明,北碚种群的抗性水平显著高于其他3个种群。而北碚种群对螺螨酯的LC50仅为1.2mg/L,显著低于其他种群。柑橘全爪螨4个种群解毒酶活性研究发现,解毒酶活性的高低与不同种群抗性水平之间并没有明显相关性,这可能同各地区施药背景不同、综合防治措施不同、各杀螨剂作用机理不同、不同种群体内代谢抗性及靶标抗性水平差异有关。     

磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶基因的敲除对于谷氨酸棒杆菌V1生理代谢的影响

【目的】L-缬氨酸生物合成的前体物质是丙酮酸。为了增加磷酸烯醇式丙酮酸向丙酮酸的代谢流向,优化L-缬氨酸前体物质的供应,以一株积累L-缬氨酸的谷氨酸棒杆菌V1(Corynebacterium glutamicum V1)为对象,构建磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(PEPC)基因敲除的重组菌株C.glutamicum V1-Δpepc,并研究pepc敲除后菌株生理特性的改变。【方法】运用交叉PCR方法得到pepc基因内部缺失的同源片段Δpepc,并构建敲除质粒pK18mobsacB-Δpepc。利用同源重组技术获得pepc基因缺陷突变株C.glutamicum V1-Δpepc。采用摇瓶发酵对C.glutamicum V1-Δpepc进行发酵特性的研究。对谷氨酸棒杆菌模式菌株C.glutamicum ATCC 13032、出发菌株C.glutamicum V1和敲除菌株C.glu-tamicum V1-Δpepc的丙酮酸激酶(Pyruvate kinase,PK)、丙酮酸脱氢酶(Pyruvate dehydro-genase,PDH)、丙酮酸羧化酶(Pyruvate carboxylase,PC)分别进行测定和分析。【结果】PCR验证以及PEPC酶活测定都表明筛选到pepc缺陷的突变菌株C.glutamicum V1-Δpepc,摇瓶发酵结果表明,突变菌株C.glutamicum V1-Δpepc不再积累L-缬氨酸而是积累L-精氨酸达到7.48 g/L。酶活测定结果表明出发菌株的PDH和PC酶活均低于模式菌株C.glu-tamicum ATCC13032和重组菌株C.glutamicum V1-Δpepc,出发菌株的PK与PEPC酶活与模式菌株没有较大的差异。【结论】研究表明,通过切断PEPC参与的三羧酸循环的回补途径,增加磷酸烯醇式丙酮酸向丙酮酸的流向使丙酮酸向TCA循环的流量增加,精氨酸的累积量提高。同时,以丙酮酸为前体的L-缬氨酸和丙氨酸的积累量降低。     

F型肉毒梭菌培养液可滤性实验的初步研究

目的通过探索F型肉毒梭菌培养液可滤性实验,为现有生产工艺提供科学的优化方案。方法分别采用不同型号的过滤器,通过不同的过滤组合对F型肉毒梭菌培养液进行澄清过滤。结果采用K700P过滤器(过滤精度6.0～15.0μm)对F型肉毒梭菌培养液进行一级澄清过滤,采用50P过滤器(过滤精度0.5～0.85μm)对料液进行二级澄清过滤,对F型肉毒梭菌培养液具有良好的澄清效果。结论可滤性实验的探索对于F型肉毒梭菌培养液批生产量的扩大具有切实可行的指导意义。     

心理护理对腹腔镜胆囊切除术患者焦虑心理的影响

目的:探讨心理护理对腹腔镜胆囊切除术患者焦虑心理的影响。方法:将84例腹腔镜手术患者随机分为2组:对照组23例,给予常规护理;心理护理组61例,给予常规护理+心理护理,其中文化程度<高中的患者34例,文化程度≥高中的患者27例。采用焦虑自评量表(SAS)评价焦虑状态,采用疼痛视觉模拟标尺评估患者疼痛情况,以及评估患者情绪情感、恐惧程度及对治疗满意度。结果:与对照组比较,心理护理组患者焦虑程度、恐惧程度、疼痛评分、显著下降(P<0.05);与文化程度<高中比较,文化程度≥高中的患者焦虑评分显著降低(P<0.05),情绪情感的评分显著增加(P<0.05);术后第1-2天疼痛评分无显著差异(P>0.05),术后第3天疼痛评分有显著差异(P<0.05);心理护理组的满意度明显升高(P<0.05)。结论:腹腔镜手术患者存在明显的焦虑、恐惧症状,心理护理干预能有效缓解患者焦虑心理,减轻疼痛程度,减少疼痛时间,提高患者对医疗服务满意度,可有效提高临床护理质量与效率。     

胃转流术治疗非肥胖T2DM 术后1 年血糖代谢变化的研究

目的:评价胃转流术(RYGP)治疗非肥胖2型糖尿病(T2DM)的1年血糖代谢变化,并探讨术前T2DM病史对术后1年效果的影响。方法:收集我科2009年6月～2010年4月期间60例行RYGP的非肥胖T2DM患者术前及术后1年内的一般资料,临床及实验室检查数据等。根据T2DM病史分为两组:Ⅰ组:≤5年;Ⅱ组:5-10年,两组体质指数(BMI)均<30 kg/m2。术后6M、12M主要随访:空腹血糖(FPG)、餐后2h血糖(2hPG)、体重、BMI、糖化血红蛋白(HbA1c)、空腹血清胰岛素(Fins)、空腹C肽(C-P)、胰岛素抵抗指数和用药情况,采用SPSS17.0软件进行手术前后对照与组间对照分析。结果:与术前相比,Ⅰ组术后6M、12M时FPG,2hPG,体重,BMI,C-P,HbA1c,Fins均明显改善(P<0.05),HOMA-IR在术后6M无显著差异(P>0.05),术后12M有显著差异(P<0.05);Ⅱ组术后6M、12M时与术前相比,FPG,2hPG,体重,BMI,C-P,HbA1c,HOMA-IR均明显改善(P<0.05),Fins在术后6M、12M与术前相比无显著差异(P>0.05)。Ⅰ组和Ⅱ组于术后6M、12M在FPG、2hPG、体重、BMI、C肽、Fins、HbA1c、HOMA-IR、用药以及手术缓解率方面均无显著差异(P>0.05)。结论:非肥胖T2DM患者胃转流术后1年血糖代谢明显改善,术后完全缓解率逐步增高,术前T2DM病史(≤5年与5-10年)对术后1年效果的影响无显著差异。