SSH 法结合定量 PCR 技术研究双肌臀猪 肌肉组织的差异表达基因

利用抑制性消减杂交技术 (suppression subtractive hybridization , SSH) 成功地构建了双肌臀与非双肌臀大白猪肌肉组织差异表达的消减 cDNA 文库,获得有效克隆 686 个. 对整个文库测序分析,共获得 587 条有效序列. 利用 BLAST 在线软件与 GenBank、 GenBank EST 和 Tigr Porcine EST 等数据库进行同源序列比较,发现其中有 11 个未知新序列,可能代表“双肌臀”大白猪肌肉组织特异表达的新基因. 对文库中所包含的兰尼啶受体基因 (RYR1)、钙依赖性蛋白激酶 基因 (CAMK2)、人类胰岛素生长因子结合蛋白 -7 基因 (IGFBP7),以及 695号、 882号和480号3个新基因进行了实时荧光定量 PCR 检测,结果显示： RYR1、 CAMK2 及 IGFBP7 基因在双肌臀猪肌肉组织 RNA 池中的表达量,分别为对照的非双肌臀猪肌肉组织 RNA 池中表达量的 1.87、 1.90 和 1.85 倍; 695 号、 882 号和 480 号 3 个新的 ESTs 在双肌臀猪肌肉组织 RNA 池中的表达量为非双肌臀猪肌肉组织 RNA 池中表达量的 1.48、 1.44 和 1.78 倍. 这提示我们,上述基因的上调表达很可能与猪双肌臀性状的发生有密切的关系,可以作为研究该性状的候选基因.     

植物中的一氧化氮信号分子

综述了NO分子在植物中的生物合成、主要生理功能以及在耐受生物胁迫和非生物胁迫响应中的作用,以及植物对NO信号转导过程中cGMP途径和其他途径的关系。     

中国人卵巢上皮性肿瘤nm23H1基因遗传不稳定性的研究

采用石蜡包埋组织抽提DNA,PCR-单链构象多态性(PCR-SSCP),常规银染、Envision免疫组织化学染色和Leica-Qwin计算机图像分析等方法,研究人类17号染色体D17S396位点微卫星不稳定(microsatellite instablility,MSI)和杂合性缺失(loss of heterozygosity,LOH),对卵巢上皮性肿瘤nm23H1蛋白表达的影响,阐明nm23H1基因遗传不稳定性与卵巢肿瘤进展的关系,为揭示nm23H1基因作用机制和肿瘤转移机制提供实验依据。本实验中,卵巢上皮性癌D17S396位点遗传不稳定发生率为40%,明显高于交界性肿瘤的9.52%,而在良性肿瘤和正常卵巢组织中,未见该位点遗传不稳定的发生。其中,LOH的发生率,随肿瘤恶性程度的增高而增加(P<0.05)。在卵巢上皮性癌中,淋巴转移组的LOH发生率高于无淋巴转移组(P<0.01)。FIGO Ⅲ Ⅳ期的LOH发生率高于Ⅰ Ⅱ期(P<0.05)。MSI发生率与卵巢上皮癌组织类型、分化程度、淋巴转移及FIGO分期均无关。nm23H1 蛋白阳性率在卵巢上皮性癌和交界性肿瘤组织中分别为56.00%和57.14%,高于良性肿瘤的13.64%和正常卵巢组织的8.33%(P<0.01)。卵巢上皮性癌中,淋巴转移组nm23H1蛋白阳性率低于无淋巴转移组;FIGO Ⅲ Ⅳ期nm23H1蛋白阳性率低于Ⅰ Ⅱ期(P<0.05)。此外,计算机图像定量分析显示,在各临床病理参数影响下,nm23H1蛋白的表达强度没有差异。在卵巢上皮性癌中,LOH阳性组中nm23H1蛋白阳性率为0.00%,显著低于LOH阴性组的73.68%(P<0.01)。实验结果提示, nm23H1基因的遗传不稳定性可能是卵巢上皮性癌发生、发展的一个重要机制。LOH的发生可作为卵巢组织恶变的判断指标。nm23H1基因的MSI和LOH,通过相互独立的途径调控卵巢上皮癌的发生和转移,后者可抑制卵巢上皮癌局部nm23H1蛋白的表达,并赋予卵巢上皮癌高淋巴结转移、低预后的特性。提高卵巢上皮癌局部nm23H1蛋白的表达,可减缓肿瘤的淋巴转移并提高预后率。     

薇苷菊乙醇提取物对桔全爪螨种群的控制作用

研究薇苷菊(Mikaniamicrantha)乙醇提取物对桔全爪螨(Panonychuscitri)种群的控制作用,并比较其与常用杀螨剂哒螨灵的效果.在实验室用0.1、0.2、0.4g·L^-13个浓度提取物分别喷布桔全爪螨卵、幼螨和若螨,除了01g·L^-1浓度处理对卵没有效果外,该处理幼螨、若螨存活率以及另2个浓度处理3个螨态的存活率都显著下降.在非选择性试验条件下,用这3个浓度的提取物处理叶片饲养的桔全爪螨雌螨繁殖量显著减少,寿命也显著缩短.在田间用这3个浓度的提取物在20d内连喷2次,桔全爪螨卵、幼螨和若螨的存活率都低于对照,干扰作用控制指数分别为0518、0.292、0.277,即对种群增长控制的效果分别为4.82%、70.8%、72.3%,比15%哒螨灵乳油2000倍处理更有效控制桔全爪螨的田间种群.田间试验结果还表明,提取物处理的叶片比对照和哒螨灵处理的浓绿,而且对桔全爪螨的天敌较安全     

液相芯片MASA技术用于儿童呼吸道感染病原学研究

利用多靶点液相芯片(Multi-Analyte Suspension Array,MASA)技术对引起儿童呼吸道感染(respiratorytract infections,RTI)的病原,包括人类呼吸道合胞病毒A型和B型(Human respiratory syncytial virus A and B,RSVA、RSVB)、严重急性呼吸综合征冠状病毒(Severe acute respiratory syndrome coronavirus,SARS-CoV)、流行性感冒病毒A型和B型(Influenza A virus and Influenza B virus,INFa,INFb)、副流感病毒1型和3型(Parainfluenza virus 1 and 3,PIV1,PIV3)、衣原体(C.pneumoniae,CPN)和支原体(M.pneumomae,MPN)进行了病原学研究.我们采集并分析了140例患典型呼吸道感染症状儿童的咽拭子,发现在这些标本中至少被前述的一种病原感染的标本有95例,阳性率为67.86%.结果显示这些标本中上述病原感染的情况分别为RSVB感染的患儿占35.71%、PIV3感染的占4.29%、INFa感染的占28.57%、INFb感染的占2.14%、MPN感染的占3.57%、CPN感染的占17.86%,被两种以上病原混合感染的患儿有17.14%.这些标本中都没有检测到RSVA、PIV1和SARS-CoV病原的感染.RSVB病原的感染率在3岁以下的患儿中明显高于3岁以上的患儿,而INFa的感染情况则相反;在上呼吸道感染患儿中检测到INFa病原感染的比例明显高于下呼吸道感染,而RSVB病原感染的情况相反.此外,我们发现在2005年3月-5月中造成武汉地区儿童呼吸道感染的主要病原是以RSVB、INFa、CPN为主,而RSVB感染则又是引起儿童下呼吸道感染和引起低龄儿童呼吸道感染的重要病原.     

山豆根化学成分研究

利用多种柱层析方法,从山豆根中分得5个化合物。经过理化及波谱分析,分别鉴定为L-广高丽槐素(1)、红车轴草苷(2)、槲皮素(3)、芦丁(4)和异鼠李素-3-芸香糖甙(5)。其中化合物3,5为首次从该植物中分离得到。关键词：山豆根;L-高丽槐素;红车轴草苷;槲皮素;芦丁;异鼠李素-3-芸香糖甙     

两种联合切口手术治疗眶-上颌-颧骨复合体骨折的对比研究

目的：对比研究冠状-睑下缘-口内联合切口手术与冠状切口联合口腔前庭沟切口手术治疗眶-上颌-颧骨复合体骨折的治疗效果。方法：选取2006年10月-2010年12月眶-上颌-颧骨复合体骨折患者136例,69例患者行冠状-睑下缘-口内联合切口手术,67例行冠状切口联合口腔前庭沟切口手术,分别命名为A组和B组,比较两组患者治疗效果,治疗效果用甲级、乙级和丙级表示。结果：A组治疗效果甲级、乙级、丙级分别为65．2％、30．4％、4．4％,B组治疗效果甲级、乙级、丙级分别为46．3％、29．8％、23．9％,A组治疗效果优于B组;A组术后并发症少于B组。结论：冠状-睑下缘-口内联合切口手术比冠状切口联合口腔前庭沟切口手术更好地治疗眶-上颌-颧骨复合体骨折,治疗效果好,并发症少,能更好地实现颧骨复位。     

围手术期综合护理对脊柱损伤并四肢骨折疗效的影响

目的：探讨固手术期系统综合护理对脊柱损伤并四肢骨折疗效的影响。方法：收集50例脊柱损伤并四肢骨折患者,按手术编号随机分为观察组和对照组,每组各25例,两组患者均采用内固定手术及常规治疗,但观察组围手术期配合综合系统护理,对照组不配合,连续观察至出院并随访6个月,比较护理对比两组患者临床疗效、并发症情况及疾病恢复时间的影响。结果：经治疗,两组患者均较前好转,且观察组临床有效率92％明显高于对照组84％（P〈0．05）;观察组并发症发生率28％明显低于对照组44％（P〈0．05）;术后疾病恢复时间观察组明显短于对照组（P〈0．05）。结论：围手术期综合系统护理有助于脊柱损伤并四肢骨折术后恢复,能显著提高疗效、减少并发症,缩短疾病恢复时间,临床值得应推广实施。     

Nitric oxide production is associated with response to brown planthopper infestation in rice

Nilaparvata lugens Stål, the brown planthopper (BPH), is one of the most destructive phloem-feeding insects of rice (Oryza sativa L.) throughout Asia. Here, we show that BPH feeding increases the level of endogenous nitric oxide (NO) in the leaf and sheath tissue of both resistant and susceptible rice cultivars. However, in the roots, the NO level increased in the resistant cultivar, but decreased in the susceptible one. A burst of NO production occurred in the sheath within 1 h of infestation with BPH. The production of NO in response to BPH feeding appears to be dependent primarily on the activity of nitric oxide synthase. The application of exogenous NO reduced plant water loss by its effect on both stomatal opening and root architecture. It also stimulated the expression of certain drought stress-related genes, reduced plant height and delayed leaf senescence. Over the short term, NO supplementation reduced the seedling mortality caused by BPH feeding. This suggests that NO signaling plays a role in the rice tolerance response to BPH feeding.     

Amide-linkage formed between ammonia plasma treated poly(D,L-lactide acid) scaffolds and bio-peptides: enhancement of cell adhesion and osteogenic differentiation in vitro

The surface characteristics of scaffolds for bone tissue engineering must support cell adhesion, migration, proliferation, and osteogenic differentiation. In the study, poly(D,L ‐lactide acid) (PDLLA) scaffolds were modified by combing ammonia (NH₃) plasma pretreatment with Gly‐Arg‐Gly‐Asp‐Ser (GRGDS)‐peptides coupling technologies. The x‐ray photoelectron spectroscopy (XPS) survey spectra showed the peak of N1s at the surface of NH₃ plasma pretreated PDLLA, which was further raised after GRGDS conjugation. Furthermore, N1s and C1s in the high‐resolution XPS spectra revealed the presence of ? C?N (imine), ? C? NH? (amine), and ? C?O? NH? (amide) groups. The GRGDS conjugation increased amide groups and decreased amine groups in the plasma‐treated PDLLA. Confocal microscope and high performance liquid chromatography verified the anchored peptides after the conjugation process. Bone marrow mesenchymal stem cells were co‐cultured with scaffolds. Fluorescent microscope and scanning electron microscope photographs revealed the best cell adhesion in NH₃ plasma pretreated and GRGDS conjugated scaffolds, and the least attachment in unmodified scaffolds. Real‐time PCR demonstrated that expression of osteogenesis‐related genes, such as osteocalcin, alkaline phosphatase, type I collagen, bone morphogenetic protein‐2 and osteopontin, was upregulated in the single NH₃ plasma treated and NH₃ plasma pretreated scaffolds following GRGDS conjugation. The results show that NH₃ plasma treatment promotes the conjugation of GRGDS peptides to the PDLLA scaffolds via the formation of amide linkage, and combination of NH₃ plasma treatment and peptides conjugation may enhance the cell adhesion and osteogenic differentiation in the PDLLA scaffolds. © 2011 Wiley Periodicals, Inc. Biopolymers 95: 682–694, 2011.