黑果枸杞花青素结构差异对其稳定性及细胞抗氧化活性的影响

本文研究了黑果枸杞花青素化合物结构对其稳定性和细胞抗氧化活性的影响。通过半制备型HPLC分离纯化得到了4种黑果枸杞花青素化合物并鉴定结构,利用比色法评价了化合物的稳定性、细胞毒实验以及H₂O₂诱导的SH-SY5Y细胞损伤模型评价了细胞抗氧化活性,并讨论了化学结构对其影响。结果表明反式结构比顺式结构在中性和弱碱性条件下有更好的稳定性,反式结构、糖基的增加以及母核B环上的甲氧基取代均可以通过缩短母核与糖链的分子距离从而提高稳定性,糖基的增加能显著地降低损伤细胞中的乳酸脱氢酶水平,且反式结构较顺式结构更有活性优势。综上所述,黑果枸杞花青素的结构影响稳定性和细胞抗氧化活性,但糖基的增加和酰基的反式异构对二者有更积极的意义。     

食品科学与工程专业生物化学教学体会——从应用型人才培养角度出发

生物化学是生命科学、食品科学、医学等多个领域相关专业的基础课。笔者从食品科学与工程专业应用型人才培养的角度出发,对人才培养目标、教学内容、教学方法与手段和教师的"爱与激情"等几个方面进行了探讨,以期更好地指导、促进生物化学的教学工作。     

家蚕线粒体ND2、COⅠ和若干tRNA基因的克隆及序列分析

克隆并测定了家蚕（Bombyx mori）线粒体基因组3468bp的EcoRⅠ和HindⅢ双酶一段序列,根据序列同源性比较,该DNA片段包括3个蛋白质编码基因：ND2基因、COⅠ基因和COⅡ基因5′端399bp的序列,以及6个tRNA基因和一个尚待确定的tRNA^Met基因。家蚕与果蝇的ND2基因序列同源性约69.7%,COⅠ基因的同源性约83.8%,COⅡ基因5′端的同源性约80％,这表明细胞色素氧化酶基因在物种间比烟酰胺腺漂呤二核苷酸脱氢酶基因保守,6个推定的tRNA基因序列与果蝇相应tRNA基因序列差异较大,另外,除tRNA^Chn基因的二级结构相似外,其它tRNA基因的二级结构与果蝇相应tRNA基因的二级结构也有较大差异。     

猪脂肪组织表达序列标签(ESTs)大规模测序及分析

利用大规模DNA序列测定的方法,对猪脂肪组织进行了表达序列标签(Expressed Sequence Tag,EST)序列测定,获得高质量EST共7790个,并对此进行了初步分析。使用STACK-PACK软件进行聚类分析,得到4354个基因聚类,包括3609个单拷贝基因和745个多拷贝基因;将候选基因序列用BlastN与nr库进行比较(e=1e-10),从4354个候选基因中得到2712个已知基因,其中单基因为1987个,多拷贝基因为725(3694克隆)个;未知功能基因和新EST有2109个克隆。根据BlastN结果,利用基因组文库添加序号(GenBank Accession No．)为索引,构建了猪脂肪组织已知功能基因表达谱。从基因表达谱可以看出,在猪脂肪组织中参与代谢的基因所占比例最高,在某些方面也显示了脂肪组织旺盛的代谢活性。同时发现在猪脂肪组织中主组织相容性抗原(Major Histocompatibility Complex,MHC)或与MHC相关的基因表达丰度很高。其中单拷贝基因181个,多拷贝基因44个,共计257个克隆,占细胞机体防御(cell and organism defense)总数的44．9％。占总已知基因数的5.4％。提取出全部与MHC相关的EST序列(257个克隆),发现所有EST的部分序列(长约200个碱基),几乎分布在每一个已知猪BAC的所有编码序列上。据此推测,构成MHC的这些EST序列中,有一段长约200个碱基(200bp)的碱基序列高度保守,MHC基因中每一段编码序列都包含有这一段序列。这些MHC序列虽然在不同的BAC上其蛋白的域不同,但均为高度保守区域,并且都与免疫功能密切相关。猪脂肪中如此大量表达的MHC部分保守序列,由于与免疫功能高度相关,在MHC基因的传递过程中,可以反复复制,并能够稳定遗传。     

Fluorescent labeling for clonal selection of Marc 145 cells secreting high levels of recombinant protein PBD-1

Despite the powerful impact gene expression markers like the green fluorescent protein (GFP) or enhanced GFP (EGFP) exert on linking the expression of recombinant protein for selection of high producers in recent years, there is still a strong incentive to develop more economical and efficient methods for isolating mammalian cell clones secreting high levels of recombinant proteins. Here we present a new method based on the co-expression of EGFP that allows clonal selection in standard 96-well cell culture plates. The genes encoding the EGFP protein and the related protein are linked by an internal ribosome entry site and thus are transcribed into the same mRNA in an independent translation process. Since both proteins arise from a common mRNA, the EGFP expression level correlates with the expression level of the therapeutic protein in each clone. By expressing recombinant porcine β-defensin 1 in Marc 145 cells, we demonstrate the robustness and performance of this technique. The method can be served as an alternative to identify high-producer clones with various cell sorting methods.     

石油焦基高比表面积活性炭对废水中CODCr的吸附能力

探讨了高比表面积活性炭(HSAAC)吸附水中COD_Cr时,活性炭用量、pH值和吸附时间等因素对COD_Cr吸附量和去除率的影响。实验结果表明,HSAAC用量越大,去除COD_Cr效果越好。当HSAAC用量为2.0g·L^-1,pH=3时,去除率达到78%以上;在酸性条件下HSAAC对COD_Cr的去除效果较好;HSAAC对废水中COD_Cr的吸附发生在前30min;COD_Cr浓度低于60mg·L^-1时,处理后COD_Cr的残余质量浓度低于地表水环境质量Ⅰ类标准(15mg·L^-1)。用碱再生HSAAC,一次再生率达94.22%,二次再生率达到了86.90%。说明高比表面积活性炭在适宜条件下对COD_Cr具有较好的吸附性能和良好的再生效果。     

雉科8种中央尾羽分类特征探究

观察348个标本的中央尾羽,测量其性状并统计,结果表明:1)雉科8种中央尾羽色斑格局不相同:2)中央尾羽长、内翈宽、外翈宽都存在显著差异(P<0.05),以白冠长尾雉中央尾羽(118,3±18,89)cm最长,内翈(2.44±0.21)cm最宽,以红腹锦鸡外翈(2.80±0.82)cm最宽,而灰胸竹鸡的中央尾羽(9.51±0.78)cm最短,内翈(1.02±0.13)cm和外嘲(0.99±0.10)cm最窄.以上有助于分辨雉科此8种鸟类.     

半抗原特异性抗体的筛选及亲和力成熟

噬菌体抗体库技术的出现开创了一条便捷的基因工程抗体生产路线,为小分子半抗原抗体的制备提供了一条新途径,具有极大的应用潜力,但得到的抗体片段的亲和力普遍较全分子差,需要优化筛选策略及抗体的体外亲和力成熟来解决这一问题。     

阿替普酶联合依达拉奉治疗急性缺血性卒中的疗效及神经功能缺损与时间窗的关系研究

目的:探讨阿替普酶联合依达拉奉治疗急性缺血性卒中的疗效及神经功能缺损与时间窗的关系。方法:选取大连医科大学附属大连市中心医院于2016年3月~2018年10月间收治的急性缺血性卒中患者117例,根据随机数字表法将患者分为对照组(n=58,阿替普酶治疗)和研究组(n=59,阿替普酶联合依达拉奉治疗),比较两组患者临床疗效、神经功能缺损情况、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、白介素-6(IL-6)水平、头颅CT梗死面积,观察两组治疗期间不良反应发生情况。结果:研究组的总有效率为84.75%(50/59),高于对照组的63.79%(37/58)(P<0.05)。两组患者治疗2周后MMP-9、IL-6、美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分均较治疗前降低,且研究组低于对照组(P<0.05)。研究组治疗24h、48h、72h的头颅CT梗死面积小于对照组(P<0.05)。治疗后研究组发病72h内、发病48h内患者NIHSS评分、头颅CT梗死面积高于发病24h内,且发病72h内高于发病48h内(P<0.05)。两组患者不良反应发生率比较无差异(P>0.05)。结论:阿替普酶联合依达拉奉治疗急性缺血性卒中,疗效确切,可有效改善患者过氧化损伤,降低细胞因子水平,且越早的时间窗内接受治疗的患者,其神经功能缺损、脑梗死面积改善效果越好。     

香蕉乙二醛酶基因增强酿酒酵母对非生物胁迫抵抗能力的研究

从香蕉cDNA文库中克隆到了一个香蕉(Musa acuminata AAA subgroup)乙二醛酶(glyoxalase,GLO)基因(MaGLO14)。构建了带有MaGLO14的酵母表达载体PYES2-MaGLO14,转化酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)尿嘧啶营养缺陷型菌株INVSC1,挑取转化子进行PCR和酶切鉴定,证实获得了转基因菌株。通过比较转基因菌株和非转基因菌株在NaCl、高温、低温、干旱、UV胁迫下的生长状况,证明转基因菌株在以上非生物胁迫条件下的存活菌落数均高于非转基因菌株。利用酿酒酵母初步证明MaGLO14具有增强酵母菌对非生物胁迫抵抗力的功能。