来源于葡萄球菌的N-乙酰神经氨酸裂合酶的基因克隆及性质

葡萄球菌Staphylococcus hominis来源的N-乙酰神经氨酸裂合酶基因shnal(GenBank Accession No.EFS20452.1)构建至pET-28a质粒并在大肠杆菌中得到表达.通过目的蛋白的纯化和酶学性质研究发现,ShNAL是一个四聚体,裂解方向的最适反应pH为8.0;合成方向的最适反应pH为7.5,最适反应温度为45℃.在45℃下孵育2h对ShNAL的活力基本无影响,高于45℃时,活力迅速下降.该酶在pH 5.0～10.0的环境中比较稳定,4℃下放置24 h酶的残余活力在70％以上.ShNAL对N-乙酰神经氨酸(Neu5Ac)、N-乙酰甘露糖胺(Man)和丙酮酸(Pyr)的Km值分别是(4.0±0.2) mmol/L、(131.7±12.1)mmol/L和(35.14±3.2) mmol/L,kcat/Km值分别为1.9 L/(mmol·s)、0.08 L/(mmol·s)和0.08 L/(mmol·s).     

雄激素对人前列腺细胞中鸟氨酸脱羧酶基因表达的调节作用

 为探讨雄激素对人前列腺中鸟氨酸脱羧酶（ Ｏ Ｄ Ｃ）基因表达的调节作用,以研究雄激素诱导前列腺良性增生的分子机理,分离培养了人胎儿前列腺间质细胞,以 Ｍ Ｔ Ｔ 法测定不同浓度 Ｄ Ｈ Ｔ对细胞的促增殖作用;以最适浓度的 Ｄ Ｈ Ｔ（１ ０００ μｇ／ Ｌ）刺激该细胞,分别于 ０,３,６,１２,２４,３０ ｈ 提取总 Ｒ Ｎ Ａ,用斑点杂交及 Ｎｏｒｔｈｅｒｎ ｂｌｏｔ 法分析测定各组细胞中 Ｏ Ｄ Ｃ ｍ Ｒ Ｎ Ａ 的丰度,并对杂交膜进行薄层扫描定量．结果显示：（１） Ｄ Ｈ Ｔ 对前列腺间质细胞的增殖呈双相调节作用,即在低浓度时随着 Ｄ Ｈ Ｔ 浓度的增加,对该细胞的促增殖作用增强,１ ０００ μｇ／ Ｌ时刺激活性最强,高浓度 Ｄ Ｈ Ｔ 对该细胞的刺激作用降低．（２）斑点杂交显示,在 １ ０００ μｇ／ Ｌ Ｄ Ｈ Ｔ 刺激细胞后 ６ ｈ 时, Ｏ Ｄ Ｃ ｍ Ｒ Ｎ Ａ开始明显升高,２４ ｈ 达高峰（约为 ０ ｈ 的 ４８ 倍）,至 ３０ ｈ 有所降低．（３） Ｎｏｒｔｈｅｒｎ ｂｌｏｔ 结果显示,人胎儿前列腺间质细胞中有两种 Ｏ Ｄ Ｃ ｍ Ｒ Ｎ Ａ,分别为 ２０ ｋｂ 和 ２６ ｋｂ,经扫描定量结果显示：１ ０００μｇ／ Ｌ Ｄ Ｈ Ｔ 对两种 Ｏ Ｄ Ｃ ｍ Ｒ Ｎ Ａ     

北方蜜环菌菌索生长、发育对环境氧气及土壤湿度的响应

蜜环菌属Armillariaspp.真菌是重要的植物病原菌和兰科Orchidaceae植物天麻Gastrodia elata的专性共生菌,能以菌索形式在土壤中存活和传播,因此,土壤环境变化对蜜环菌菌索生长、发育的影响,是关系天麻栽培和森林蜜环菌病害的重要过程。为了揭示蜜环菌生长发育对土壤水分和氧气的适应特征,本研究以北方蜜环菌Armillaria borealis为研究材料,设计氧气浓度5%、15%、20%和30%的4个水平与土壤湿度20%、40%、60%和80%的双因素实验,在室内24℃及黑暗条件下培养,观察菌索发生时间(T)、测定菌索生物量(DW)、菌索长度(L)、菌索数(Nt)、菌索分枝数(Nf)和菌索直径(AD)。结果表明,土壤湿度和氧气浓度对北方蜜环菌菌索发育和生长具有显著影响,在15%的氧气浓度和60%的土壤湿度发育最快。本研究为人工模拟蜜环菌生长发育的环境提供了部分依据,对提高天麻人工栽培的产量,揭示森林蜜环菌病害发病机制具有重要价值。     

盐胁迫对苹果器官中钙镁铁锌含量的影响

以盆栽2年生富士苹果树(砧木为平邑甜茶M.hupehensisReld)为试材,研究了盐胁迫对苹果矿质营养平衡的影响.结果表明,在盐胁迫下,苹果各器官不同时期的单位干样中Ca、Mg、Fe和Zn含量的平均值没有明显变化,但各元素与Na的比值明显下降,特别是在高盐(3‰NaCl)胁迫下下降更为明显,从而破坏了树体内元素平衡.在无盐和盐胁迫下,苹果各器官中Ca含量的顺序为主干韧皮部＞叶片、新梢＞根＞主干木质部;Mg含量为新梢、根＞主干木质部、主干韧皮部、叶片;Fe含量为根＞叶片＞主干韧皮部、新梢＞主干木质部;Zn含量为新梢＞叶片＞根、主干韧皮部＞主干木质部.与对照相比,器官中各元素含量在胁迫期间表现出不同程度的波动性.