全文获取类型
收费全文 | 2844篇 |
免费 | 209篇 |
国内免费 | 206篇 |
出版年
2024年 | 5篇 |
2023年 | 44篇 |
2022年 | 119篇 |
2021年 | 192篇 |
2020年 | 109篇 |
2019年 | 129篇 |
2018年 | 119篇 |
2017年 | 115篇 |
2016年 | 155篇 |
2015年 | 196篇 |
2014年 | 210篇 |
2013年 | 246篇 |
2012年 | 271篇 |
2011年 | 244篇 |
2010年 | 147篇 |
2009年 | 119篇 |
2008年 | 147篇 |
2007年 | 113篇 |
2006年 | 88篇 |
2005年 | 69篇 |
2004年 | 63篇 |
2003年 | 48篇 |
2002年 | 42篇 |
2001年 | 32篇 |
2000年 | 24篇 |
1999年 | 29篇 |
1998年 | 17篇 |
1997年 | 20篇 |
1996年 | 23篇 |
1995年 | 12篇 |
1994年 | 19篇 |
1993年 | 9篇 |
1992年 | 11篇 |
1991年 | 11篇 |
1990年 | 11篇 |
1989年 | 8篇 |
1988年 | 6篇 |
1987年 | 3篇 |
1986年 | 4篇 |
1985年 | 6篇 |
1984年 | 2篇 |
1983年 | 3篇 |
1981年 | 2篇 |
1979年 | 3篇 |
1978年 | 2篇 |
1974年 | 1篇 |
1973年 | 2篇 |
1972年 | 1篇 |
1971年 | 2篇 |
1968年 | 3篇 |
排序方式: 共有3259条查询结果,搜索用时 15 毫秒
21.
Ziqiang Ding Hongwei Duan Wenbo Ge Jianshu Lv Jianlin Zeng Wenjuan Wang Tian Niu Junjie Hu Yong Zhang Xingxu Zhao 《Animal Reproduction》2022,19(2)
Progesterone (P4) can participate in the development of female mammalian antral follicles through nuclear receptor (PGR). In this experiment, the differences of P4 synthesis and PGR expression in different developmental stages of sheep antral follicles (large > 5mm, medium 2-5mm, small < 2mm) were detected by enzyme-linked immunosorbent assay, immunohistochemistry, qRT-PCR and Western blotting. Secondly, sheep follicular granulosa cells were cultured in vitro. The effects of different concentrations of FSH and LH on P4 synthesis and PGR expression were studied. The results showed that acute steroid regulatory protein (StAR), cholesterol side chain lyase (P450scc) and 3β Hydroxysteroid dehydrogenase (3β-HSD) and PGR were expressed in antral follicles, and with the development of antral follicles in sheep, StAR, P450scc and the expression of 3β-HSD and PGR increased significantly. In vitro experiments showed that FSH and LH alone or together treatment could regulate P4 secretion and PGR expression in sheep follicular granulosa cells to varying degrees, hint P4 and PGR by FSH and LH, and LH was the main factor. Our results supplement the effects of FSH and LH on the regulation of P4 synthesis during follicular development, which provides new data for further study of steroid synthesis and function in follicular development. 相似文献
22.
生态环境脆弱带ECOTONE的基础判定 总被引:156,自引:8,他引:148
ECOTONE为国际生态界最近重新定义的基本概念之一。本文在诠释生态环境脆弱带的定义之后,对其实质及其空间属性作了较全面的逻辑归纳。在进一步研究的基础上,对于生态环境脆弱带作出了独立的函数表达,并且就生态环境脆弱带的宽度指标、重迭度指标、脆弱度指标、综合性指标,提出了较严格的表述形式。它们吸收了生态界面理论,并把系统生态学中的非稳定性理论,广延为辨识“全球变化”的基本手段,从而在生态学理论与应用两个方面,体现了研究的意义和价值。 相似文献
23.
同型半胱氨酸对大鼠血管平滑肌细胞增殖的作用 总被引:11,自引:0,他引:11
血中同型半胱氨酸(homocysteine,HCY)浓度的升高已成为动脉粥样硬化发生的一个独立危险因子.为进一步阐明HCY促进血管平滑肌细胞(vascularsmoothmusclecels,VSMCs)增殖,从而引起动脉粥样硬化发生的机理.本实验采用细胞计数、3H-TdR参入、细胞周期分析、Northern杂交方法证明,一定剂量的HCY可促进离体培养的WKY大鼠血管平滑肌细胞增殖,使其DNA合成增加,细胞周期中S期细胞所占比例增加43%,并促进c-myc与c-fos原癌基因mRNA表达增加.提示HCY可能通过促进VSMCs增殖而诱发动脉粥样硬化 相似文献
24.
25.
麻疯树脂酶全长基因克隆、表达及其蛋白质结构预测 总被引:3,自引:1,他引:3
脂酶(Lipase,EC3.1.1.3)是普遍应用于皮革、饲料及生物柴油工业的工业酶制剂,具有广泛的应用价值。目前对植物来源的脂酶研究较少。本研究用在生物柴油中具有应用前景的油料植物——麻疯树(Jatrophacurcas)作为研究对象,克隆了该物种的脂酶基因(JcLIP)。通过多序列比对并结合物种的亲缘关系设计了具有较高特异性的简并引物,通过使用RT-PCR和RACE技术,最终获得了麻疯树脂酶基因的全长序列并成功地在大肠杆菌中表达,酶活测定结果表明,麻疯树脂酶在大肠杆菌中表达在包涵体中,但是能产生具有活力的蛋白质,酶活约为0.8U.mL-1。结构预测和比较表明,JcLIP蛋白质具有脂酶的结构核心和催化活性中心,而在非核心区具有较毛霉脂酶更多的插入和随机卷曲,这可能是决定二者之间酶活差异的重要原因。 相似文献
26.
八肽胆囊收缩素对内毒素休克时海马损伤的影响及其机制初探 总被引:2,自引:0,他引:2
目的:观察八肽胆囊收缩素(CCK-8)对内毒素休克(ES)时海马损伤的影响,并探讨其可能的作用机制。方法:将日本大耳白兔经静脉注入内毒素的主要活性成分脂多糖(LPS,8mg/kg)复制ES模型。动物(32只)随机分为对照组、LPS组、CCK-8+LPS组和非特异性CCK受体拮抗剂丙谷胺(Pro)+LPS组(n=8)。监测平均动脉压(MAP)的变化,光、电镜观察海马的组织形态学改变,比色法检测海马NOS和SOD活性、N0和MDA含量的改变.用SD大鼠(12只,同上复制模型及分组)以免疫组织化学染色法观察海马iNOS和nNOS表达的变化。结果:与对照组相比,注入LPS后出现MAP显著而持续下降(P〈0.01);海马部位神经元损伤明显;iNOS和nNOS表达增强,NOS活性、NO和MDA含量显著升高(P〈0.05、P〈0.01和P〈0.01),SOD活性则降低(P〈0.01)。预先注入CCK-8可明显减轻上述变化,预先注入Pro则加剧以上变化。结论:CCK-8可减轻ES时脑内海马部位的损伤。其机制可能与其抗氧化作用和抑制NO的过量生成有关。 相似文献
27.
A β-glucosidase effectively releasing diosgenin from spirostanosides of Dioscorea zingiberensis C. H. Wright (DZW), named AfG, was purified from a strain of Aspergillus fumigates. The molecular weight of AfG was 113 kDa. Analysis of protein fragments by ESI-Q-TOF indicated that AfG was a β-glucosidase.
The circular dichroism spectrum suggested that the main secondary structure of AfG in Milli-Q water was α-helixes. Atomic
force microscopy revealed that it was a globular protein. AfG maintained high activity from pH 3.6 to 5.0 and from 50 to 90°C.
With the strong heat stability, AfG retained 55% of its original activity at 65°C for 120 h. AfG utilized muti-3-O-glycosides
of various steroidal saponins from DZW as substrate, such as trillin, diosgenin diglucoside, dioscin, deltonin and gracillin,
to yield diosgenin, suggesting the possibility of producing diosgenin from total saponins of DZW using a single enzyme. 相似文献
28.
【目的】通过分离海分枝杆菌野生株和mkl突变株的全菌蛋白,并进行差异蛋白质组分析,以期为探索分枝杆菌重要毒力基因mkl的功能提供新思路。【方法】以海分枝杆菌野生株和mkl突变株为研究材料,提取全菌蛋白,i TRAQ试剂标记后进行质谱鉴定和定量分析,并利用Uni Prot数据库对差异蛋白进行生物信息学分析。【结果】共鉴定出在野生株和mkl突变株中差异表达蛋白566个,其中在突变株中上调表达蛋白232个(比值≥1.4),下调表达蛋白334个(比值≤0.7)。生物信息学预测这些蛋白主要参与细菌脂质代谢、细胞壁和细胞进程、中间代谢、呼吸作用等生物学功能。其中Des A3下调最显著,其功能为脂肪酸去饱和酶,与油酸合成相关,进一步验证发现mkl突变株在不含油酸的固体培养基中生长受限,提示mkl可能在油酸的生物合成通路中发挥功能。【结论】通过i TRAQ分析了海分枝杆菌mkl突变株和野生株的差异表达蛋白谱,发现可能影响分枝杆菌油酸、脂质等合成代谢通路,为进一步研究mkl基因在分枝杆菌致病中发挥作用的相关机制奠定了基础。 相似文献
29.
Haijian Wu Huanjiang Niu Cheng Wu Yong Li Kun Wang Jianmin Zhang Yirong Wang Shuxu Yang 《Journal of cellular and molecular medicine》2016,20(9):1770-1778
The autophagy–lysosomal pathway is a self‐catabolic process by which dysfunctional or unnecessary intracellular components are degraded by lysosomal enzymes. Proper function of this pathway is critical for maintaining cell homeostasis and survival. Subarachnoid haemorrhage (SAH) is one of the most devastating forms of stroke. Multiple pathogenic mechanisms, such as inflammation, apoptosis, and oxidative stress, are all responsible for brain injury and poor outcome after SAH. Most recently, accumulating evidence has demonstrated that the autophagy–lysosomal pathway plays a crucial role in the pathophysiological process after SAH. Appropriate activity of autophagy–lysosomal pathway acts as a pro‐survival mechanism in SAH, while excessive self‐digestion results in cell death after SAH. Consequently, in this review article, we will give an overview of the pathophysiological roles of autophagy–lysosomal pathway in the pathogenesis of SAH. And approaching the molecular mechanisms underlying this pathway in SAH pathology is anticipated, which may ultimately allow development of effective therapeutic strategies for SAH patients through regulating the autophagy–lysosomal machinery. 相似文献
30.
人血小板因子4在大肠杆菌中的高效表达及活性研究 总被引:1,自引:0,他引:1
为了提高人血小板因子 4(humanplateletfactor 4,hPF4)的表达 ,在PT7 7 hPF4表达质粒的基础上 ,采用PCR定位突变技术 ,改造人血小板因子 4(hPF4)cDNA基因片段 ,去除cDNA 3′端非翻译区AT富含序列 ,改用大肠杆菌强串联终止密码子TAATAA ,成功构建了高效表达质粒pBV2 2 0 hPF4。摇瓶发酵重组人血小板因子 4的产量达 1 60mg L较原表达质粒PT7 7 hPF4表达量提高了近 80倍。经包涵体的洗涤、变性、复性后 ,采用鸡胚绒毛尿囊膜血管生成抑制实验测定复性后rhPF4的生物学活性 ,结果显示 :rhPF4具有抑制血管生成活性。 相似文献