ROCKⅠ／Ⅱ基因下调对血管平滑肌细胞迁移及增殖的影响

目的：探讨ROCK亚型ROCKⅠ和ROCKⅡ对血管平滑肌细胞（A7r5）迁移及增殖的影响。方法：利用Western blot技术检测ROCKⅠ和ROCKⅡ蛋白在A7r5细胞中的表达水平;利用siRNA技术使ROCKⅠ和ROCKⅡ基因表达分别下调,并检测基因下调后蛋白表达水平;利用Boyden小室法,观察ROCKⅠ和ROCKⅡ基因下调后及ROCK特异抑制剂Y-27632对PDGF诱导的A7r5细胞迁移的影响;使用MTT法检测ROCKⅠ和ROCKⅡ基因下调后对A7r5细胞生长曲线的影响。结果：ROCKⅠ和ROCKⅡ在A7r5细胞中的蛋白表达水平不同,ROCKⅡ较ROCKⅠ的表达水平高4倍;通过对A7r5细胞进行ROCKⅠ和ROCKⅡsiRNA转染,使二者蛋白表达水平分别下调83.4％和94.7％;基因表达下调后,ROCKⅠ明显抑制了PDGF诱导的A7r5细胞的迁移,而ROCKⅡ无明显影响,Y-27632也抑制了A7r5细胞的迁移;ROCKⅠ和ROCKⅡ基因下调后对A7r5细胞生长曲线的影响无明显差别。结论：ROCKⅠ在血管平滑肌细胞迁移过程中起主导作用,ROCKⅠ和ROCKⅡ对血管平滑肌细胞的增殖作用无明显差异。     

遗传群体偏分离研究进展

偏分离是指观察到的基因型比例偏离预期的孟德尔分离频率方式,无法用传统的遗传理论和方法加以分析。偏分离被认为是一种重要的进化动力,并对遗传连锁图谱的构建造成影响。本文针对偏分离的现象、偏分离的影响因素和形成原因,以及对QTL定位的影响等方面进行综合分析,系统阐述了植物分离群体偏分离的研究进展,为后续研究提供有益的参考。     

鼠源性抗雄性特异性抗原噬菌体Fab抗体的制备及分析

利用噬菌体抗体库筛选技术获得抗雄性特异性抗原的噬菌体Fab抗体,首次采用雄鼠脾细胞对鼠源性抗雄性特异性抗原噬菌体Fab抗体库进行3轮亲和富集和2轮雌鼠脾细胞吸附,对筛选后特异性噬菌体Fab抗体进行ELISA分析,重组率鉴定及基因测序分析。结果显示,5次筛选后的15个菌落中有9个能产生抗雄性特异性抗原特异性噬菌体抗体,噬菌体Fab抗体的基因重组率为60%,E5克隆的重链、轻链可变区序列分别属于VH1和VκⅣ基因家族,这为挑选出高亲和力的抗雄性特异性抗原噬菌体Fab抗体奠定了实验基础,将推进雄性特异性抗原及其抗体的研究进程,并为性别控制研究开创新途径。     

中草药抗氧化活性研究进展

综述了中草药抗氧化作用机理及其评价方法、高效抗氧化剂的筛选、中草药抗氧化剂的主要活性成分和中草药抗氧化剂的应用研究进展。     

PI法和Annexin V／PI法检测蓝舌病毒HbC3诱导人肝癌细胞的凋亡

利用流式细胞仪比较PI法和AnnexinV/PI法检测不同时间人肝癌细胞感染蓝舌病毒HbC3的凋亡率分析。结果:PI法在24h、36h、48h的凋亡率分别为10.8±3.05、21.7±6.28、28.3±10.6;AnnexinV/PI法的凋亡率分别为20.42±3.70、49.3±8.11、79.6±11.5。二种方法及不同时间感染病毒细胞的凋亡率之间有显著差异(P<0.01)。证明了AnnexinV/PI法能特异地、准确地检出早期凋亡的细胞、继发性坏死的细胞,BTV-HbC3诱导Hep-3B细胞凋亡是致肿瘤细胞病变、死亡的重要表现形式之一。     

裸鼠呼吸道合胞病毒感染的动物模型

呼吸道合胞病毒(RSV)是全世界婴幼儿下呼吸道感染的首位病毒病原体,免疫缺陷个体容易发生严重感染,目前尚无理想RSV感染动物模型用于研究。我们用细胞免疫缺陷裸鼠感染RSV,旨在建立理想的动物模型,为RSV感染的防治研究奠定基础。裸鼠滴鼻感染RSV后肺组织分离到病毒,直接免疫荧光检测到支气管肺泡灌洗液RSV抗原阳性,空斑形成实验检测肺组织病毒滴度在感染后第3天达高峰,并持续到第9天仍能检测到病毒。免疫组化检测RSV抗原主要分布在细支气管、毛细支气管和肺泡上皮细胞胞浆内。肺组织病理学显示RSV感染导致裸鼠淋巴细胞浸润为主的肺间质性炎症,电镜分析超微结构可见到细胞内病毒颗粒和气血屏障的破坏。支气管肺泡灌洗液白细胞计数显示裸鼠RSV感染炎症高峰在感染后第9天。裸鼠RSV感染的病毒复制和病理改变特点与人相似,病毒持续高水平复制,是客观而实用的评价抗RSV制剂效果的小鼠模型。     

芽变毛白杨形态解剖和同功酶初步分析

目的:为了解芽变毛白杨(以下称芽变杨)新品种的特点及融合亲本。方法:试验以芽变杨、毛白杨和大官杨为研究对象,进行形态学、同功酶等分析。结果:在外部形态上芽变杨既有毛白杨和大官杨的特点,具有两亲本折中的形态。显微观察,导管壁较厚,管腔占木质部的比例小。同功酶谱带具有两亲本特有的条带,这为芽变杨是大官杨和毛白杨两者的融合突变提供了直接证据。     

凝结芽胞杆菌(TBC169)片治疗便秘的实验研究和临床疗效

目的观察凝结芽胞杆菌片（BC1）对便秘的药理作用和I临床疗效。方法昆明种雄性小鼠随机分为6组（每组10只）。BC1片（3个剂量）和BCz片治疗组小鼠口服BC。片和BC2片,空白对照组小鼠和模型对照组小鼠口服自来水,每天1次,共7d。之后,两治疗组和模型对照组小鼠在禁食12h后．均口服复方地芬诺酯（CDX）片,引发便秘。成人慢性便秘38例患者随机分为治疗组（20例）和对照组（18例）,分别口服BC1片和金双歧片（BG）,每天3次,共14～21d。结果BC1片能明显地减少便秘小鼠的首次排便时间（P〈0．05）和显著地增加大便粒数及重量（P〈0．05）。在临床试验中,治疗成人慢性便秘,BC1片的治愈率为45％,总有效率为70％,而相对的BG片分别为44％和72％,两药均未见不良反应或副作用。结论BC1片对小鼠实验性便秘和成人慢性便秘均有明显的治疗作用,在临床试验中未见不良反应或副作用。     

绿色荧光蛋白融合人核糖核酸酶抑制因子表达载体pEGFP-C1-hri的构建及鉴定

目的构建表达绿色荧光蛋白融合人核糖核酸酶抑制因子的表达载体pEGFP—C1—hri,为探讨人核糖核酸酶抑制因子抗肿瘤作用的分子机制打下基础。方法用亚克隆法,将目的片段从表达载体pGEX-6p-1-hri克隆到pEGFP-C1上,用双酶切筛选得到阳性重组质粒pEGFP—C1—hri,用脂质体法将其瞬时转染到小鼠黑色素瘤细胞B16中,在荧光显微镜下检测其表达。结果pEGFP—C1—hri中插入了hri序列,绿色荧光高效表达于B16细胞浆中。结论pEGFP—C1—hri表达载体已成功构建。     

植物基因光反应元件及其结合蛋白

本文介绍了植物基因的G-box、GT元件等光调控元件及其结合蛋白的类型、结构特点和相关研究进展。