The RhoGAP SPIN6 Associates with SPL11 and OsRac1 and Negatively Regulates Programmed Cell Death and Innate Immunity in Rice

The ubiquitin proteasome system in plants plays important roles in plant-microbe interactions and in immune responses to pathogens. We previously demonstrated that the rice U-box E3 ligase SPL11 and its Arabidopsis ortholog PUB13 negatively regulate programmed cell death (PCD) and defense response. However, the components involved in the SPL11/PUB13-mediated PCD and immune signaling pathway remain unknown. In this study, we report that SPL11-interacting Protein 6 (SPIN6) is a Rho GTPase-activating protein (RhoGAP) that interacts with SPL11 in vitro and in vivo. SPL11 ubiquitinates SPIN6 in vitro and degrades SPIN6 in vivo via the 26S proteasome-dependent pathway. Both RNAi silencing in transgenic rice and knockout of Spin6 in a T-DNA insertion mutant lead to PCD and increased resistance to the rice blast pathogen Magnaporthe oryzae and the bacterial blight pathogen Xanthomonas oryzae pv. oryzae. The levels of reactive oxygen species and defense-related gene expression are significantly elevated in both the Spin6 RNAi and mutant plants. Strikingly, SPIN6 interacts with the small GTPase OsRac1, catalyze the GTP-bound OsRac1 into the GDP-bound state in vitro and has GAP activity towards OsRac1 in rice cells. Together, our results demonstrate that the RhoGAP SPIN6 acts as a linkage between a U-box E3 ligase-mediated ubiquitination pathway and a small GTPase-associated defensome system for plant immunity.     

褐边绿刺蛾的取食行为和取食量

观察褐边绿刺蛾Parasa consocia Walker2个世代幼虫取食杨树叶片的习性。结果表明,第1代幼虫7龄,幼虫期平均取食量167.7cm2/头,取食持续时间26d;第2代幼虫8龄,幼虫期平均取食量170.5cm2/头,取食持续时间27d。2个世代末龄幼虫取食量最大,占整个取食量的80%左右,4~5龄幼虫是防治的关键龄期。     

罗非鱼无乳链球菌Sip基因的克隆、表达及免疫原性分析

表面免疫原性蛋白(Surface Immunogenic Protein,Sip)是B群链球菌(Group B Streptococcus,GBS)的一种表面蛋白,在GBS多种血清型的菌株中均有表达。研究从实验室分离到的罗非鱼无乳链球菌广东株的基因组DNA中扩增出Sip基因,构建原核表达载体pColdII-Sip,转化大肠杆菌(Escherichia coli)BL21(DE3)菌株。经诱导表达、SDS-PAGE电泳检测显示重组蛋白主要以可溶形式表达。重组蛋白用亲和层析的方法纯化,蛋白纯度达98%。纯化后的重组蛋白免疫罗非鱼(Oreochromis niloticus,GIFT strain)以分析其免疫原性。受免鱼免疫14d后进行人工攻毒试验,免疫组的相对保护率为70%—87%。酶联免疫吸附试验(Elisa)显示受免鱼对重组蛋白产生了较好的免疫应答,免疫剂量为3μg/g和5μg/g时受免鱼血清抗体滴度可达1:128000。研究结果显示重组蛋白Sip具有较强的免疫原性和保护作用,Sip基因可作为罗非鱼链球菌基因工程亚单位疫苗候选基因。     

水库生态系统调节小气候及净化空气细菌的服务功能——以深圳梅林水库和西丽水库为例

生态系统服务功能已成为生态学研究的热点,但水库生态系统服务功能的研究较少.对深圳市梅林水库和西丽水库调节小气候和净化空气细菌的服务功能进行了实地研究,并对调节小气候的服务功能进行了价值评估.结果表明水库生态系统有一定的降温、增湿和净化空气细菌效应.在炎热的夏季,梅林水库和西丽水库的平均温度和最高温度比市区分别降低1.59、2.35℃和2.56、4.10℃.在干燥的冬季,梅林水库和西丽水库相对湿度的平均值和最大值较市区分别提高了6.01%、11.10%和7.38%、7.80%.梅林水库、西丽水库和市区空气细菌数量分别为9、10cfu/皿· 5min和107cfu/皿· 5min,库区空气细菌数量远远少于市区.梅林水库和西丽水库调节小气候的服务价值分别为1249.13×104元· a-1和5441.83×104元· a-1.     

五台山草地自然保护区土壤中钴的含量分布及影响因素

研究五台山６种主要土壤类型中全钴的含量分布,并对影响其含量分布的一些主要因素进行了分析。结果表明：①五台山土壤中全钴含量范围为１２．７７～２３．３９ｍｇ／ｋｇ,平均含量为１７．３８ｍｇ／ｋｇ,高于全国及世界土壤中钴的平均含量。影响土壤全钴含量的主要因素是土壤母质。②相关分析表明,五台山土壤中全钴含量与全铁、全铜含量呈极显著正相关,且全钴含量与全铜含量关系更为密切;而与土壤有机质、ｐＨ、１～０．０１ｍｍ、０．０１～０．００５ｍｍ、０．００５～０．００１ｍｍ、＜０．００１ｍｍ的土粒含量及全锰含量无明显的相关性。③五台山土壤中全钴含量高于土壤中钴的临界水平     

低温生淀粉糖化酶菌株RS01分离及其酶学性质

自渤海湾海泥中分离得到一株产低温生淀粉糖化酶能力较强的菌株RS01,经形态学、生理生化特性及16S rRNA分析将其鉴定为气单胞菌属。对该菌株产的低温生淀粉糖化酶酶学性质进行初步研究,结果表明其最适酶反应温度为30℃,酶的热稳定性比较差,最适pH为5.4,经TLC鉴定酶解产物中有葡萄糖,表明该分离菌株具有产低温生淀粉糖化酶的能力。     

两种树叶在华南地区陆地与水环境中的分解速率比较

利用粗细2种孔径的分解袋对两种树叶(蒲桃和白兰)在广州长岗山自然保护小区的陆地和池塘中分别进行了为期210d和60d的分解研究.在陆地环境中,蒲桃在粗细网袋中的分解速率分别为0.003318d^-1和0.003728d^-1,白兰在粗细网袋中的分解速率分别为0.009238d^-1和0.004379d^-1;在静水环境中,蒲桃在粗细网袋中的分解速率分别为0.009536d^-1和0.012591d^-1,白兰在粗细网袋中的分解速率分别为0.017949d^-1和0.020759d^-1.结果表明,两种树叶在陆地中的分解速率均慢于水环境.另外,由于富含丹宁的蒲桃叶片具有抑菌作用,因此,无论在陆地还是水环境,蒲桃树叶的分解速率均慢于白兰树叶.     

2型糖尿病大鼠模型制备的影响因素及其特点

目的探讨高脂喂养联合低剂量链脲佐菌素(Streptozotocin,STZ)制备2型糖尿病大鼠模型的造模方法和影响因素。方法4周龄雄性Sprague Dawley(SD)大鼠45只随机分为三组:(1)正常组(normal control,NC),9只,普通饲料喂养。(2)高脂组(high fat,HF),9只,高脂饲料喂养。(3)糖尿病模型组,根据高脂喂养时间差异和STZ剂量不同设计了3种模型制备方法:A组,9只,高脂喂养满4周,注射STZ 30 mg/kg;B组,9只,高脂喂养满8周,注射STZ 20 mg/kg;C组,9只,高脂喂养满8周,注射STZ 30 mg/kg。所有大鼠于48h、2周和4周后行灌胃葡萄糖耐量试验(OGTT)评价成模率和血糖波动情况。实验结束时测定血清胰岛素、甘油三酯(TG)和胆固醇(TC),RT-PCR测定胰腺内胰岛素mRNA表达水平,免疫组化染色观察胰岛细胞形态学特点,用彩色图像分析系统进行定量比较。结果糖尿病C组血糖显著升高,成模后2周血糖下降,4周后又上升到基线水平,成模率100%。糖尿病A组、B组在4周后血糖逐渐降低到接近正常水平,成模率分别为55.6%、11.1%。C组与HF组相比,胰岛素敏感性显著下降(P<0.01)。β细胞内胰岛素水平下降39.3%(P<0.01),胰岛内β细胞所占比例下降了79.2%(P<0.01),胰腺内胰岛素mRNA表达水平减少19.2%(P<0.01),α细胞升高了1倍(P<0.01)。结论高脂喂养8周后腹腔注射低剂量STZ(30 mg/kg)制备的2型糖尿病大鼠模型,成模率高,模型稳定。     

IFN α2b抗流感病毒的作用

用流感病毒攻击小鼠建立动物模型,观察了重组干扰素α2b抗流感病毒的作用。小鼠采用滴鼻和腹腔注射途径分别给予40μL干扰素α2b,取40μL致死剂量(LD50)流感病毒攻击小鼠,观察IFNα2b抗流感病毒的效果。结果显示,干扰素可提高小鼠生存率。可见干扰素具有抗流感病毒的作用。