Construction of transgenic mice producing CAT to milk by co-injection of two overlapping fragments of bovine αs1-casein-CAT gene

Two αs1-casein/chloramphenicol acetyltransferase (CAT) gene constructs overlapping by 3.0kb were constructed and co-injected into murine zygotes. In 9 of 10 lines of transgenic mice obtained, based on analysis of structure and expression of the transgene, accurate extrachromosomal homologous recombination (ECR) between the two overlapping DNA fragments was found. Different levels of CAT activity were detected in milk from these lines. The highest CAT activity was about 25-50μg/mL milk. In some mice. CAT activity was found in salvia gland, thymus and spleen extracts. The high frequency and accuracy of ECR reported here will be applicable in the experimental manipulation for generation of relatively large transgene.     

克服早胚发育阻断的兔输卵管因子“DPF-1”的初步研究

兔64 kDa输卵管蛋白(DPF-1)具克服小鼠早胚发育阻断的作用。进一步分析的结果表明DPF-1的等电点介于7.2-8.1;其合成与分泌对雌激素或孕激素无明显依赖性,能穿越透明带,紧密附着在早胚细胞膜周围。借助于Western blotting分析法,发现DPF-1的分布具组织专一性,仅存在于输卵管,而新西兰白兔子宫、卵巢、肝脏、心脏、肺、脾脏、骨骼肌、小肠和脑等组织中皆未发现;在所检测的小鼠和金黄田鼠输卵管中,也显示出DPF-1相关分子,小鼠的为71 kDa和32 kDa输卵管蛋白,金黄田鼠的为68 kDa和49 kDa输卵管蛋白。值得注意的是,以DPF-1主动免疫的雌性小鼠,经交配,输卵管中的44.8%早胚发育遭阻断,提示DPF-1在克服早胚发育阻断并实现由母型向合子型基因调控过渡的过程中可能起决定性作用。     

人胚细胞提取物抗突变作用的研究

本文应用体外培养人淋巴细胞和小鼠骨髓微核与染色体畸变检测,研究了人胚细胞水提物(胚提物)的遗传毒性和抗突变效应。结果表明,(1)胚提物(3和30μg/ml,下同)可显著抑制培养人淋巴细胞的自发和γ-射线诱发的微核形成;(2)胚提物对培养淋巴细胞的自发染色体畸变无明显影响,但可显著抑制丝裂酶素C(MMC)诱发的染色体畸变; (3)胚提物显著抑制环磷酰胺诱发的小鼠骨髓多染性红细胞微核(PCE-MN)的增加; (4)胚提物的上述抗突变效应呈剂量依赖性增加。因此,作者认为,人胚细胞水提物是一种抗突变剂, 可望用于肿瘤的化学预防,并可用作为肿瘤放疗和化疗的辅助药物,以减少毒付反应和二次肿瘤的发生率。 Abstract:Genetially toxic and antimutagenic effects of the aqueous extracts of human fetal cells(HFCAE) against mutagen-induced chromosomal aberrations and micronucleus formation in human lymphocytes in vitro and bone marrow of mice were studied.HFCAE (3 and 30 μg/ml)significantly inhibited spontaneous and γ-rays-induced micronucleus formation and MMC-induced chromosomal aberrations in human lymphocytes in vitro.HFCAE (3 and 30μg/ml) strongly suppressed also micronucleus formation induced by CP in PCEs of mice.These antimutagenic effects of HFCAE were dose-dependent.Our results suggest that HFCE might be an antimutagen and have potential value in its clinical application.     

GABAB受体与腺苷酸环化酶偶联环节的脱敏研究

将突触体膜与佛波脂（ＰＭＡ）,ＧＡＢＡＢ受体激动剂巴氯芬（Ｂａｃｌｏｆｅｎ,ＢＡＬ）预孵育一定时间后ＢＡＬ对腺苷酸环化酶（ＡＣ）基础活性及ｆｏｒｓｋｏｌｉｎ刺激的ＡＣ活性的抑制率显著降低,而ｆｏｒｓｋｏｌｉｎ预孵育时,ＢＡＬ对基础及ｆｏｒｓｋｏｌｉｎ刺激的ＡＣ活性的抑制率不变,表明ＧＡＢＡＢ受体与ＡＣ偶联环节的脱敏机制涉及蛋白激酶激活。而与蛋白激酶Ａ无关,脱敏时ＧＡＢＡＢ受体的Ｋｄ值增加,本 实验     

羽衣甘蓝裂叶相关性状遗传分析

以羽衣甘蓝圆叶自交系‘0835’和裂叶自交系‘0819’为亲本,调查P1、P2、F1、F2群体莲座期4个裂叶相关性状表型数据,运用‘四世代主基因+多基因’遗传模型,对叶长、叶宽、叶形指数、叶缘缺刻数4个叶形相关性状进行遗传分析,探讨羽衣甘蓝裂叶相关性状的遗传规律,为羽衣甘蓝裂叶性状遗传、QTL定位及新品种选育奠定基础。结果表明:(1)4个性状均存在一定的杂种优势,其中叶缘缺刻数中亲优势达显著水平,4个性状均存在负向超亲优势。(2)叶长和叶宽均符合E-4模型,即由2对等加性主基因+加性-显性多基因共同控制;叶长主基因遗传率为83.80%,多基因遗传率为1.05%;叶宽主基因遗传率为22.28%,多基因遗传率为61.92%。(3)叶形指数和叶缘缺刻数均符合E-1模型,即由2对加性-显性-上位性主基因+加性-显性多基因控制;叶形指数主基因遗传率为93.73%,多基因遗传率为2.59%;叶缘缺刻数主基因决定了表型变异的91.18%。     

不同栽培管理模式对农田土壤团聚体组成及其碳、氮分布的影响

在两种肥力条件下设置超高产栽培模式(SH)、高产高效栽培模式(HH)、农民习惯处理(FP)和不施肥对照处理(CK)4种栽培管理模式的定位试验,研究了以肥料投入为主要影响因素的不同栽培管理模式对黄淮海区域不同肥力农田耕层土壤团聚体组成及其碳、氮分布的影响,为通过培肥土壤实现小麦-玉米周年可持续增产增效提供技术支持.结果表明: 与低肥力田块(LSF)相比,高肥力田块(HSF)耕层土壤团聚体的平均质量直径和几何平均直径高、分形维数低,有利于大团聚体的形成与稳定,各级团聚体的有机碳和全氮含量较高.优化施用氮磷钾肥、配施有机肥可增加耕层土壤团聚体的粒径、降低其分形维数,促进大团聚体的形成与稳定,对高肥力田块的影响大于低肥力田块;二者亦可提高有机碳和全氮在大团聚体中的含量与分布,其中,对＞5 mm团聚体的贡献率的影响在低肥力田块大于高肥力田块,对5～0.5 mm的各粒级团聚体的贡献率的影响在高肥力田块优于低肥力田块.     

5种地黄花部综合特征与繁育系统的初步研究

生殖隔离是物种分化与延续的基础,地黄属植物是否存在生殖隔离仍不清楚。通过实地观测地黄属5个物种(天目地黄、湖北地黄、裂叶地黄、地黄和茄叶地黄)自然种群的花部形态、开花动态、花蜜体积、花蜜的糖浓度及其日变化、杂交指数、花粉-胚珠比等指标,结合人工授粉套袋,对地黄属植物的花部综合特征和繁育系统进行研究。结果显示:(1)地黄属植物的花为两性花,单花花期5～7 d,种群花期40～60 d;5种地黄在花序类型、花形态、花粉量、花粉-胚珠比等方面都存在差异,其中茄叶地黄的花粉完全败育。(2)5种地黄属植物的繁育系统属于异交,部分自交亲和,需要传粉者,不具有无融合生殖特性,地黄与茄叶地黄存在强烈营养繁殖。(3)5种地黄属植物的花朵基部有蜜腺可以产生糖浓度较高的花蜜,这也支持传粉者的存在,但除地黄确定为蜜蜂传粉外,其它地黄植物在野外并未观测到有效的传粉者,可能与地黄的散生特性、生境相互隔离以及传粉观测期气象条件恶劣有关。研究认为,5种地黄属植物较长的花期能有效弥补传粉者访问频率低的不足;除遗传屏障外,推测地黄属5个物种花展示方式的差异可能吸引不同的传粉者,加之地理、生态因素的作用导致了5种地黄属植物繁育系统的分化。     

浙江省清凉峰自然保护区苔藓植物区系成分研究

通过对2013~2014年于清凉峰自然保护区采集的1 500余份苔藓植物标本进行鉴定和文献研究,统计分析了清凉峰自然保护区苔藓植物种类组成,区系地理成分及特点,并对该地区与相邻8个地区藓类植物的丰富度系数比较和相似性系数比较,以明确该地区苔藓植物不同的生态分布类型,揭示浙江清凉峰保护区苔藓植物多样性的变化规律。结果表明:(1)浙江省清凉峰国家自然保护区苔藓植物共有62科143属337种(包括3个变种),其中苔类植物20科29属49种,藓类植物42科114属288种。(2)藓类植物的优势科9个、优势属16个。(3)该地区苔藓植物区系成分主要以东亚成分为主(占总种数41.84%),温带成分次之(占总种数28.57%),热带成分再次之(占总种数20.74%)。(4)浙江清凉峰自然保护区苔藓植物区系与浙江省境内的金华山、大盘山、天目山和凤阳山的亲缘关系较为密切。(5)浙江清凉峰自然保护区苔藓植物生态分布类型复杂多样,以石生类型(占总标本数的47.09%)最多,其次为岩面土生(占总标本数的27.68%)和土生(占总标本数的12.85%)类型。     

耐低温淀粉酶产生菌Y89微波诱变及发酵工艺

为进一步提高耐低温淀粉酶产生菌的发酵生产水平,以前期筛选得到的1株耐低温兼性厌氧淀粉酶产生菌Y89为出发菌株,对其进行微波诱变处理,通过酶产量及遗传性能稳定检测筛选高活力突变株,并采取单因素优化法对菌株的培养基和培养条件进行优化。获得1株遗传稳定的高活力突变株Y89-11,淀粉酶产量达750.2 U/m L,是原出发菌株的1.94倍。采用单因素实验确定该突变株的最佳发酵条件:最适生长及产酶温度为16℃,最佳产酶时间60 h,最优碳源为可溶性淀粉,氮源为酵母膏,培养基中添加Ca2+可显著提高产酶量。经诱变选育出的突变株Y89-11与原菌株相比产酶量提高了94%,所产淀粉酶为中低温酶,最适反应温度30℃,耐低温效果较好,应用前景广阔。