麻叶千里光抗菌化学成分的研究(Ⅲ)

以革兰氏阳性菌金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）、枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）和阴性菌大肠杆菌（Escherichia coli）为受试菌,采用体外抑菌圈法追踪抗菌活性部分。利用各种色谱技术对正丁醇萃取部分进行分离纯化,根据理化性质和谱学数据进行结构鉴定。从麻叶千里光的水提醇沉物的正丁醇萃取部分分离得到3个化合物：苄基-O-α-L-广吡喃阿拉伯糖基（1→6）-β-D-吡喃葡糖苷（1）、（6S,9S）-6-羟基-3-酮-α-紫罗兰醇-9-O-β-D-葡糖苷（2）和（6S,9R）-6-羟基-3-酮-α-紫罗兰醇-9-O-β-D-葡糖苷（3）。它们均为首次从该属植物中分离得到。     

DNA损伤生物学反应中ATM对p21~(WAF1/CIP1)蛋白的直接磷酸化

毛细血管扩张性共济失调症突变蛋白 (mutatedinataxiatelangiectasia ,ATM)是直接感受DNA双链断裂损伤并起始诸多DNA损伤信号反应通路的主开关分子 .已有研究发现 ,DNA损伤生物学反应中 ,ATM可通过磷酸化活化p5 3,继而转录活化细胞周期检查点蛋白p2 1WAF1 CIP1的表达 ,而对于ATM是否直接参与p2 1WAF1 CIP1的早期活化迄今尚无实验证明 .通过免疫共沉淀反应 ,检测到细胞电离辐射 (ionizingradiation ,IR)反应早期ATM与p2 1WAF1 CIP1蛋白存在相互作用 .将p2 1WAF1 CIP1蛋白编码基因全长克隆入原核表达载体pGEX4T 2 ,经诱导表达及亲和层析纯化获取GST p2 1融合蛋白作为磷酸化底物 .体外磷酸化实验检测证明 ,IR活化的ATM具磷酸化p2 1WAF1 CIP1蛋白的功能 ,并且此磷酸化功能可被PI3K家族特异性抑制剂Wortmannin所抑制 .结果揭示了IR后ATM可通过直接磷酸化p2 1WAF1 CIP1蛋白 ,在IR致DNA损伤生物学反应早期调控p2 1WAF1 CIP1蛋白的快速活化过程     

洋葱伯克霍尔德菌脂肪酶：一种应用前景广阔的生物催化剂

洋葱伯克霍尔德菌脂肪酶对有机溶剂（醇）、热、氧化剂、表面活性剂、去污剂、蛋白酶等具有良好的抗性,在有机合成、对映体拆分、非水相催化等领域应用十分广泛。综述了洋葱伯克霍尔德菌脂肪酶的发酵生产、分离纯化、基因克隆与表达、固定化与生物印迹、蛋白质结构解析及应用研究等,并展望了其未来发展方向,以期为该工业酶的研发与广泛应用提供参考。     

花粒期光照对夏玉米干物质积累和养分吸收的影响

选用登海605(DH605)为试验材料,在大田条件下通过花粒期遮阴(S)和增光(L)研究不同光照对花后夏玉米产量、干物质积累和氮、磷、钾养分吸收与运转特性的影响.结果表明: 遮阴后夏玉米产量、干物质积累量及氮、磷、钾养分吸收量均显著降低;而增光有利于夏玉米干物质积累量及氮、磷、钾养分吸收量和产量的提高.2011-2013年,遮阴处理的产量较对照(自然光下)分别降低了59.4%、79.0%、60.6%;增光后产量分别增加16.3%、12.9%、6.8%.遮阴对干物质积累的影响大于其对植株氮、磷吸收量的影响,植株体内氮、磷等养分含量有所上升,而钾吸收量的下降幅度大于干物质积累,钾素相对含量降低,氮、磷、钾向籽粒的分配比例降低.增光后干物质积累和氮、磷吸收量显著上升,但对氮、磷吸收的影响更大;增光条件下,氮、磷、钾等养分向籽粒的分配比例增加.
     

2007-2010四年间鲍曼不动杆菌耐药性变迁及对亚胺培南耐药的机制研究

目的研究2007-2010四年间中山大学附属第一医院临床分离的鲍曼不动杆菌的耐药性迁移情况和耐亚胺培南的鲍曼不动杆菌(IRAB)的耐药机制,为临床抗感染治疗提供依据。方法采用VITEK 2型全自动微生物检测系统对细菌进行鉴定及药敏分析;用PCR方法检测碳青霉烯酶基因blaOXA-51、blaOXA-23、blaOXA-24和blaOXA-58。结果 2007-2010四年间分离鲍曼不动杆菌811株,耐药率逐年上升,其对头孢哌酮/舒巴坦、美罗培南、头孢吡肟、亚胺培南和哌拉西林/他唑巴坦的耐药率上升明显,如对亚胺培南的耐药率自2007-2010年分别为13.1%、26.0%、44.3%和59.5%。811株鲍曼不动杆菌中IRAB有311株,IRAB对抗生素的耐药率明显升高,但四年间的耐药率变化并不明显。对IRAB敏感的抗生素以阿米卡星为首,其次为头孢哌酮/舒巴坦,但头孢哌酮/舒巴坦的敏感率逐年下降。从311株IRAB中随机抽取140株,检出blaOXA-51基因阳性125株(89.3%),blaOXA-23基因阳性29株(20.7%),blaOXA-24基因阳性3株(2.14%),blaOXA-58基因阳性22株(15.7%)。结论鲍曼不动杆菌的耐药性逐年升高,以阿米卡星与头孢哌酮/舒巴坦联合应用为有效的治疗方法,产碳青霉烯酶是IRAB的主要耐药机制。     

白皮松天然群体种实性状表型多样性研究

在白皮松天然林分布区共抽取了13个群体,分别测量了5个种实性状。方差分析表明：白皮松种实性状在群体间和群体内存在广泛的变异,5个性状在群体间的F值为2.44～14.68,群体内的F值为7.48～44.53,差异均达显著或极显著水平。群体内的方差分量接近80%,是白皮松表型遗传变异的主要部分。群体间的表型分化系数V_ST=22.8%,与其他松类树种相比,分化水平处于中等偏上。各群体内变异系数和相对极差存在显著或极显著差异,根据二者的多重比较,可将13个群体按群体内表型变异程度分为4组。种子性状地理梯度变异明显, 呈东北—西南走向。种子3个性状（亲代）的表型变异系数与子代的2年生苗高和地径、1年生苗的全干重之间达到或接近显著相关。     

In vitro intragenomic rearrangement of porcine circovirus type 2

We report here for the first time the genome sequence of a rearranged porcine circovirus type 2 (PCV2) strain, CH-IVT1, isolated from PCV2-infected PK-15 cells. The complete circular genome of the CH-IVT1 is 605 nucleotides (nt) in length. The finding will help us to understand the molecular evolution of PCV2 and the relationship between PCV2 and PCV-associated diseases.     

Trans‐3,5,4´‐trimethoxystilbene reduced gefitinib resistance in NSCLCs via suppressing MAPK/Akt/Bcl‐2 pathway by upregulation of miR‐345 and miR‐498

Despite initial dramatic efficacy of epidermal growth factor receptor (EGFR) tyrosine kinase inhibitors (EGFR‐TKIs) in EGFR‐mutant lung cancer patients, subsequent emergence of acquired resistance is almost inevitable. Resveratrol and its derivatives have been found to exert some effects on EGFR‐TKI resistance in non‐small cell lung cancer (NSCLC), but the underlying mechanisms remain unclear. We screened several NSCLC cell lines with gefitinib resistance by MTT assay and analysed the miR‐345/miR‐498 expression levels. NSCLC cells were pre‐treated with a resveratrol derivative, trans‐3,5,4‐trimethoxystilbene (TMS) and subsequently challenged with gefitinib treatment. The changes in apoptosis and miR‐345/miR‐498 expression were analysed by flow cytometry and q‐PCR respectively. The functions of miR‐345/miR‐498 were verified by CCK‐8 assay, cell cycle analysis, dual‐luciferase reporter gene assay and immunoblotting analysis. Our results showed that the expression of miR‐345 and miR‐498 significantly decreased in gefitinib resistant NSCLC cells. TMS pre‐treatment significantly upregulated the expression of miR‐345 and miR‐498 increasing the sensitivity of NSCLC cells to gefitinib and inducing apoptosis. MiR‐345 and miR‐498 were verified to inhibit proliferation by cell cycle arrest and regulate the MAPK/c‐Fos and AKT/Bcl‐2 signalling pathways by directly targeting MAPK1 and PIK3R1 respectively. The combination of TMS and gefitinib promoted apoptosis also by miR‐345 and miR‐498 targeting the MAPK/c‐Fos and AKT/Bcl‐2 signalling pathways. Our study demonstrated that TMS reduced gefitinib resistance in NSCLCs via suppression of the MAPK/Akt/Bcl‐2 pathway by upregulation of miR‐345/498. These findings would lay the theoretical basis for the future study of TMS for the treatment of EGFR‐TKI resistance in NSCLCs.     

唐家河自然保护区大熊猫种群数量及栖息地的移动

本文根据大熊猫季节性活动规律特点,应用海拔高度路线调查法,全面收集唐家河自然保护区大熊猫的比较新鲜粪便,计获１２４个粪样材料,提取ＤＮＡ作ＤＮＡ指纹图,经微机检测,保护区有大熊猫３７只,个体数量与粪样采集量之比为１∶３３５１４,有６个家系,雌兽２１只,雄兽１６只。并搞清了保护区生态环境质量,箭竹遭受病虫害的程度,洪水对栖息地的影响,特别对引起大熊猫数量减少及栖息地移动等原因,作了较为详细的分析。     

同尾酶技术在构建疟疾多价重组DNA疫苗中的应用

同尾酶是一类识别不同核苷酸序列但能酶切产生相同粘性末端的限制性内切酶,依靠同尾酶的这种特性,可以根据需要将不同的ＤＮＡ 片段进行灵活组合,获得各种排列顺序的多价表位重组疫苗．将这种方法用于疟疾多价重组ＤＮＡ 疫苗的研制;ＢＡＬＢ／ｃ 小鼠免疫实验对所得重组疫苗ＰＵ２８６的免疫原性进行了测定．