Cloning and characterization of human syndecan-3.

Syndecans are cell-surface heparan sulfate proteoglycans, which perform a variety of functions in the cell. Most important, they are co-receptors for growth factors and mediate cell-cell and cell-matrix interactions. Four syndecans (syndecan 1-4) have been described in different species. The aim of this work was the cloning and characterization of human syndecan-3. The human syndecan-3 sequence has high homology to the rat and mouse sequences, with the exception of the 5'-region. Syndecan-3 mRNA is mostly expressed in the nervous system, the adrenal gland, and the spleen. When different cell lines were transiently transfected with full-length syndecan-3 cDNA, it was localized to the membrane and induced the formation of long filopodia-like structures, microspikes, and varicosities. Consequently, the actin cytoskeleton was re-organized, since actin staining was mostly found in the cellular extensions and at the cell periphery, co-localizing with the syndecan-3 staining. The development of the phenotype depended on the presence of sugar chains, as transfected glycosaminoglycan-deficient Chinese hamster ovary (CHO) 745 cells did not show these structural changes, nor did transfected CHO K1 cells in the presence of heparin. The similarity of the cloned DNA sequence with that of other mammalian species and the high expression in the nervous system led us to the assumption that human syndecan-3 could perform comparable functions to those described for syndecan-3 in rat and mouse. Additionally, transient transfection experiments suggest a role of human syndecan-3 in the organization of cell shape by affecting the actin cytoskeleton, possibly by transferring signals from the cell surface in a sugar-dependent mechanism.     

Specific binding of human alpha interferon to a high affinity cell surface binding site on bovine kidney cells

Virus-induced human alpha interferon (HuIFN-alpha) derived from Namalwa cells and purified to a specific activity of 2 X 10(8) units/mg of protein was radiolabeled with 125I-labeled Bolton and Hunter reagent to a specific activity of 4-12 microCi/micrograms of protein. The binding of this 125I-IFN to bovine kidney cells was examined at 4 degrees C. Scatchard analysis of the binding data indicate the presence of 650 binding sites/cell and binding of the ligand with an apparent Kd of 6 X 10(-11) M. Trypsin or acid treatment of cells to which 125I-IFN was bound resulted in the release of greater than or equal to 77% of the radioactivity, indicating a majority of radiolabeled material was bound to the cell surface. Antibodies against human leukocyte IFN but not antibodies against human fibroblast IFN inhibited the binding of radiolabeled IFN to the cells. The binding of 125I-IFN was not inhibited by a 75-fold molar excess of mouse IFN but was inhibited 30% by a 200-fold molar excess of human beta (fibroblast) IFN. These data are compatible with the Lower biological activities of these IFNs on bovine kidney cells. Several Escherichia coli derived HuIFN-alpha s inhibited the binding of the radiolabeled IFN to the same extent as native HuIFN-alpha s, but four fragments of HuIFN-alpha 1, an E. coli-derived 86 amino acid NH2-terminal fragment as well as 3 different synthetic carboxy-terminal fragments of 140, 56, or 46 amino acids did not inhibit binding.     

Optomotorische Reaktionen und Farbensinn beim Meerschweinchen

Zusammenfassung Es wird die Frage gestellt und experimentell geprüft, ob man auch bei einem Säugetier mit Hilfe der optomotorischen Reaktionen feststellen kann, ob diese Tierart einen Farbensinn besitzt oder nicht. Gerade bei den bekanntesten Säugetierarten, die schon sehr oft untersucht wurden, spricht ein Teil der Arbeiten für, ein anderer gegen das Vorhandensein eines Farbensinnes. Fast alle diese Arbeiten sind mit der Dressurmethode ausgeführt worden.Während der Versuche befindet sich das Tier in einem zylindrischen Glasbehälter, um den herum ein zweiter, mit farbigen und grauen senkrechten Streifen versehener Glaszylinder konzentrisch rotiert. Die Farben Rot, Gelb, Grün und Blau, nach Intensität und Wellenlänge geeicht, werden jeweils in Kombination mit sämtlichen Helligkeitsstufen einer 16stufigen Grau-Skala (intensitäts-geeicht und nach dem Prinzip der Konstanz der Unterschiedsschwellen zusammengestellt) durchgeprüft.Für die Einteilung der optomotorischen Reaktionen wird eine neue Nomenklatur vorgeschlagen (lokomotorische, rostromotorische und oculomotorische Reaktionen). Hier werden nur die rostromotorischen verwendet.Wird eine Farbe, z.B. Blau (s. Abb. 1) in Kombination mit der dunkelsten Graustufe dargeboten, so erfolgen die optomotorischen Reaktionen sehr stark (mit großem Winkelausschlag). Wird das Blau mit helleren Graustufen kombiniert, dann werden die Reaktionen geringer, bei Kombination mit noch hellerem Grau nimmt die Reaktionsstärke wieder zu. Hierfür gibt es nur eine mögliche Deutung: Dem Minimum der Reaktionsstärke entspricht jeweils Helligkeitsgleichheit zwischen Farbe und betreffender Graustufe für das Meerschweinchenauge. Es wird zur Kontrolle nachgeprüft, daß bei Kombination benachbarter Graustufen miteinander die optomotorischen Reaktionen fehlen. Damit ist mit Sicherheit bewiesen, daß Meerschweinchen die verwendeten Farben Rot, Gelb, Grün und Blau von allen, auch den für sie helligkeitsgleichen Graustufen unterscheiden können.Analoge Versuche mit albinotischen und grauen Hausmäusen ergaben wegen der hochgradigen motorischen Unruhe dieser Tiere keine so klaren Resultate. Bei den albinotischen Mäusen war überhaupt keine Farbunterscheidung nachweisbar, bei den grauen erschien nur die Unterscheidung von Rot und Gelb als möglich, aber nicht als völlig sicher bewiesen.Die relativen Helligkeitswerte der Farben für das Meerschweinchenauge im helladaptierten Zustande entsprechen im Prinzip der bekannten spektralen Empfindlichkeit des photopischen (Zapfen-)Apparates.     

Schriftenschau

Ohne Zusammenfassung