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221.
Elisabetta Schiliro Stefano Predieri Assunta Bertaccini 《Plant Molecular Biology Reporter》2001,19(3):271-272
Pyrus communis L. is the most important pear species for European production. Very few cultivars satisfy standards for fruit quality and
clonal fidelity; thus, accurate verification of cultivar identity for checking propagation material and patent protection
is important. We evaluated the randomly amplified polymorphic DNA (RAPD) technique for its ability to identify genetic differences
among standard pear (Pyrus communis L.) cultivars, William, Passa Crassana, and Conference, and three gamma-ray induced variants. To identify genotype-specific
markers, we used thirty 10-mer and two 11-mer sequences, annealing temperatures from 36–45°C, 2Taq polymerases (AmpliTaq and Stoffel fragment, both from former Perkin Elmer Cetus), and 2–4 replicate amplifications. Of the
32 primers (30 from Operon Technologies, Alameda, CA, USA), very few distinguished William from Passa Crassana, and only 1
could clearly differentiate all 3 cultivars. Two primers that did not reveal polymorphisms when used singly, generated polymorphic
patterns that distinguished standard from gamma-ray-treated material when used in combination. We show that RAPD analyses
can discriminate pear genotypes and suggest this technique as a reliable and inexpensive method for marker-facilitated screening
of propagation material and for patent protection. 相似文献