保持培养细胞原位、原形的超薄切片制备法

本文介绍先用环氧树脂Epon812包埋剂制成丘状膜,再在膜上培养细胞,直接将膜与细胞一起包埋,制备超薄切片。此种方法不仅能克服以往培养细胞需要离心成团,容易造成细胞破碎、变形的缺点;还能避免琼脂预包埋法悬浮细胞造成的抗原封闭;并能得到为数较多的连续超薄切片。它操作简便,较好地保持了培养细胞生长的原来位置及原有形状,为培养细胞进行免疫电镜的操作和提高制备培养细胞超薄切片的数量和质量提供了一种有效的途径。     

家兔精子膜蛋白rSP10在大肠杆菌中的高效表达及其抗血清的制备

为研究家兔精子膜蛋白rSP10在精子膜上的定位及其免疫原性,将不含编码信号肽序列的rsp10基因插入表达载体pET30a中,N端具有His6肽的融合蛋白re-rSP10得到高效表达,表达产物达细菌总蛋白的67%。经DEAE柱层析纯化表达产物,re-rSP10,产量约为50mg/mL培养物。Western实验结果表明,精子膜蛋白多克隆抗体能识别re-rsp10,说明大肠杆菌表达的re-rSP10具有免疫原性。用纯化的re-rSP10免疫雌性兔,得到re-rSP10专一性多克隆抗血清。将re-rSP10专一性多克隆抗血清加入获能精子中,发现SP10专一性多克隆抗血清严重影响获能精子的运动并且表现为剂量依赖性,但获能精子凝集现象并不明显。     

小麦突变体返白系返白阶段叶绿素代谢的变化

小麦 ( Triticum aestivum)返白系在返白阶段 Chl、胡萝卜素 ( Caro)含量均下降 ,但 Caro/ Chl的比值大于对照 ,表明叶片白化不是因 Caro减少引起的。Chl下降的同时 ,Chla和 Chlb均下降 ,表明该突变体属阶段性缺总 Chl型。返白初期 Chlase活性增高 ,返白中期活性下降 ,表明 Chl降解不是造成叶片失绿的主要原因 ;Chl合成中间物 δ-氨基酮戊酸 ( ALA)、胆色素原 ( PBG)积累 ,尿卟啉 ( Uro )、原卟啉 ( Proto )、镁 -卟啉 ( Mg- Proto )、原叶绿素酸 Pchl减少 ,特别是 Uro 在返白中期含量最低 ,复绿初期却急剧积累 ,表明叶绿素合成受阻于尿卟啉原 ( Urogen )的形成上。     

Overexpression of cotton GhMKK4 enhances disease susceptibility and affects abscisic acid,gibberellin and hydrogen peroxide signalling in transgenic Nicotiana benthamiana

Mitogen‐activated protein kinase (MAPK) cascades are involved in plant development, stress responses and hormonal signal transduction. MAPK kinases (MAPKKs), as the key nodes in these cascades, link MAPKs and MAPKK kinases (MAPKKKs). In this study, GhMKK4, a novel group C MAPKK gene from cotton (Gossypium hirsutum), was isolated and identified. Its expression can be induced by various stresses and signalling molecules. The overexpression of GhMKK4 in Nicotiana benthamiana enhanced its susceptibility to bacterial and fungal pathogens, but had no significant effects on salt or drought tolerance. Notably, the overexpressing plants showed increased sensitivity to abscisic acid (ABA) and gibberellin A3 (GA3), and ABA and gibberellin (GA) signalling were affected on infection with Ralstonia solanacearum bacteria. Furthermore, the overexpressing plants showed more reactive oxygen species (ROS) accumulation and stronger inhibition of catalase (CAT), a ROS‐scavenging enzyme, than control plants after salicylic acid (SA) treatment. Interestingly, two genes encoding ornithine decarboxylase (ODC) and S‐adenosylmethionine decarboxylase (SAMDC), the key enzymes in polyamine synthesis, exhibited reduced R. solanacearum‐induced expression in overexpressing plants. These findings broaden our knowledge about the functions of MAPKKs in diverse signalling pathways and the negative regulation of disease resistance in the cotton crop.     

对与缺失铁钼辅基的固氮酶钼铁蛋白重组的原子簇的结构要求

棕色固氮菌（Ａｚｏｔｏｂａｃｔｅｒ ｖｉｎｅｌａｎｄｉｉ）钼铁蛋白与邻菲口罗啉和Ｏ２ 保温并经凝胶柱层析后,成为部分缺失Ｐ－ｃｌｕｓｔｅｒ和ＦｅＭｏｃｏ 的失活蛋白。由３ 个－ ＯＣＨ３－ 连结于Ｍｏ原子间的２ 个１Ｍｏ∶３Ｆｅ∶４Ｓ结构单位组成的原子簇与４Ｆｅ∶４Ｓ原子簇的混合液,以及由ＫＭｎＯ４、高柠檬酸铁、Ｎａ２Ｓ和二硫苏糖醇组成的重组液均可使这种失活蛋白明显恢复Ｃ２Ｈ２ 还原活性,但都不能使可被ＦｅＭｏｃｏ 激活的ｎｉｆＥ和ｎｉｆＨ 基因缺失突变种及ＵＷ ４５的Ａｐｏ－ＭｏＦｅ 蛋白得到激活。表明,不能合成ＦｅＭｏｃｏ 的固氮菌突变种蛋白只能与具有ＦｅＭｏｃｏ相似或基本相似结构的原子簇进行体外重组,而部分缺失金属原子簇的钼铁蛋白能与具有一定结构和组成的原子簇进行体外重组,变为具有催化氮还原能力的各种固氮酶组分蛋白。     

熔盐热裂解生物质制生物油

为探讨热裂解条件对熔盐中生物质热裂解制生物油的影响,在自行设计的反应器中,以摩尔比为7∶6的ZnCl2-KCl混合熔盐作为热裂解的热载体、催化剂和分散剂,考察了500 ℃时添加的金属盐和生物质原料的影响,并采用气相色谱-质谱仪 (GC-MS) 对生物油的主要组成进行了分析。结果表明：添加的金属盐显著影响热裂解产物得率,稀土金属盐显著提高生物油得率,降低生物油的含水率,添加摩尔分数为5.0％ LaCl3时生物油得率为32.0％,含水率为61.5％;水稻秸秆热裂解的生物油和焦炭得率较高,稻壳热裂解的气体得率较高;金属添加盐对生物油组成有较强的选择性,LiCl和FeCl2对生物质向小分子裂解具有较强的催化作用,而CrCl3、CaCl2和LaCl3对生物油二次裂解具有抑制作用。研究结果为熔盐热裂解生物质制生物油提供了参考。     

鸭绿江口湿地鸻鹬类停歇地的生物生态研究

鸭绿江口湿地是鸻鹬类在东亚一澳大利亚北迁路线上的最重要停歇地,潮间带上的双壳类、腹足类、多毛类等底栖动物为鸻鹬类提供了能量保障.2010年3月-2011年6月对鸭绿江口潮间带的生物生态进行了调查研究.研究结果表明,生物群落结构相对简单,主要以双壳类、腹足类和多毛类为主,优势种演替明显,系统具有低多样性低密度的特点.鸻鹬类能量补充来源相对匮乏,饵料生物量的更新速度较慢,所提供的能值也相对较低,江户明樱蛤、青蛤(幼体)和长吻沙蚕是鸻鹬类的主要食物来源.鸻鹬类主要集中在低潮带下区觅食,在北迁高峰期对低潮带下区饵料生物影响较显著,尤其对江户明樱蛤丰度影响最明显.泥螺作为优势种,生态位最宽,分布于整个调查断面和潮带,但因体表分泌一种毒性粘液而不被鸻鹬类取食.饵料生物的种群补充能力较强,在鸻鹬类迁徙高峰期之后,饵料丰度和生物量又会恢复到正常水平.虽然目前人类对鸻鹬类的威胁显现较小,但使人类一生态系统一滨鸟之间持续和谐统一,必须综合考量鸭绿江口湿地包括人类在内的生态系统各关键组分之间的生态关联,兼顾生态系统的完整性和人类社会经济发展的可持续性.     

海洋生态系统固碳能力估算方法研究进展

气候变化受到全球关注,大气中CO2含量与气候变化息息相关。海洋是地球上最大的活跃碳库,在气候变化中扮演着举足轻重的作用。定量估算海洋中碳元素的吸收、转移、埋藏速率在全球碳循环及全球气候变化研究中有重要意义。目前,海洋固碳能力估算研究包括:利用海-气界面CO2分压差法估算海洋海-气界面CO2交换通量,根据海水中叶绿素含量建立的生态学数理模型法估算真光层浮游生物的初级生产力,234Th—238U不平衡法估算POC输出通量,210Pb定年法估算有机碳沉积通量。但迄今为止的研究工作尚有一定局限性,碳在大气—海水—沉积物3种介质间交换通量间相互影响的研究较少,海洋中碳垂直传输过程的主要影响因素和关键控制因子尚不明确,在海洋生态系统固碳能力估算方法方面国内外还没有统一的规范和标准。为进一步完善海洋生态系统固碳能力的估算方法,今后的工作应注重海洋固碳整套观测技术、分析和估算方法研究,并建立海洋碳汇估算指标体系、指标标准体系、以及评价标准体系,为我国的碳"减排"、"增汇"国家需求提供技术支持。