降钙素原和白细胞对成人发热性疾病早期诊断的临床价值

目的探讨降钙素原(PCT)、白细胞(WBC)水平对急诊发热性疾病的早期诊断价值,分析PCT与急诊发热性疾病严重程度的相关性。方法选取155例急诊成人发热病例,分为细菌感染组91组(其中又分为脓毒症组30例,局部细菌感染组61例)和64例非细菌感染组。分别采用定量免疫荧光酶标法和散射免疫比浊法测定其血清中PCT和WBC水平。结果非细菌感染组的WBC水平明显低于细菌感染组中的脓毒症组及局部细菌感染组,差异均有统计学意义(均P0.01);细菌感染组中的脓毒症组WBC水平稍高于局部细菌感染组,但两组差异无统计学意义(P0.05)。细菌感染组的PCT水平明显高于非细菌感染组,差异有统计学意义(P0.05);细菌感染组中的局部细菌感染组血清PCT水平和半定量分布与非细菌感染组比较无统计学意义(P0.05),而细菌感染组中的脓毒症组血清PCT水平和半定量分布与局部细菌感染组和非细菌感染组比较,差异均有统计学意义(均P0.01)。结论联合监测白细胞和降钙素原对发热病人的病因诊断和病情评估更有价值。     

微滴数字PCR技术应用进展

微滴数字PCR技术是数字PCR技术的一种,是近年来分子生物学领域的新型革命性技术,其特点是高度灵敏、绝对定量及高效方便等。目前,该技术在微生物检测、转基因检测、疾病检测以及质检领域的研究和应用中已凸显优势,随着微滴数字PCR仪的普及,该技术必将广泛应用于生命科学的各个领域。     

血管活性肠肽对肺表面活性物质结合蛋白A表达的影响

目的:研究血管活性肠肽(VIP)对肺表面活性物质结合蛋白A(SP-A)表达的影响以及VIP调控SP-A表达的细胞内信号转导途径.方法:运用免疫组织化学和RT-PCR技术研究VIP对SP-A表达的影响;并进一步运用受体拮抗、蛋白激酶抑制、反义寡核苷酸阻断等手段探讨VIP促进SP-A表达的信号转导途径.结果:①VIP(10-8mol/L)促进肺泡Ⅱ型细胞(ATⅡ)细胞中的SP-A蛋白表达和提高肺组织SP-AmRNA含量:②VIP受体拮抗剂(10-6mol/L)可取消VIP(10-8mol/L)促进SP-A表达的效应;③蛋白激酶C抑制剂H7(10-5mol/L)和c-fos基因的反义寡核苷酸(9×10 6mol/L)均可阻断VIP促进SP-A表达的作用.结论:VIP通过其受体促进SP-A的表达,PKC及c-fos蛋白在介导VIP促进SP-A表达的细胞内信号转导过程中起重要作用.     

个体化低剂量CT 尿路造影在诊断输尿管结石中的应用

目的:评价低剂量的个体化在输尿管结石疾病中的应用价值。方法:收集160例疑有输尿管结石的病例,随机分为常规组和低剂量组,其中低剂量组分3组,每组患者按体重指数(BMI)分层,常规组给予160 mAs管电流进行扫描,低剂量组分别给予120mAs、100 mAs、80 mAs管电流进行扫描。常规剂量组与低剂量各亚组进行剂量及图像评估及真实性和收益评价进行比较。结果:在其它扫描参数默认设置条件下,将管电流由常规160mAs,降至80-120 mAs时,辐射剂量均有不同程度降低,差异有统计学意义(P<0.01),肾盂、输尿管、膀胱显影强度无明显差异(P>0.05),而图像质量无明显下降,不影响诊断。同时按BMI分类各组内分层间辐射剂量、显影强度及图像质量间均无显著差异(P>0.05)。结论:个体化低剂量CTU,既可以减少患者辐射剂量,对待病人个体化、人性化,又不影响影像诊断,是一项有价值的检查方法。     

1株产纤维素酶木霉菌种的鉴定

对自行筛选分离的1株木霉菌进行形态学及分子生物学鉴定。采用CTAB法抽提其基因组总DNA,利用真菌通用引物ITS1和ITS4扩增菌株rDNA ITS区序列,扩增产物纯化后进行测序。测序结果在GenBank中进行同源性搜索,并下载部分具有代表性种的ITS序列,利用软件MEGA4构建分子系统发育树,通过序列分析,并结合形态学鉴定该菌属于半知菌亚门,丝孢纲,丛梗孢目,木霉属,康宁木霉(Trichoderma koningii)。     

中国生物医药产业技术创新战略联盟发展思路与对策

现代生物医药技术的迅猛发展正在改变着人们的生活。作为一种新的战略管理模式,战略联盟已逐步成为推进生物医药技术产业转化的重要手段。西方主要发达国家在产学研的优势互补模式和结合机制等方面都取得了显著的效果,并极大地推动了生物技术产业的快速发展。近年来,中国开始重视战略联盟的发展模式,然而在生物医药领域中国的技术创新战略联盟依然处于起步阶段,有关的机制和体制尚需健全。本文首先介绍了发达国家发展战略联盟的先进经验,并通过剖析美国的成功模式对当前中国生物医药产业技术创新战略联盟的现状和不足进行解读,提出发展思路与对策。     

江浙獐牙菜的小孢子发生和雄配子体形成及其系统学意义

采用常规石蜡切片技术,对江浙獐牙菜(Swertia hickinii Burk)花药壁形成、小孢子发生和雄配子体形成过程进行了研究。结果表明:(1)花药四室,花药壁由表皮、药室内壁、中层和绒毡层组成,药壁发育为双子叶型。绒毡层异型起源,腺质型。花粉成熟时药室内壁径向加长并纤维状加厚,表皮宿存。(2)小孢子母细胞在减数分裂过程中胞质分裂为同时型;小孢子四分体排列方式主要为四面体型,也有左右对称型和"T"型等其他类型;成熟花粉为3-细胞型,具三萌发沟。另外,对獐牙菜属的雄性胚胎学特征进行了全面总结,并与龙胆属、蔓龙胆属及双蝴蝶属进行比较归纳出其共性。研究认为,花药表皮宿存或退化,是獐牙菜属与双蝴蝶属的重要区别之一。     

牛组织中MBD1基因表达及其DNA甲基化调节

DNA甲基化是主要的表观遗传调节方式,在转录水平调节基因的表达,甲基化CpG结合蛋白MBD1能够结合甲基化及非甲基化的DNA,通过抑制域抑制基因的转录,在DNA甲基化和转录抑制之间起重要作用,但DNA甲基化对MBD1自身的调节作用还不清楚.本研究首先利用RT-PCR检测成年牛心脏、肾脏、肝脏、睾丸及卵巢5种组织中MBD1基因mRNA的表达;并根据牛MBD1调节区序列,针对其中的12个CpG位点设计引物,利用甲基化PCR测序分析方法,分析该调节区的DNA甲基化状态在牛5种组织中的变化.结果表明,在牛的5种组织中,MBD1基因在心脏和肾脏的表达量低于肝脏、睾丸及卵巢,且差异显著(P＜0.05);DNA甲基化检测显示,心脏和肾脏MBD1调节区的甲基化比率较肝脏、睾丸及卵巢甲基化低,说明调控区DNA甲基化与MBD1基因的组织特异性表达相关.     

一种来源于大菱鲆的热敏型尿嘧啶DNA糖苷酶的克隆表达及酶学性质鉴定

目的:尿嘧啶DNA糖苷酶UDGase是一种广泛应用于q PCR、二代测序等领域的工具酶,由于其应用特性,只有热敏性UDGase才具有较大开发利用潜力。目前全球热敏性UDGase工具酶仅有2个物种来源,均有专利保护且价格昂贵,亟待开发新来源且具有优良热敏特性的UDGase。方法:根据前人研究及序列分析推测大菱鲆(Scophthalmus maximus)具有热敏性UDGase。经验证,大菱鲆肝脏匀浆呈现UDGase活性。从大菱鲆肝脏匀浆克隆得到大菱鲆UDGase基因SmUDGase,并使用大肠杆菌工程菌株实现重组表达,分离纯化后进行活力表征检测。结果:序列比对结果表明,SmUDGase基因克隆成功。重组表达并经亲和层析、离子交换层析分离纯化,获得纯酶纯度约95%,产率1. 51mg/L,比活力2 295. 08U/mg。Sm UDGase具有热敏性,在40℃时酶活即开始迅速降低。其他酶学性质,如pH适应范围、金属离子依赖性和对抑制剂的敏感性均与当前商业化UDGase一致。结论:成功克隆并鉴定来自大菱鲆的新来源SmUDGase,该酶具有热敏感性,酶学特性接近目前商业化UDGase。并探索该酶的重组表达和纯化工艺,所得纯酶基本达到商业化生产水平,为该类型生物工具酶的开发提供了理论参考和技术储备。     

产广谱细菌素乳酸菌的筛选和鉴定

以大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、藤黄微球菌、铜绿假单胞杆菌和枯草芽孢杆菌为指示菌,从分离自四川传统发酵食品中的267株乳酸菌中,采用平板打孔法初筛、牛津杯法复筛（排除酸、过氧化氢干扰以及胰蛋白酶和木瓜蛋白酶处理）,筛选出1株分离自醪糟的具有较强抑菌作用的产广谱细菌素的乳杆菌菌株P158,结合形态学、生理生化特性和16S rDNA序列同源性分析,该菌株被鉴定为植物乳杆菌（Lactobacillus plantarum）。