里氏木霉内切-β-甘露聚糖酶基因在毕赤酵母中的表达

采用PCR方法从里氏木霉(Trichoderma reesei)基因组中获得含有两个内含子的内切-β-甘露聚糖酶全长基因,末端重叠延伸PCR去除内含子后,将其插入到巴斯德毕赤酵母(Picher pastoris)表达载体pPIC9K中,位于α-因子信号肽序列的下游,并与之同框,获得重组质粒pM242。重组质粒线性化后用电击法转化毕赤酵母菌株GS115。经大量筛选,获得高效分泌表达内切甘露聚糖酶的毕赤酵母工程菌株Gpmf25。摇瓶发酵结果表明,培养基中甘露聚糖酶的活力可达12.5IU/mL。重组酶最适pH和最适反应温度分别为5.0和80℃,在pH5.0～6.0时酶活稳定,在pH5.4时70℃保温30min酶活维持50％以上。     

植物乳杆菌PUM1785抑菌作用及耐胆盐和耐盐性能

目的通过分析植物乳杆菌PUM1785体外抑菌活性和部分耐受能力,为进一步研发乳杆菌微生态制剂提供理论和数据支持。方法以模式菌株WCSF1为对照株,采用双层琼脂点种法进行体外抑菌试验,并开展高胆盐、高盐环境耐受试验。结果植物乳杆菌PUM1785体外抑菌活性与模式菌株相近,对6种常见致病菌均有较强的抑制作用,对革兰阴性菌的抑菌效果优于革兰阳性菌。在不同浓度胆盐溶液中培养24 h后,2株乳杆菌生长均受抑制,当胆盐浓度从0 g/100 mL持续增至0.5 g/100 mL后,2株乳杆菌活菌数量呈下降趋势,但始终维持在10~5 CFU/mL数量级以上,并且PUM1785与WCSF1活菌数量比呈上升趋势;在不同浓度的NaCl溶液中培养24 h后,2株乳杆菌均生长良好,当NaCl浓度从0 g/100 mL升高到8 g/100 mL时,2株乳杆菌活菌数始终维持在10~8 CFU/mL数量级以上,并且PUM1785与WCSF1活菌数量比呈明显上升趋势。结论植物乳杆菌PUM1785具有与模式菌株相近的抑菌活性,对胆盐和高盐环境耐受力均强于模式菌株,表明PUM1785具有良好的生物学特性,可以作为微生态制剂研发的候选菌株。     

肠道病原菌侵袭素在药物纳米载体中的应用

口服给药是药物递送系统中的优选途径。然而,在通过胃肠道时,肠细胞的低渗透性经常会阻碍药物的有效递送。包囊药物能够解决这一问题的关键,取决于其中的细胞侵袭性靶向基团包裹的纳米颗粒系统。这种药物递送系统的侵入特性是由细菌侵袭素的关键成分提供,这些成分具有快速调节药物穿越肠细胞的作用,从而促进宿主细胞对药物的有效吸收。此综述重点阐述细菌侵袭系统,对合适的侵袭素分别从功能和分子结构、作为靶向药物的相对价值以及在使用过程中可能存在的误区依次进行探讨。此外,对口服给药方法的改进和未来前景也进行了讨论。     

基于ERIC-PCR指纹图谱技术的小鼠肠道菌群失调分析方法的建立

目的采用常规菌群分析方法和ERIC-PCR技术对正常小鼠和抗生素相关性腹泻小鼠模型分别进行肠道菌群检测,结合细菌培养和DNA指纹图谱检测结果分析小鼠肠道内主导菌群数量和种类的改变情况,建立利用ERIC-PCR技术分析小鼠肠道菌群失调的检测方法。方法先利用常规菌群分析方法鉴定正常小鼠和抗生素相关性腹泻小鼠的菌群状况,再提取其基因组DNA,最后以肠杆菌科基因间重复序列(ERIC)为模板,利用ERIC-PCR方法获得正常小鼠和模型小鼠的肠道菌群指纹图谱,与常规菌群分析结果作比较,验证ERIC-PCR技术的准确性。结果常规菌群分析结果表明四种优势菌群在数量上出现明显的变化,证实造模成功。经ERIC-PCR技术成功获得两组小鼠粪便基因组DNA图谱,两组间呈现具有一定对比性的特异性指纹图谱。结论从小鼠粪便基因组经ERIC-PCR后的图谱中特异性条带的分布、数目和亮度来看,能说明肠道菌群的分布状况存在明显差异,结合常规菌群分析方法作对比,说明ERIC-PCR技术是一种分析小鼠肠道菌群失调高效快捷的检测方法。     

浑善达克沙地三趾跳鼠体重与年龄划分

哺乳动物的年龄划分始终是动物种群生态学研究的基础内容之一,同时鼠类年龄划分方法在害鼠的预测和控制实践中具有十分重要的意义。国内外对于三趾跳鼠的生态、疫病、进化等方面进行过一些研究,但有关该鼠种年龄鉴定的研究和鼠类年龄组划分与鼠种的实际年龄对应的研究尚属空白。2002年到2003年间,我们在内蒙古锡林郭勒盟浑善达克沙地,采用常规夹线方法对三趾跳鼠(Dipus sagitta)的种群年龄进行调查,对每只捕获的三趾跳鼠样本进行了体长、体重、胴体重、繁殖特征进行记录,利用胴体重为标准,参考样本出现的时间（月份）及繁殖特征,将三趾跳鼠划分年龄组。结果表明,捕获到的三趾跳鼠可划分为3个自然年龄组,1龄组（胴体重≤71 g）,2龄组（71<胴体重≤90 g）,3龄组及以上（胴体重>90 g）,三趾跳鼠最大年龄至少3龄。鉴定三趾跳鼠年龄运用胴体重法相对简便准确。     

人类CD34^＋造血干／祖细胞的分子生物学特性

造血干／祖细胞（ＨＳＣ／ＨＰＣ）以有序的不同年龄等级结构状态存在于体内,它们的增殖、分化、成熟及程序死亡是一个连续的动态过程。ＣＤ３４抗原是目前所能认识表达在ＨＳＣ／ＨＰＣ表面上的最早抗原分子,对其分子结构的研究使人们更加认识到ＣＤ３４＾＋ＨＳＣ／ＨＰＣ的不同功能亚群、表达范围及其它生物学特征,诸如细胞周期状态、光散射性、造血生长因子受体（ＨＧＦｓＲ）Ｐ糖蛋白（Ｐｇｐ）或多药耐药基因（ＭＤＲ）的表     

屎肠球菌抗血清制备的探讨

屎肠球菌（E．faecium）属肠球菌属（Enterococcus）,用血清学分类属D群链球菌,为人及动物肠道中的正常菌丛的一部分［1］,在一定条件下可引起肠外感染。据国外最新报导,目前由肠球菌引起的医院内感染在所有医院内感染发病率中,已上升为第2位,仅次于金黄色葡萄球菌[2]。为更好地监测并及时控制该菌的医院内感染与流行,建立快速准确鉴定屎肠球菌的血清学方法是极其必要的,并适合于各级医院开展。因此,我们对制备高效价抗屎肠球菌抗体方法进行了初步探讨,并获得满意的结果。现将实验过程及结果报告如下。1材料与方法1．l材料1．1.…     

长白山白鸡腰子国家级动植物科技示范园区植物资源

白鸡腰子属温带气候,植物资源丰富.经过近两年的调查研究,首次统计出白鸡腰子植物资源约为124科、343属、619种,约占长白山植物资源种数的25.54%.本文报道了白鸡腰子药用植物、观赏植物、野菜植物、野果植物、蜜源植物等17类植物资源相的情况.在调查研究过程中设计了不同坡向、不同海拔的样地,介绍了各资源相在三个不同景观带的分布情况,并列举出部分代表性植物,提出了开发利用和保护植物资源的一些建议,同时制作了一张光盘.为国内外研究白鸡腰子植物资源提供了第一手资料.     

基于网络药理学和实验验证研究柠檬精油缓解焦虑症的作用机制

基于网络药理学方法探讨柠檬精油(lemon essential oil, LEO)干预焦虑症的作用机制并进行实验验证。GC-MS测定LEO组成,从TCMSP平台挖掘LEO的作用靶点;利用OMIM、GeneCards数据库获得焦虑症靶点;利用Venny获得LEO-焦虑症的交集靶点,进行GO和KEGG富集;利用Cytoscape构建“成分-靶点-通路-疾病”网络,利用1-Click Docking对关键成分与靶点进行分子对接。利用细胞炎症模型进行验证。从构建的网络中得到LEO的19种活性成分如柠檬烯、α-松油醇、β-蒎烯、乙酸橙花酯、4-萜品醇等,通过作用于18个疾病靶点(占总靶点78.26%)如GABRA2、MAO、DRD1、GRIA2等,调控20条信号通路如神经活性配体-受体相互作用、羟色胺能突触、多巴胺能突触等。柠檬精油对DPPH、ABTS自由基有抑制作用,能降低由脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)诱导HaCaT细胞内活性氧(reactive oxygen species, ROS)水平,降低炎症因子NO、TNF-α及IL-6水平。LEO通过多种有效成分多靶点调...