开发新型生物防治剂的见解

生物防治剂是指利用生物活体或其代谢产物对有害生物进行防治的一类农药制剂。随着化学农药副作用的逐渐显现．生物防治剂开始受到广泛关注。生物防治剂的开发目标是得到商业化的产品。本文着重从生物学上、技术上、商业上论述了开发生物防治剂所必须考虑的重要因素。     

一个抗真菌蛋白在绿色木霉中的分泌表达

AFP(antifungalprotein)是在丝状真菌巨大曲霉 (AspergillusgiganteusMDH18894 )中分泌的一个抗真菌蛋白。其mRNA含长度为 4 30bp的开放阅读框 ,编码 94个氨基酸的AFP前体 ,而成熟的AFP为 5 1个氨基酸的多肽。根据推测 ,在巨大曲霉中 ,AFP前体可能经两步剪切去除前导序列 (4 3个氨基酸 ) ,并最终形成具有抗真菌活性的成熟AFP ,已有报道证实 ,在另一种丝状真菌绿色木霉 (Trichodermaviride)基因组中存在一个类似AFP基因但不表达的序列 ,该序列与没有内含子的AFPcDNA序列完全一样。为了解巨大曲霉AFP基因可否在绿色木霉中表达 ,将AFP基因开放阅读框插入真菌表达载体trpC基因的启动子和终止子之间 ,并成功的转化了绿色木霉。SDS PAGE和Western印迹分析表明 ,绿色木霉转化子分泌表达了具有抗真菌活性的成熟AFP。为研究在绿色木霉中分泌表达具有重要应用价值的异源真核蛋白质打下了基础。     

一种新的遍在蛋白融合基因Uba256的克隆及表达

斜纹夜蛾核多角体病毒 (Spodopteralituramulticapsidnucleopolyhedrovirus ,SpltMNPV)的Uba2 5 6基因是已知昆虫病毒基因组中惟一编码遍在蛋白与GP37融合蛋白的基因。通过PCR方法扩增得到该基因及其N端的遍在蛋白编码区与C端的GP37编码区。将这 3个基因片段分别克隆至质粒pBV2 2 0与pQE30 ,构建得到重组质粒pB VUBCP、pQEUB与pQECP。pBVUBCP转化大肠杆菌DH5α ,经热激诱导表达了一条 38kD的蛋白带 ,证明Uba2 5 6表达的蛋白在大肠杆菌中没有发生剪切。pQEUB、pQECP转化大肠杆菌M15 ,经IPTG诱导 ,Western印迹分析结果表明遍在蛋白与GP37蛋白获得高效表达。以Ni2 NTA偶联抗体检测证明所表达的蛋白质均为融合蛋白质。纯化的融合蛋白质免疫新西兰大白兔可诱导产生特异抗体。ELISA和Western印迹检测结果显示 ,SpltMNPV遍在蛋白抗体及GP37抗体均与表达的融合蛋白质呈阳性反应 ,表明所表达的融合蛋白质仍保持原有蛋白质的免疫原性。以获得的抗体对感染SpltMNPV 72h的Sl zsu 1细胞进行检测 ,发现仅有一条 34kD的蛋白质带与GP37抗体发生特异反应 ;而有 4条分子量分别为 14、2 4、33、5 1kD的蛋白质带与遍在蛋白抗体发生特异反应 ,表明Uba2 5 6基因表达的蛋白质在宿主细胞内发生了剪切。     

末次冰期南海巽他陆架上的植被和气候——17962孔孢粉记录

提供了南海大陆坡上17962孔深海沉积物的孢粉记录。该孔长8m,底部^14C年龄为30000aBP,跨越了深海氧同位素3期,末次初期,冰消期和全新世几个地质历史阶段。孢偻记录显示末次冰期低海面时南海南部出露的陆架上了低地雨林。同时,在邻近的岛屿上山地雨林扩张,表明气候比较在凉,但是没有变干的迹象,冰消期植被和气候都经历了快速变暖的变凉的波动。全新世时,红树林和低地雨林的扩及孢粉沉积率的明显降低均表明气候变暖,海面上升,大陆架被淹没。     

南海北部更新世高分辨率孢粉序列与气候变化

依据南海ODP1144站下段（225.7-501.3m,ca.0.36-1.02Ma)孢粉记录,将1144站下段225.7-501.3m划分19个组合带（11-29）,并分别与氧同位素11-29期（MISs11-29)相对应。冰期时,花粉总沉积率增加,孢粉组合以松粉（Pinus),蕨类植物孢子（Fern)含量降低,草木植物花粉（Herb)含量增加为特征。气候干冷;间冰期时,则相反,间冰期孢粉组合特征反映其气候特征与现代相似,约0.82Ma后孢粉组合中的热带山地针叶类分子叶枝杉（Phyllocladus)的出现,以及草本植物禾本科（Gramineae),莎草科（Cyperaceae)取代耐干冷的蒿属（Artemisia),可能与夏季风增强有关,这一现象可与中国第四纪黄土-古土壤记录进行比较。     

补偿机制改革对公立医院产出效率的影响 ——基于县级中医医院的实证研究

目的 对补偿机制改革前后江苏省县级中医医院产出效率进行评价,并考察导致效率变化的相关因素。方法 随机前沿分析方法分析县级中医医院产出效率,Tobit回归方法分析不同影响因素对产出效率的影响。结果 江苏省县级中医院产出效率较低,补偿机制改革导致县级中医院效率出现进一步下降;费用模型、支出模型和收入模型的回归分析表明不同因素对县级中医院产出效率的影响。结论 优化县级中医院补偿策略,调整收支结构,加大中医医疗服务补偿力度。     

模拟高原训练损伤小肠黏膜屏障引发NF-κB等炎症因子水平上调北大核心CSCD

运动员在高原训练中,低氧与运动双重应激中常出现的腹泻、腹痛、食欲不振及其他消化系统紊乱,可能与小肠微观形态受损和伴随发生的细菌增殖异位及炎症有关。本研究构建SD大鼠高原训练模型,观察模拟高原训练对大鼠携氧用氧能力、小肠黏膜屏障完整性、小肠细菌量及小肠NF-κB等炎症因子表达的影响。血液细胞分析结果显示,低氧暴露和低氧训练导致大鼠红细胞数和红细胞压积显著上升。苏木精-伊红染色组织切片证实,低氧暴露导致大鼠小肠机械屏障轻微损伤,低氧训练导致大鼠小肠机械屏障严重受损。荧光原位杂交结果显示,低氧暴露导致大鼠小肠出现细菌增殖发生菌群异位,低氧训练导致增殖和异位现象加剧。蛋白质免疫印迹结果显示,NF-κB仅在低氧暴露和低氧训练组出现高表达,运动组与大鼠对照组无显著差异。逆转录聚合酶链式反应结果显示,TNF-α和IL-6作为NF-κB的下游因子,出现相似的变化趋势。以上结果表明,本研究建立的动物模型可以达到模拟高原训练的目的,高原训练导致大鼠小肠机械屏障被破坏,发生细菌增殖、细菌异位,进而引发小肠炎症因子水平上升。初步揭示了高原训练中运动员出现消化系统不适、腹泻的原因。对于通过补充有益菌的方式平衡菌群,缓解小肠损伤及炎症,解决高原训练中运动员消化系统不适的问题有待继续研究。     

绢丝丽蚌年龄与生长的研究

绢丝丽蚌一年生长一个生长轮。年轮可肉眼观察贝壳外表面凹陷的生长轮来鉴定,用纵剖贝壳明暗相间层数与打磨后观察棱柱层和珍珠层上的生长轮来验证。绢丝丽蚌10龄以前生长较快,10龄以后生长逐渐减慢。10龄以前年龄(A)与壳长(L)呈直线相关,年龄与壳重(Ws)、体重(W)均呈幂函数相关,其10龄以前的方程式分别为：L=0．8980A 0．8600(r=0．9883),Ws=1．0175A^2.3399(r=0．9997),W=1．3188A^2.3333=0．9997)。10龄以后年龄与壳长、壳重和体重均呈直线相关,其回归方程式分别为：L=0．1817A 7．9085(r=0．9813),Ws=10．7720A 61．1930(r=0．9902),W=13．6960A 78．8690(r=0．9903)。壳长与壳重、体重之间均呈幂函数相关,其相关方程式分别为：Ws=0．6303L^2.4846(r=0．9999),W=0．8181L^2.4775(r=0．9999)。壳重与体重之间呈线性相关,其回归方程式为：W=0．3560 1．2744Ws(r=0．9999)。     

家蝇转铁蛋白基因的克隆和生物信息学分析

为了研究家蝇转铁蛋白基因功能,获得全长cDNA序列并对其蛋白序列进行生物信息学分析,利用在线分析程序和相关工具软件分析转铁蛋白基因的开放读码框,分析编码蛋白的理化性质、结构域、并预测其空间结构和功能。结果表明家蝇转铁蛋白基因编码蛋白由622个氨基酸组成,分子量为70.58kDa,理论等电点为5.33,为稳定蛋白,有跨膜区,含有信号肽,该蛋白属于TR-FER保守结构域家族,亚细胞定位于细胞核,二级结构以无规则卷曲为主,功能预测该蛋白具有酶活性。     

多孔整体柱固定化酶研究进展

高效固定化酶载体的构建对于提高酶催化的反应速率和效率以及延长酶的使用寿命至关重要。多孔整体柱具有大的贯穿孔道和良好的通透性,易于改性,化学稳定性高。作为固定化酶的载体,可以为底物和产物提供快速的对流传质性能,从而提高酶催化的速率和效率,在保持酶高效专一及温和的催化反应特性的同时,克服了游离酶的不足,具有贮存稳定性高、操作连续可控、易分离回收、可重复使用、工艺简便等一系列优点。本文中,笔者总结了多孔整体柱应用于固定化酶的研究进展,探讨了不同整体柱材料和固定化酶方法对酶催化反应性能的影响。