荔枝蒂蛀虫信息素结合蛋白基因序列及表达分析

【目的】获得荔枝蒂蛀虫Conopomorpha sinensis 3个信息素结合蛋白(PBP)基因的全长序列,并分析序列和表达特征,为更好地利用性信息素防治该虫提供必要的基础。【方法】提取荔枝蒂蛀虫触角总RNA,利用转录组测序结果和RACE-PCR技术获得3个PBP基因的全长序列;对序列进行生物信息学分析,用I-TASSER在线软件建立蛋白三维模型,用TM-align软件进行同源建模,用COACH软件推测蛋白的结合位点;用荧光定量PCR方法分析这3个基因在不同龄期(幼虫和蛹)和3日龄雌雄成虫不同组织[触角、头(去除触角)、胸、腹、足和翅]中的表达谱。【结果】从荔枝蒂蛀虫触角中克隆了3个PBP基因的全长序列,分别命名为Csin PBP1,Csin PBP2和Csin PBP3(Gen Bank登录号:MF093145,MF093146和MF093147)。序列分析结果表明,这3个基因的编码蛋白具有昆虫气味结合蛋白的典型特征,并且Csin PBP1与紫色卷蛾Yponomeuta cagnagellus PBP的氨基酸序列一致性达72%,Csin PBP2与小菜蛾Plutella xylostella PBP1的氨基酸序列一致性达55%,Csin PBP3与水稻大螟Sesamia inferens PBP3的氨基酸序列一致性达39%。软件模拟分析表明,Csin PBP1,Csin PBP2和Csin PBP3蛋白的三维结构分别与家蚕Bombyx mori普通气味结合蛋白2(GOBP2)(PDB:2wc6A)、脐橙螟Amyetois transitetella PBP1(PDB:4inx A)和家蚕PBP(PDB:2p70A)相似度最高,分别预测得到10,7和8个结合位点。表达谱分析显示,3个基因均只在成虫触角中表达,在幼虫期和蛹期不表达,在成虫头(去除触角)、胸、腹、足和翅中也不表达,且在雄虫触角中的表达量分别是雌虫中表达量的1.94,28.19和32.94倍。【结论】获得荔枝蒂蛀虫3个PBP基因的全长序列,序列和表达分析结果提示这3个基因与雄虫感受性信息素有关。     

高梁叶绿体psaA基因的克隆和核苷酸序列分析

我们克隆了含高梁叶绿体psaA基因的6．7kb Ec0RI酶切片段,进行了限制酶图谱分析和核苷酸序列结构测定,所测核苷酸序列总长为3080bp,其中高梁叶绿体psaA基因序列为2253bp,编码一个含750个氨基酸残基的蛋白质,其分子量为83000Da。高梁psaA基因的核苷酸序列与玉米、水稻,菠菜的同源性分别为99．4％、96．3％和89．4％;推导出的氨基酸序列的同源性分别为99．3“、98．O％和95．7％。C₄植物与C₃植物比较,由于P 700脱辅基蛋白的第493位氮基酸性质的不同(Gly→Arg,ser),而导致了它们的乡肽在疏水性图谱上的差异。     

大鼠小肠5-HT免疫活性内分泌细胞的角蛋白免疫细胞化学定位

本文作者用免疫组化双色反应,对大鼠小肠5-HT免疫活性内分泌细胞进行表皮角蛋白免疫细胞化学定位。结果表明,5-HT免疫活性内分泌细胞含有表皮角蛋白阳性颗粒,提示胃肠的正常内分泌细胞和其它粘膜上皮细胞一样含有角蛋白中间丝,它们可能也和其它粘膜上皮细胸一样共同起源于内胚层。     

长荡湖大型底栖动物群落结构及水质生物学评价

2011年6月—2012年5月,对长荡湖大型底栖动物群落进行了逐月调查,并利用生物指数对水质进行生物学评价。结果表明:共采集到底栖动物28种,其中摇蚊科幼虫10种,水栖寡毛类7种,软体动物5种,其他类6种;铜锈环棱螺(Bellamya aeruginosa)、霍甫水丝蚓(Limnodrilus hoffmeisteri)、中国长足摇蚊(Tanypus chinensis)、多巴小摇蚊(Microchironomus tabarui)、苏氏尾鳃蚓(Branchiura sowerbyi)和半折摇蚊(Chironomus semireductus)是现阶段长荡湖底栖动物的优势种;长荡湖10个监测点底栖动物年均密度为769 ind·m-2,年均生物量为74.89 g·m-2,并呈现出明显的空间变化;生物量较密度空间差异更大,生物量高值主要出现在湖泊四周的监测点,而在湖心开阔水域较低;Wright指数、Goodnight-Whitley指数、BPI指数及Shannon指数表明长荡湖水体处于轻-中度污染状态。     

浅谈几种毒蛇咬伤的临床表现和抢救原则

世界已知毒蛇约500余种,分布在我国的毒蛇目前已知有80多种,但对人体危害较大、经常造成蛇伤的毒蛇主要有10余种。按照蛇毒成分不同可分为神经毒类、血循毒类和混合毒类3种。当毒蛇咬伤人后,由毒腺分泌的蛇毒经排毒导管、毒牙及伤口沿淋巴及血液循环扩散至全身,     

结直肠癌CD133的表达与细胞周期蛋白水平及血清癌胚抗原含量的关系

目的探讨结直肠癌肿瘤干细胞标志物CD133分子的表达与细胞周期蛋白表达有无关系,分析肿瘤CD133分子的表达变化是否影响血清肿瘤标志物癌胚抗原的水平。方法应用流式细胞术检测41例结直肠癌肿瘤组织的CD133,cyclin D1,cyclin E,cyclin A和cyclin B1的表达水平,血清癌胚抗原的含量常规由检验科用放免法检测,数据采集自检验报告单。结果 41例结直肠癌肿瘤组织CD133分子的表达率是0.3%-47.07%,cyclin D1为2.94%-36.93%,cyclin E为0.49%-9.28%,cyclin A为0.42%-22.33%,cyclin B1为1.24%-22.96%。相关分析表明,CD133的表达水平与cyclinD1相关r=0.405 P=0.047,与其它几种细胞周期蛋白的表达水平无关,均为P0.05。CD133的表达水平和血清癌胚抗原的表达呈正相关r=0.601P=0.009。结论结直肠癌CD133分子的表达与细胞周期蛋白cyclin D1的表达正相关,两者一定程度上共同反映了癌细胞的增殖状态。CD133高表达的结直肠癌,常伴有患者血清癌胚抗原的高表达,两者密切相关。     

CD11b/DNA双参数流式细胞术检测HL-60细胞分化的细胞周期

目的采用双参数流式细胞术研究全反式维甲酸(alltransretinoidacid,ATRA)诱导人类急性早幼粒白血病细胞HL-60细胞分化的细胞周期。方法HL-60细胞经分化诱导剂ATRA(终浓度为1μmol/L)诱导不同时间点后,利用CD11b/DNA双参数流式细胞术同时检测分化细胞表面抗原CD11b的表达及分化细胞DNA含量。结果HL-60细胞经ATRA诱导后,细胞表面分化抗原CD11b表达明显升高,细胞阻滞于G0/G1期,且CD11b阳性细胞主要位于G0/G1期。结论CD11b/DNA双参数流式细胞术能简便,快速,直观地检测细胞分化的细胞周期。     

一组Cr(Ⅵ)还原菌群YEM001的培养优化

铬（Cr）是一种广泛应用于钢铁、鞣革、印染等领域的重要工业原料，由此而带来的Cr(Ⅵ)污染已成为我国主要重金属污染之一。YEM001是一组能有效还原污泥和垃圾渗滤液中的Cr(Ⅵ)，实现Cr(Ⅵ)污染生物修复的微生物菌群。然而菌群的扩大培养成为YEM001进一步应用的障碍。以优化菌群YEM001培养工艺条件为目标，通过单因素实验、正交实验对YEM001菌群的培养基和发酵条件进行了优化。结果显示以淀粉为碳源，YEM001能实现快速稳定的生长。优化后的YEM001菌群培养基为淀粉10 g/L，氯化铵3 g/L，硫酸镁2 g/L，酵母浸粉1 g/L。通过对搅拌转速、pH、通气等的调控，获得最佳发酵工艺条件为28 ℃、pH值 7.5、不通入空气、搅拌转速50 r/min。在该条件下，YEM001的培养液OD₆₀₀值可达1.91，且在60 h内能够完全还原100 mg/L Cr(Ⅵ)。通过成本分析，优化后每100 L培养基价格降低了38.11元，较优化前成本降低51.85%。     

中西医结合治疗蝮蛇咬伤合并呼吸衰竭21例护理观察

目的 探讨蝮蛇咬伤合并呼吸衰竭的有效护理措施,以提高患者的治愈率.方法 对我院收治的21例蝮蛇咬伤合并呼吸衰竭的患者给予规范外治方法和中西医辨证施治,同时及时处理呼吸衰竭,加强气道管理,并进行相应的护理对策.结果 21例患者中,治愈18例,致残1例,死亡2例,有效率90.5%.结论 合理治疗及有效的护理可促进蝮蛇咬伤合并呼吸衰竭患者的康复,降低死亡率.