四环素诱导可控表达细胞周期素B1单克隆的筛选

目的筛选四环素诱导细胞周期素B1（CyclinB1）可控表达的293单克隆细胞株（tetracycline-regulated expression 293 cells,T-REx^TM-293）。方法从人胎肝cDNA文库中PCR带有酶切位点的CyclinB1基因全长,将其酶切后插入到pcDNA4／TO／myc-HisB载体中。然后用测序正确的质粒转染T-RExTM-293细胞,加杀稻瘟菌素（Blasticidin）和腐草霉素（Zeocirt）双药物筛选两周后,传96孔板,等单个细胞扩增出单克隆。然后用Western印迹和流式细胞仪检测CyclinB1的诱导表达情况。结果构建好的pcDNA4／TO／myc-HisB—CyclinB1载体,经鉴定序列正确。筛选出的单克隆细胞株,在未加四环素时没有外源性的CyclinB1表达,在加入四环素后,3h就有表达,随时间的增加,CyclinB1表达量也增加,48h最多。结论筛选出的T-REx^TM-293单克隆细胞株能可控表达CyclinB1。     

长江岸线宜昌江段五种不同类型水样对稀有鲫胚胎的毒性

为了检测和评估长江岸线宜昌江段五种不同类型水样的生物毒性,研究于2019年3月在宜昌江段采集五种典型水样,采用稀有鲫胚胎进行了暴露试验。经检测发现3#水样(工业生产污水)、4#水样(生活污水)常规污染物(氨氮、化学需氧量、高锰酸盐指数)等指数超标。胚胎毒性试验结果显示3#和4#水样的生物毒性最大,其畸形率和死亡率等指标均显著高于其他组(P<0.05)。2#水样(长江白洋港江段水样)对稀有鲫胚胎发育无显著影响;其中3#和4#两组水样处理的胚胎出现诸如脊椎弯曲、心率下降、死亡率上升、孵化率下降和发育迟缓等发育异常现象;同时, 4#水样处理的胚胎还出现大量心包水肿现象。研究表明氨氮含量等常规水质指标超标会对稀有鲫胚胎产生较大毒性效应。研究可为长江岸线宜昌江段水体的综合评价及后续治理提供依据。     

拟南芥NDR1基因介导的广谱抗病性研究进展

抗病基因的研究是抗病育种及防治植物病害的基础。拟南芥NDR1(Non-race-specific disease resistance 1)基因,编码一个质膜定位蛋白,在R基因介导的抗性中具有重要作用。NDR1能与CC-NB-LRR(卷曲螺旋核酸结合或富亮氨酸重复)类抗病蛋白相互作用。以拟南芥抗病基因NDR1及其蛋白结构的研究进展为基础,综述了NDR1的广谱抗病性和抗病分子机理。     

基于细胞焦亡PCR芯片分析负重跑训练对增龄大鼠骨骼肌丢失的影响

目的 采用PCR芯片研究细胞焦亡在32周负重跑训练对增龄大鼠趾长伸肌(EDL)丢失进程中的作用。方法 90只SD大鼠分为3组：对照组(C0组，n=10)、增龄不运动组(C组，n=40)和增龄负重跑组(R组，n=40)(着负重袋的跑台训练),C组和R组分别干预8、16、24和32周后取材，即分为C8组、C16组、C24组、C32组、R8组、R16组、R24组和R32组(n=10)。干预后测量大鼠体重和肌肉总量；取EDL称量湿重，HE染色观察肌纤维形态，测试横截面积(FCSA);Western Blot测试细胞焦亡关键蛋白NF-κB、ASC、GSDMD和Caspase1的表达；PCR芯片筛选EDL中的细胞焦亡差异表达基因，qPCR验证芯片结果准确性。结果 (1)C组大鼠体重持续增加，R组大鼠体重相对平稳；C32组肌肉总量及其百分比显著低于C0组；R8组、R24组和R32组肌肉总量百分比显著高于其相应的C组(P<0.05)。(2)R24组和R32组EDL湿重和FCSA分别显著高于C24组和C32组；C组各组FCSA均低于C0组(P<0.05)。(3)C16组和C24组NF-κB、...     

R.j.191/pJG137G的基因表达与应用

R·j·191/pJG137G为nif/osm基因工程生物。DNA分子杂交结果证明它的nifDNA来自亲本R·j·USDA191,osmDNA来自pJG137;它在无氮加盐的条件下能生长,在海水加四环素条件下也能繁殖,並且迅速(1.6mg干物质/ml/29小时)。蛋白质产量高达59.7mg/ml,氨基酸组分完全。     

基于3DLP指数的景观格局演变及预测分析

采用1987、1999、2009和2017年四期Landsat TM/OLI数据,结合GIS和RS技术,从类型和景观层面计算安化县四个年度的3DLP指数,分析安化县近30年来景观格局的动态演变并利用CA-Markov模型对2025年景观格局演变进行模拟和预测,为推动该县今后生态环境的进一步恢复和改善提供指导。结果表明:(1)林地是安化县的优势景观,对安化县景观的主控作用强。(2)从不同景观类型来看,1987—2017年期间安化县各景观破碎化情况均有所缓解,其中建设用地、林地面积增加,草地、水域、农地面积减少;林地、水域边界形状趋于简单化,建设用地、草地边界形状趋向复杂化,农地边界形状受人类活动影响较小。(3)从整体景观来看,安化县景观格局的演变主要是受到人为因素的影响,1999年整体边界形状变得更为规则,同时破碎化程度、景观异构性以及多样性有所提高。1999—2017年各类景观类型的面积比例差异增大,破碎化程度以及景观异质程度降低,优势景观类型份额增加。(4)根据预测结果来看,安化县整体趋向均衡化发展,边界形状趋向规则化,景观异质性程度降低,各类景观类型的面积比例差异减小,林地出现被其他景观蚕食分割的趋势,因此需要进一步提高对林地的重视和保护,限制其他景观类型对林地的干扰。     

国家公园全民公益性评估指标体系:以青藏高原国家公园群为例

全民公益性是我国国家公园建设需坚持的三大理念之一,但受其内涵不明确且缺乏有效考核评价机制的制约,尚未受到相关方的充分重视。建立一套能准确反映其内涵的指标体系,用于评估国家公园全民公益性理念执行成效、引导相关方采取针对性措施提高国家公园的全民公益性具有重要意义。本研究在梳理国外主要国家公园全民公益性的内涵和具体体现,分析我国国家公园建设的时代背景和独有特征的基础上,剖析了我国国家公园全民公益性的内涵和逻辑构成。在此基础上,通过深入实地考察,建立了青藏高原国家公园群全民公益性评估备选指标体系,利用Delphi法,以发放电子问卷的形式对本领域14名知名专家开展两轮咨询,从拟定的全民公益性评估备选指标体系中筛选指标,结合问卷咨询结果建立了包括管理者、社区居民、相关企业和社会组织、游客和公众5个方面,涉及5个一级指标、17个二级指标和35个三级指标的青藏高原国家公园群全民公益性评估指标体系。指标体系囊括了国家公园体制机制、社区民生福祉、企业和社会组织参与、访客体验、公众参与等方面的多个内容。针对青藏高原的实际情况,还设置了医疗保障体系、应急救援体系等指标,并考虑在实际评估中增加相关指标权重,更加...     

从杜曼斯基的束缚水测定法谈水在植物体内的状态

植物组织内的水分,通常区分为束缚水和自由水两个组成部分。束缚水比较牢固地附着在细胞胶体颗粒上,它的数量表示细胞胶体的亲水程度,过去的研究早就证明了它和植物的抗性有关。自由水的数量则制约着植物代谢过程(光合作用、蒸腾作用、生长过程等)的强度。所以晚近的生理研究对这两种水分的存在状态给予了相当的注意。束缚水的测定法颇多,如在高脱纳(Gortner)的书中列举了13种之多。主要的方法是:利     

大口黑鲈微卫星多重PCR体系及3个群体的遗传分析

为开展大口黑鲈(Micropterus salmoides)种质评估和遗传分析提供便捷的研究手段,试验筛选了扩增效果好、具有多态性的18个微卫星位点,构建了6组3重PCR体系。随后将多重PCR体系应用于大口黑鲈3个群体(美国群体USA、“优鲈1号”YLO和杂交子代HYB)的遗传分析。结果显示,各位点的等位基因数(N_a)、有效等位基因数(N_e)、观测杂合度(H_o)、期望杂合度(H_e)和多态性信息含量(PIC)分别介于3—14、1.622—5.841、0.333—0.806、0.385—0.833和0.361—0.810,其均值分别为7.722、3.056、0.577、0.626和0.579。剔除2个偏离Hardy-Weinberg平衡位点的分析显示,YLO的遗传多样性水平最低,HYB的平均观测杂合度最高(H_o=0.743),其余多态性指标均在USA中呈现最高值。USA与YLO间的Nei’s遗传距离最远(0.362),HYB与USA和YLO间的Nei’s遗传距离分别为0.112和0...