单细胞凝胶电泳联合原子力显微镜观测UVB诱导的细胞DNA损伤模式变化

目的：检测UVB诱导的真核细胞DNA损伤。方法：采用单细胞凝胶电泳与原子力显微镜。结果：不同照射剂量的UVB引起的真核细胞DNA损伤模式不同。在0～20J／m2照射剂量范围内DNA无损伤;在20--360J／m2照射剂量范围内DNA损伤程度加快;当照射剂量超过360J／m2时DNA损伤速度减慢,实验组之间无显著性差异,出现“平台”。原子力显微镜的观察结果表明随着UVB照射剂量的增加,DNA结构的变化经历了断裂、交联与断裂并存的损伤增强趋势。当照射能量达到280J／m2时细胞DNA大都形成断片,并相互交联在一起。这一结果表明彗星电泳检测到的UVB照射剂量达到一定剂量后,DNA损伤出现”平台”的原因可能是此时DNA发生了链内或链间交联。结论：不同照射剂量的UVB造成的细胞DNA损伤模式不同;原子力显微镜是一种比较直观的观测DNA损伤的方法。借助原子力显微镜我们可以深入了解单细胞凝胶电泳检测的原理,为DNA损伤检测提供更优良的检测手段。     

末端脱氧核苷酸转移酶在生物传感及核酸合成领域的应用*

末端脱氧核苷酸转移酶(terminal deoxynucleotidyl transferase, TdT)是聚合酶X家族中的一员,与典型的DNA聚合酶不同,TdT以恒温的无模板依赖的方式催化脱氧核糖核苷三磷酸(dNTP)聚合到寡核苷酸的3'羟基端来合成DNA。并且TdT对底物的耐受性高具有聚合修饰型dNTP的能力,如荧光修饰的dNTP、生物素修饰的dNTP,甚至人工碱基均可作为其良好底物。TdT的这些生化特性使其被广泛的应用在生物传感和核酸合成领域中,促进了许多基于核酸的工具和方法的发展,并为酶促从头合成DNA技术的发展奠定基础。介绍了TdT的性质,重点总结了它在其介导的生物检测技术、核酸的修饰技术以及酶促合成DNA技术三个方面的核心作用、目前面临的挑战以及未来研究的方向,以期促进TdT在生物传感器和核酸合成中的进一步应用。     

铁蛋白的生物工程应用

铁蛋白是一种普遍存在于生物体内的储铁蛋白,具有铁离子代谢、抗氧化胁迫及消除其他过量金属离子毒害作用的功能。随着对铁蛋白结构和生化功能认识的深入,铁蛋白作为一个含有四氧化三铁核心的特殊蛋白复合体,被广泛应用于生物医学、纳米材料、生物分子成像等各种生物工程领域。该综述针对已知的主要铁蛋白分子,论述了铁蛋白的结构及酶活性机理,基于铁蛋白的多功能分子骨架应用,以及基于铁蛋白磁性的生物分子开关等热点研究,最后对铁蛋白生物工程、生物医学领域的应用和发展进行了展望。     

超声激活血卟啉对S180细胞杀伤作用及形态学研究

利用频率为1.1 MHz及不同强度超声激活血卟啉, 对小鼠腹水型S180肿瘤细胞和诱发的在体肉瘤进行不同的实验处理. 通过光镜、电子显微镜技术、荧光标记、细胞化学等方法, 探讨超声激活血卟啉对S180细胞杀伤作用及形态学变化. 研究表明: 超声激活血卟啉对腹水型S180肿瘤细胞显微结构及表面超微结构破坏随声照强度增加而加剧; 声照后细胞显微结构、超微结构、酶活性的变化及DNA的降解丢失是癌细胞生长抑制、死亡的重要因素, 实验中发现的一定超声强度激活血卟啉可诱导癌细胞凋亡现象提示声动力疗法有促细胞死亡和诱导细胞凋亡两种模式. 通过细胞形态学变化, 以及辐照处理后细胞存在的由原发性损伤到继发性损伤直至死亡的动态变化过程, 探讨超声激活血卟啉对S180细胞杀伤作用, 以期为声动力疗法杀伤机制的研究积累资料.     

磁场对环磷酰胺杀伤人白血病细胞K562协同作用的研究初报

目的:研究不同处理时间稳恒磁场协同抗癌药物环磷酰胺对人白血病细胞K5 6 2的杀伤作用。方法:K5 6 2细胞经不同浓度的环磷酰胺和/或磁场处理12h或2 4h后,MTT法检测。数据进行统计学分析处理。结果:单纯磁场处理时,磁场对K5 6 2细胞的杀伤作用表现在2 4h(P <0 .0 1) ;环磷酰胺单纯处理K5 6 2细胞12h ,在0 .4和0 .8mg/mL浓度时对肿瘤细胞的生长没有影响(P >0 .0 5 ) ,在1.6和3.2mg/mL浓度下环磷酰胺对细胞有杀伤作用(P <0 .0 1) ;0 .4mg/mL环磷酰胺联合磁场处理K5 6 2细胞12～2 4h后,细胞活性均极显著的低于单纯环磷酰胺处理组(P <0 .0 1)。结论:9mT稳恒磁场对环磷酰胺杀伤肿瘤细胞具有一定的协同作用,磁场处理可以增加环磷酰胺的抗肿瘤效应。     

声化学激活血卟啉诱导艾氏腹水肿瘤细胞凋亡

本实验采用频率为2．0MHz，声强分别为1．0w／cm^2、1．5w／cm^2、2．0w／cm^2等不同参数，研究超声激活血卟啉对艾氏腹水肿瘤细胞的杀伤作用和诱导肿瘤细胞凋亡现象。通过扫描电镜、透射电镜以及荧光显微镜观察受损后细胞形态结构的变化，主要表现为细胞微绒毛的减少，胞膜结构和通透性的改变，细胞器的受损以及核物质的分解、丢失；同时发现处理后的肿瘤细胞有核物质凝集、趋边排列以及凋亡小体的形成等细胞凋亡特征。研究中首次发现声化学激活血卟啉在对艾氏腹水肿瘤细胞杀伤的同时，也能诱导艾氏腹水肿瘤细胞发生凋亡，提示在声动力疗法中并存着对癌细胞的直接杀伤和通过诱导癌细胞凋亡的两种抗癌途径。