用于靶向于NFAT的免疫抑制类小分子化合物筛选的细胞模型的建立

建立IL-2启动子以及NFAT-AP1增强子调控报告基因包括D2egfp或Luciferase在Jurkat细胞中瞬时表达的细胞模型。首先,利用三步连接将IL-2-promoter -255～+285处的序列插入到Pnf-Κb-D2egfp表达载体启动子上游,形成3个拷贝的前后串联的增强子序列;然后从人外周血钓取两条IL-2-promoter序列,包括-326～＋46以及-89～＋46两段基因组序列,分别替代上述重组表达载体中的TK minimal promoter, 构建所需的IL2 promoter以及NFAT-AP1 enhancer调控的报告基因表达质粒：3×NFAT-AP1-IL-2P/D2egfp和3×NFAT-AP1-TATA/D2egfp; 最后,分别将3×NFAT-AP1-IL-2P以及3×NFAT-AP1-TATA融合基因克隆到Pgl3-basic载体中,构建相应的Luciferase报告基因表达质粒。利用电转染方法将重组的报告基因表达载体瞬时转入Jurkat细胞后发现,未刺激以及PMA、离子霉素（Ionomycin）单刺激均不能激活下游报告基因的表达,只有PMA和离子霉素联合刺激才能启动D2egfp以及Luciferase的转录表达,并且5μg/Ml FK506预先作用1h能几乎完全阻断刺激剂诱导的无论是IL-2 promoter还是NFAT-AP1enhancer调控的报告基因的表达。实验结果提示,所构建的Jurkat细胞瞬时表达模型可用于靶向于NFAT信号通路的FK506类免疫抑制小分子化合物的初步筛选。     

基于物理化学性质优化的蛋白质相互作用预测研究

蛋白质相互作用预测是生物信息学研究的重要问题之一,提出了一种基于物理化学性质优化的蛋白质相互作用预测方法,与现有方法的显著不同就是,并未使用已知的氨基酸残基的物理化学性质,而是通过粒子群算法优化得到有益于相互作用预测的物理化学性质数值.对真实的数据集测试表明,优化得到的物理化学性质比现有的物理化学性质更有益于提高蛋白质相互作用的预测性能,与其它方法相比,也具有一定的优势,说明该方法是一种有效的蛋白质相互作用预测方法.     

芝麻油风味成分和营养功能研究进展

综述芝麻油的组成成分、风味物质和营养功能等研究进展,旨在促进芝麻油风味物质的深入研究,以提升芝麻种植加工的经济效益,加快芝麻油产业发展,为我国芝麻油料资源的产品开发和市场开拓提供科学依据。     

北京某高校教职工血脂异常检出率及相关知识、信念、行为调查

目的：了解北京某高校教职工的血脂异常情况,并评价该校教职工对血脂异常的相关知识、信念、行为水平。方法：采用方便抽样方法,抽取从2010年10月—2011年1月到该校医院体检的教职工共1 583人,对其进行问卷调查和血脂检测。结果：共有效调查该高校教职工1 488人,年龄17—61岁,其血脂异常检出率为44.2%,男女性检出率分别为52.9% 和34.5%,差异有无统计学意义。教职工对高脂血症相关知识得分为11.52±2.66（总分16）、信念形成得分为6.54±2.05（总分10分）,知识与信念得分有统计学上的显著相关性（r=0.293,P<0.000 1）。知识、信念与行为之间的相关性及多重线性模型分析均显示,高脂饮食摄入量、吸烟状况与知识、信念得分呈负相关（P<0.001）。结论：该北京高校教职工的血脂异常检出率较高,应加强控制。教职工相关知识得分较高,但知识的形成与信念、行为的形成尚有一定距离。     

茶园异质性栖境对狼蛛科蜘蛛群落结构的影响

茶园生态系统中蜘蛛既是重要的天敌类群, 又是改善生态系统服务的指示标志。为更好地保护与利用天敌蜘蛛进行生态防治, 对亚热带丘陵地区不同栖境茶园的狼蛛科蜘蛛进行调查, 并对其种类、年龄结构、性别比例等进行分析。结果表明：复杂栖境茶园(JZ)与简单栖境茶园(CK)间狼蛛科蜘蛛数量特征组成存在显著差异 (P＜0.001); 狼蛛科蜘蛛优势种JZ茶园有3种, CK茶园有4种; JZ茶园雌蛛、雄蛛和幼蛛个体数分别是CK茶园的4.36倍、3.63倍和7.91倍。JZ茶园狼蛛科的年龄结构、性别比例等数量特征影响较大,总个体数量发生动态显著高于CK茶园(P＜0.05)。主成分分析表明, JZ茶园明显向家福穴狼蛛(Houa jiafui)、幼豹蛛(Pardosa pusiola)和旋囊脉水狼蛛(Venonia spirocysta)等群落数量分布较多的方向偏移, 而CK茶园则向数量减少方向偏移。研究表明, 基于茶园异质性栖境管理, 采用多样性种植方式来保持生态平衡, 对保护和利用狼蛛科蜘蛛来增强害虫自然控制能力有深远意义, 还有利于成为一种可持续改善茶园生态系统的管理方式。     

慈竹中2个NAC转录因子的克隆与分析

基于慈竹转录组数据库,从慈竹笋克隆得到2个NAC基因,分别命名为BeNAC3(GenBank登录号KU821587)和BeNAC4(GenBank登录号KU821588),在生物信息学分析的基础上,研究了2个基因的组织表达模式和转录活性。TMHMM软件和系统进化分析表明,BeNAC3和BeNAC4都有一个明显的跨膜结构域,可能是膜结合蛋白,且两者分别与NAC2亚家族和ANAC011亚家族有较高相似性。根据BeNAC3在笋、未展开叶、展开叶和茎中的相对表达量,及其在进化树中与NAC2亚家族近似的亲缘关系,推测其可能与激素合成调控及开花有关;而BeNAC4基因在成熟组织中表达量明显高于幼嫩的笋和未展开叶,表明其可能参与慈竹的次生生长发育调控。酵母单杂活性实验分析表明,BeNAC3和BeNAC4都能够激活β-半乳糖苷酶基因(lacZ)的表达,表明这2个基因均具有一定的转录活性。该研究结果为今后获得转基因慈竹植株功能的验证奠定了一定的基础。     

抑制免疫复合物延缓脓毒血症

在小鼠体内 ,中和大量因炎症或创伤产生的炎症蛋白 ,如肿瘤坏死因子 α (TNF α)、高移动群盒子 1(high mobilitygroupbox 1,HMGB1)能翻转严重脓毒血症的进程。这一现象由神经外科专家Tracey领导的研究组发现 ,他们认为 ,死于脓毒血症休克的病人 ,其炎症是由TNF α主导的 ,而     

两种小达氏涡虫的阴茎发育与分类性状关系

小达氏涡虫属个体的骨质阴茎足物种鉴定的重要依据.本实验观察了中国小达氏涡虫(Microdalyellia sinensis)与湖南小达氏涡虫(M.hunanensis)阴茎的形态形成及发育.结果表明:(1)阴茎末端各分支的形态形成是一次性成型,终身不变;(2)两种涡虫在发育的第12 d都完成阴茎的骨质化;(3)阴茎的基柄形态随个体发育而增长.研究证实,小达氏涡虫属阴茎末端分支结构是稳定的分类性状,可以作为重要的分类依据.     

福尔马林灭活柱状黄杆菌对草鱼免疫相关基因表达的影响

在本研究中,将福尔马林灭活的柱状黄杆菌菌苗（FKG4）经腹腔注射免疫草鱼,以注射灭菌PBS作对照,分别在免疫后1、7、15和28d,提取受免鱼和对照鱼肝脏、脾脏和头肾3种组织中的总RNA并反转录成cDNA,利用Real-time PCR方法对不同组织中C-反应蛋白（CRP）、主要组织相容性复合体I（MHC Ⅰ）、肿瘤坏死因子（TNFα）、白介素1（IL-1β）、白介素8（IL-8）、Ⅰ型干扰素（IFN Ⅰ）等6种免疫相关基因的表达进行定量分析。结果发现CRP在受免鱼肝脏中的表达于免疫后1、7d显著性高于对照鱼,而在脾脏与头肾中的表达未出现显著性差异;MHC Ⅰ在受免鱼3种组织中的表达于免疫后1、7、15d都显著性高于对照鱼;TNFα在3种组织中的表达水平都较低,但都于免疫后1、7天显著性高于对照鱼;IL-1β在3种组织中的表达于免疫后1d都显著性高于对照鱼,但只有在头肾中的表达在免疫后7d时仍保持显著性差异;IL-8在3种组织中的表达都只是于免疫后1d显著性高于对照鱼;TNFα、IL-1β及IL-8等三种炎症因子的基因表达在免疫后15d都恢复到对照鱼的水平;而IFN Ⅰ在3种组织中的表达与对照组之间未出现显著性差异。结果表明,FKG4注射免疫可以显著提高草鱼3种组织中与抗菌免疫相关的基因表达,从而增强鱼体抵抗细菌性病原的免疫力。     

人MGMT基因Cdna的克隆表达及表达蛋白修复功能的鉴定

克隆了Hela细胞O6 甲基鸟嘌呤 DNA 甲基转移酶 (MGMT)基因的cDNA序列 ,该序列与国外发表的cDNA完全一致。将此cDNA插入原核表达载体pET 2 1a后转化大肠杆菌BL2 1(DE3)获得表达的重组菌株pET 2 1a MGMT E .coliBL2 1(DE3) ,经IPTG诱导后产生分子量为 2 4kD的蛋白质。烷化类诱变剂致死突变实验表明 ,MGMT蛋白的表达能修复受体菌DNA分子因烷化类诱变剂导致的突变。