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81.
对大鼠口服八珍汤后的尿液样品预处理方法进行多样性考察,以减少尿液样品中内源性杂质干扰,富集来源于八珍汤的化学成分,为八珍汤体内代谢产物的多样性分析奠定基础.分别采用水饱和的正丁醇、乙酸乙酯、SPE小柱固相萃取法对空白尿液和含药尿液进行处理,然后使用高效液相对各样品进行成分分析,通过对比经过各方法优化的尿液色谱图,确定含八珍汤的尿液样品的最佳处理方法,并据此进一步考察确定尿液的最佳收集时间段.通过分析各液相色谱图发现,在大鼠口服八珍汤后4~8h时间段内,采用SPE小柱固相萃取法纯化的尿液样品出峰效果最好,数目最多.从而确定了含八珍汤的大鼠尿液的最优纯化方法为SPE小柱固相萃取法,最佳收集时间段为4~8h. 相似文献
82.
人血清白蛋白和人干扰素α2b的融合蛋白在毕赤酵母中的表达 总被引:12,自引:0,他引:12
为了延长IFNα2b在血浆中的半衰期,构建了编码HSA和hIFNα2b的融合基因并在毕赤酵母中获得高效表达,工程菌经5L发酵罐培养后获得的含融合蛋白的培养液经超滤浓缩、蓝色葡聚糖凝胶层析、疏水柱层析以及阴离子柱层析,融合蛋白的纯度达到95%以上。该融合蛋白能与干扰素抗体和人血清白蛋白抗体结合,并表现出与重组干扰素α2b相似的抗病毒活性。以猕猴为动物模型,分别从静脉和皮下单剂量给药,给药浓度为90μg/kg时,在336h后血浆中仍可检测到融合蛋白。其静脉注射的血浆半衰期为101h,皮下注射的半衰期为68.2h。皮下注射的生物利用度为67.9%。IFNα2b与HSA融合后,明显的延长了血浆半衰期,显现了其良好的临床应用前景。 相似文献
83.
85.
米曲霉来源的S1 核酸酶具有降解单链DNA或RNA的作用。在适当的条件下 ,该酶能将不同的环形DNA分子从超螺旋转变成开环和线形结构 ,对质粒pUC19的实验证明 ,S1 核酸酶的这种转变作用与加入的酶量呈正相关。在 2 5 μL总反应体积中 ,按 10 0ngDNA加入 5u至 17u的S1 核酸酶 ,能获得较高比例的线形DNA。由于微环DNA分子太小 ,单酶切位点的出现率较低 ,很难用常规方式进行克隆 ,以S1 核酸酶进行线形化是微环DNA克隆的途径。pC3是已知最小的真核生物线粒体DNA类质粒 (5 37bp) ,经S1 核酸酶线形化后 ,成功地克隆到pMD18 T载体上。 相似文献
86.
报道关于一系列pNK289衍生质粒分离稳定性研究结果。这些起源相同的质粒在Baci-llus.subtilisASI.1176中的分离稳定性存在差异,这种差异与质粒的大小和复制方式无关,而与质粒的拷贝数有一定的关系。由于不稳定质粒pNK219在B.Subtilis BD224宿主中能稳定遗传,所以推测宿主的遗传背景可能影响质粒的分离稳定性。这些研究不仅为进一步寻找与PNK289衍生质粒稳定性相关的基因奠定了基础,而且为在芽孢杆中构建稳定的重组质粒提供了理论依据。 相似文献
87.
人白细胞介素12在昆虫细胞中的表达 总被引:2,自引:0,他引:2
人白细胞介素12(hIL-12)是一种异源二聚体细胞因子,由p40和p35两个亚基通过二硫键连接而成。首先构建了两个表达载体pVL1392-hp40和pVL1393-hp35,并分别与线性化多角体病毒基因组DNA共转染昆虫细胞株Sf9,用目视法筛选出重组病毒AcNPV-hp40和AcNPV-hp35。利用PHA激活的人淋巴细胞增殖试验,在条件培液中检测到重组hIL-12的生物活性,表达量约为1.5~2μg/106细胞。经实时BIA和Northern blot分析,hp35和hp40两亚基在昆虫细胞中获得表达。非还原条件下的Westernblot结果显示,重组hIL-12的表观分子量为76kDa,hp40同源二聚体的表观分子量为92kDa。重组ph40具有明显抑制hIL-12生物活性的作用。 相似文献
88.
微生物脂肪酶在正庚烷中合成短链芳香酯的研究 总被引:16,自引:2,他引:14
用微生物脂肪酶在溶剂相中合成短链芳香酯的研究表明:脂肪酶在正庚烷中催化合成芳香酯转化率比水相中有明显的优势。在10个不同来源的商品脂肪酶中,选择了其中对己酸乙酯转化率在85%以上来自Mucor miehei,Candida rugosa和Porcine pancreas的脂肪酶对7个短链脂肪酸酯进行合成,其中Mucor miehei脂肪酶对这几个芳香酯48 h合成转化率均在90%以上,乙酸乙酯21.28g-1.丙酸乙酯19.6gL-1,丁酸乙酯26.61gL-1,戊酸乙酯24.95gL-1,己酸乙酯产量34.60gL-1,丁酸异戊酯30.76gL-1,乙酸异戊酯12.76gL-1。同时.Mucor miehei脂肪酶在正庚烷批式反应中稳定性也较好,己酸乙酯半衰期为120h,最少的乙酸乙酯也在140h。并且还发现脂肪酶在正庚烷中分解酶活降低很多,但对其酯合成转化率没有直接的影响。 相似文献
89.
90.
嗜盐小盒菌属新种的鉴定 总被引:7,自引:2,他引:5
从新疆盐湖分离纯化到3株多形态嗜盐菌(编号为A_5,B_ 2和B-B_2).以《伯杰氏系统细菌学鉴定手册》第3卷(1989年)为主要依据,根据极性脂分析,这3株菌可归入嗜盐小盒菌属(Haloarcula).又根据细胞形态特征和生理生化特性,这3株菌不同于该属中现在正式承认的两个种而成为一独立的类群,建议为嗜盐小盒菌属中的一个新种,命名为艾丁嗜盐小盒菌(Haloarcula aidinensis sp.nov.).以A_5菌株作为模式株. 相似文献