天花粉胰蛋白酶抑制剂基因的合成与克隆

天花粉胰蛋白酶抑制剂是从中药天花粉中分离出来的一种新的胰蛋白酶抑制剂,其结构最近被测定为含有三对二硫键的27肽,它也是目前发现的最小的多肽类蛋白酶抑制剂。本文报导了天花粉胰蛋白酶抑制剂基因的合成及克隆。设计的合成基因采用了大肠杆菌偏爱的密码子,全长为108个碱基对,它包括了起始密码子ATG,终止密码子TAG和两端的HindⅢ和BamH Ⅰ的识别顺序。整个基因的合成分为两步,首先用化学方法合成四个DNA片段(F1,38mer;F2,30mer;F3,30mer和F4A,46mer),再经连接酶连接成为两个3′端彼此互补的DNA片段(F1+F2,68mer和F3+F4,76mer),最后从两个互为引物的3′端用Klenow酶聚合补齐得到双链基因。同时,用在基因3′端有两个碱基改变的F4B代替F4A,使基因的终止密码子(TAG)变为甲硫氨酸密码子(ATG),并使基因的阅读框架与质粒pUC19中的LaeZ基因相一致,从而实现该基因与LaeZ基因的融合表达。合成基因经DNA序列分析证明其结构正确。     

四川螯齿螨新种(真螨目:列螨科)

螯齿螨属在四川记载不多,仅知在家鼠类Rattus spp.体上较普遍地存在与氏螯齿螨Odontacarus yosanoi(Fukuzumi et Obata,1953)。1963年在四川省西部海拔较高的地区采到一只本属的螨种,鉴定为新种,称四川螯齿螨。四川螯齿螨Odontacarus (O.)sichuanensis Zhou, Wen,Wang et Zhang, sp. n. 标本材料:正模,幼虫,宿主鼠(“rat”)(未定种),寄生部位耳窝,采自四川省巴     

偃麦草幼穗培养和植株再生

植物名称:偃麦草(Elytrigia repens)。材料类别幼穗切段。培养条件:以N_6为基本培养基。诱导愈伤组     

磁化水对小鼠的生理生化效应

近年来,国内外关于磁场对动植物生物学效应研究的报道日渐增多。如用磁场处理大白鼠后,发现其肠上皮细胞中的核酸含量无明显改变。而用磁化水处理农作物种子和浇灌番茄都发现有显著地生理生化效应。磁化水     

肝癌高发区霉变粮食致突变性的研究——SCE实验

从肝癌高发的扶绥县主粮中分离的常见污染真菌25株,分别接种于玉米-大米培养基培养,其培养物的甲醇-氯仿提取液经SCE试验,结果有10株为阳性。提示霉变粮食中存在着使人的体细胞突变的物质,这对肝癌的发生可能超重要作用。防止粮食霉变,不吃发霉的粮食可能会降低肝癌发病率。     

家蚕核型多角体病毒及核衣壳的纯化和其结构蛋白的凝胶电泳分析

 用差速离心和蔗糖密度梯度离心提纯了家蚕核型多角体病毒及其核衣壳,并用SDS聚丙烯酰胺凝胶(均一胶和梯度胶)电泳分析了它们的结构蛋白。测量使用游标卡尺,计算使用微型计算机。凝胶用很染色方法染色。 结果表明,家蚕核型多角体病毒长381.2±17.81纳米,直径88.86±9.605纳米;核衣壳长328.9±5.917纳米,直径41.36±1.167纳米。两种凝胶电泳所得数据显示病毒粒子至少含有20组分子量不同的结构多肽,含量较多的是P31、P40、P28和P20。P45和一些小分子多肽看来主要存于囊膜上。P31的分子量与多角体蛋白相同,我们的实验表明它可能是病毒粒子和核衣壳的结构组分。     

PCR/16sRNA联合核苷酸测序法检测化脓性脑膜炎病原菌的临床价值

目的:探讨PCR/16sRNA联合核苷酸测序法在化脓性脑膜炎病原菌检测中的临床诊断价值。方法:选择2016年4月至2017年2月上海儿童医学中心临床考虑中枢感染的43例化脓性脑膜炎患儿的脑脊液标本,所有患儿标本同时进行培养,并行PCR/16sRNA联合核苷酸测序法检测,记录检测结果,并统计检测方法的灵敏度和特异度,以脑脊液培养检测结果为金标准,对比脑脊液培养和PCR/16sRNA联合核苷酸测序法的灵敏度和特异度。结果:脑脊液培养的灵敏度为21.7%,特异度为100.0%;PCR/16sRNA联合核苷酸测序的灵敏度为69.6%,特异度为95.0%;两者的灵敏度比较差异具统计学意义(P0.05),而两者特异性比较差异无统计学意义(P0.05)。PCR/16sRNA联合核苷酸测序可检出脑脊液培养阴性的病原体。结论:PCR/16sRNA联合核苷酸测序具有较高的灵敏度,可检出脑脊液培养阴性的病原体,且受抗菌药物影响小,可为临床早期提供化脓性脑膜炎的病原学依据,降低致死率及致残率。     

噬菌体显示法克隆RNA结合蛋白cDNA——表达文库的构建

试图用噬菌体显示法(phage display)克隆编码与人白细胞介素6核转录因子的3′非翻译区(NF-IL6 3′UTR)特异结合的蛋白的cDNA.构建了回复系RR细胞的cDNA的噬粒(phagemid)表达文库,并设法除去了cDNA的大部分终止密码子.鉴定表明,该文库中含有各种大小的cDNA插入片段,并能够表达外源cDNA,为用噬菌体显示法克隆RNA结合蛋白基因或cDNA做好了准备.     

沙蚕毒素的等温加湿超临界CO_2-萃取法研究

本文研究了用等温加湿超临界ＣＯ２从海洋蠕虫状动物沙蚕体腔细胞中,提取沙蚕毒素的萃取条件（温度、压力、时间）对萃取过程的影响。探讨了等温加湿超临界ＣＯ２萃取法与传统提取方法比较的最佳选择分离方法。