肿瘤血管生成调节因子的研究进展

血管生成促进因子和血管生成抑制因子的平衡控制着肿瘤新生血管的形成。当促进因子的作用强于抑制因子时,便会引起肿瘤血管的生长。因此,了解血管生成调节因子的特点及其作用机制是一项非常重要的研究任务,针对肿瘤血管的抗血管新生治疗有着重要的理论意义和临床实用价值。这为肿瘤的诊断、分期、治疗和预后提供了新的参数指标,为寻找有效的治疗靶点提供了有利的依据。该文就有关的重要血管生成调节因子作一综述。     

hsRAGE-IgG Fc融合蛋白的表达及其生物学活性

将编码人可溶性晚期糖基化终产物受体-免疫球蛋白G Fc段(hsRAGE-IgG Fc)融合蛋白的DNA片段克隆到大肠杆菌表达载体pET-20b中,构建重组表达质粒,转化大肠杆菌Rosetta(DE3)并表达。SDS-PAGE分析表明其表达形式为包涵体,相对分子质量约为66kDa,表达量占菌体总蛋白的38.4%。经复性后,获得纯度为96.6%的融合蛋白,得率约为29.5mg/L。经Western印迹法鉴定,该融合蛋白可与sRAGE抗体产生阳性反应。同时,hsRAGE-IgG Fc融合蛋白可以显著抑制晚期糖基化终产物(AGE)引起的ECV-304细胞NF-κB p65表达的上调,其活性与hsRAGE相似。     

球孢白僵菌单孢子分离株在继代培养过程中菌落局变的遗传分析

研究了球孢白僵菌Beauveria bassiana单孢株继代过程中的菌落局变现象,并通过AFLP分析了角变子与原菌株间在分子水平上的差异。结果表明,野生型出发菌株Bb13的单孢分离株13S5和13S8在继代培养过程中均发生生长速率加快和产孢量下降现象。13S5在前5代,13S8在前6代产孢量有所下降但不显著,至第10代时产孢量比第1代分别下降了81.7%和69.0%。菌株角变现象在继代培养5-6代后表现明显,而13S8角变子出现的频率更高。AFLP指纹图谱分析表明,用20个引物组扩增出的98个位点中,两个角变子与野生型菌株间有12条差异条带,变异率达12.2%。由此证明单孢子分离株在继代培养中发生菌落局变后遗传物质已产生了变异。     

空洞型肺结核组织样本耐药菌及相关基因检测的临床研究

目的:比较分析空洞型肺结*核组织样本与痰样本结核分枝杆菌培养的阳性率及检测的一致性,并基于rpoB基因及KatG基因突变检测在诊断耐多药结核分枝杆菌中的重要作用,探讨直接应用肺结核组织样本进行结核分枝杆菌耐药性检测的临床意义.方法:对肺结核实施肺部手术患者,在术前和术后分别进行痰及手术切除组织样本利用BacT ALERT 3D快速培养系统进行分枝杆菌培养,对培养阳性者进行菌种鉴定,对结核分枝杆菌分离株应用绝对浓度法进行异烟肼(H)、利福平(R)药物敏感性测定,比较分析二者的一致性;同时应用特异性引物对手术切除组织样本直接进行分枝杆菌rpoB、KatG基因扩增,并与其培养结果进行比较.结果:62例进入分析的病例中,术前痰培养阳性22例,阳性率35.5%(22/62),药敏试验耐药18例,耐异烟肼16例,耐利福平13例.二者均耐药12例,术中所取结核组织培养阳性34例,阳性率55%(34/62),耐药30例,耐H26例,耐R20例,二者均耐药17例,术中所取结核组织耐药基因检测与INH耐药性相关的KatG基因突变表现有22例,与RFP的耐药性相关的rpoB基因突变18例.二者同时有突变表现的16例.所有培养为结核敏感菌的组织检测中,无上述二基因突变表现.在相关的rpoB基因突变18例病例中有16例同时表现出KatG基因突(89%,16/18).结论:厚壁空洞肺结核患者肺部手术切除组织样本病原学检测与痰样本间具有较好的一致性,且结核菌培养的阳性率明显高于普通痰培养.同时可直接应用组织样本进行结核分枝杆菌rpoB基因、KatG基因检测,可更加及时、准确地用于指导临床术后抗结核的药物治疗.     

杭州地区婴儿麻疹流行特征与疫苗接种史的相关性分析

本文旨在探讨当前我国麻疹疫苗接种程序下的婴儿麻疹流行特征,为改进麻疹疫苗接种策略提供科学依据。利用麻疹监测系统,对杭州市2004～2007年婴儿麻疹发病的分布和疫苗免疫状况进行分析,发现婴儿麻疹发病率无明显城乡差异,发病季节主要集中在3～5月,发病年龄主要集中在5～9月龄。≤8月龄病例以常住儿童为主,≥9月龄病例以流动儿童为主。≥9月龄麻疹病例中,常住儿童所占比例低于流动儿童,而其麻疹疫苗接种率(47.5%)明显高于流动儿童(14.3%),两者有显著差异(χ2=11.75,P0.01)。因此,为进一步降低婴儿麻疹发病率,需加强流动儿童的麻疹疫苗补种;另外,建议将麻疹疫苗初次免疫时间提前至6月龄,这可能有助于降低婴儿麻疹发病率。     

脂蛋白酯酶基因HindⅢ和PvuⅡ位点多态与中国人2型糖尿病的关联及meta分析

目的:探讨脂蛋白脂酶基因HindⅢ(rs320) 和PvuⅡ(rs285)位点多态与中国人2型糖尿病的相关性.方法:采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性方法,对919个湖北地区汉人(包括2型糖尿病患者481人,健康对照438人)脂蛋白脂酶基因内含子6PvuⅡ和内含子8HindⅢ位点多态进行基因分型和关联分析,同时对中国大陆人群的相关研究进行meta分析.结果:HindⅢ和PvuⅡ位点湖北汉族2型糖尿病人和正常人的基因型和等位基因频率均无显著差异.5个研究包括2型糖尿病患者1252例,健康对照1075例的PvuⅡ位点meta分析表明该位点与中国人2型糖尿病无显著相关性(P=0.39);9个研究包括2型糖尿病患者1515例.健康时照1022例的HindⅢ位点meta分析表明该位点与中国人2型糖尿病也无相关性(P=0.14).结论:脂蛋白脂酶基因HindⅢ和PvuⅡ位点多态与中国人2型糖尿病的发生无关.     

转录因子Sp1上调前列腺癌细胞中CD59的表达

目的:构建针对Sp1基因siRNA真核表达载体,转染前列腺癌细胞PC-3,研究反式作用因子Sp1时CD59表达的影响.方法:应用siRNA表达载体介导的RNAi技术,构建含特异性sp1基因的重组载体pSUPER-siSp1,脂质体法转染前列腺癌细胞,G418筛选建立稳定表达转染基因的细胞株,Western blotting检测转染细胞中sp1和CD59基因的表达,MTT和染料释放试验判断CD59基因抑制后对补体溶破的抵抗作用.结果:成功构建了Sp1基因siRNA真核表达载体,转染PC-3细胞可表达荧光蛋白,稳定转染的Pc-3细胞Sp1及CD59基因蛋白水平降低,MTT和染料释放实验表明CD59基因受抑制后对补体溶破的抵抗作用降低.结论:siRNA-Sp1重组载体有效地抑制了CD59的表达,降低CD59的抗补体活性,结果证明反式作用因子Sp1是CD59表达调控中重要的转录因子,为探讨CD59在肿瘤细胞中高表达的研究奠定了基础.     

胡蒜的组织培养与快速繁殖

1植物名称胡蒜（Allium scorodoprasum L.）。 2材料类别茎尖。 3培养条件以MS为基本培养基。（1）不定芽诱导及增殖培养基：MS＋6-BA3.0mg·L^-1（单位下同）＋NAA1.0;（2）生根培养基：1/2MS＋IBA1.5＋NAA0.1。上述培养基中均加入25g·L^-1蔗糖和6.5g·L^-1琼脂,pH5.8。培养温度为25℃,光照时间为16h·d^-1,     

观赏用水草剑榕的组织培养和快速繁殖

1植物名称剑榕（Anubias lanceolate）。 2材料类别 植株的茎尖、腋芽。     

福建闽清福建青冈天然林种子雨和种子库

对福建闽清黄楮林自然保护区的福建青冈(Cyclobalanopsis chungii)天然林的种子雨和土壤种子库进行了观测和分析.结果表明,福建青冈种子雨持续2个月,其高峰期在11月下旬～12月上旬,总量为12.44个m~(-2),在种子散布过程中完好种子、虫蛀种子、败育种子、霉烂种子和萌发种子的比例差异明显,其中虫蛀种子是萌发种子的19.44倍.土壤种子库中虫蛀种子占53.79%,与种子雨相比,完好种子和萌发种子数量分别减少2.15个m~(-2)和0.20个m~(-2).土壤种子库种子存活率仅13.51%,动物捕食率达45.90%,说明动物的捕食和搬运是福建青冈种子缺失的原因之一.福建青冈天然林土壤种子库有69种植物种子,但种子数量较少,且分布不均匀,种子库中78.42%种子分布在2～5 cm土层中.福建青冈天然林中实生幼苗少与福建青冈种子本身特性及其生长环境密切相关,福建青冈种子发育成熟后因动物侵扰、虫蛀、霉烂和败育等情况发生,难以在土壤中长期保存,以致福建青冈林分天然更新严重受阻.