正常和不同疾病儿童肠道细菌DNA含量的动态测量

目的了解正常和不同疾病儿童住院期间肠道细菌量的变化。方法收集正常儿童、足月儿、早产儿、急性淋巴细胞白血病(ALL)、过敏性紫癜(HSP)和支气管肺炎患儿住院不同时间的粪便标本,提取标本中细菌DNA,用分子生物学专用分光光度仪测量所收集标本的细菌DNA-A260值(ng/μL)。结果粪便标本中细菌的DNA-A260值足月儿组生后第1、3和7天的分别为476.53±83.52、825.38±95.84和952.73±95.57。早产儿组生后第1、3和7天的分别为377.20±93.40、560.10±93.56和710.00±94.02。ALL患儿大剂量甲氨蝶呤(HDMTX)化疗前1天、化疗后第37、天和对照组儿童的分别为2436.3±768.61、496.5±577.1、1966.6±598.3和3479.3±870.5。HSP患儿治疗前1天、治疗后第3、7天和对照组儿童的分别为2225.9±616.1、1780.3±547.42、055.6±570.2和3605.9±1096.9。支气管肺炎患儿治疗后第1、3、7天和对照组分别为2353.17±868.71、1448.47±534.81、1905.97±703.52和3433.90±897.22。结论正常儿童粪便细菌DNA-A260值比ALL、HSP和支气管肺炎患儿高,足月儿比早产儿高。治疗患儿在治疗早期细菌的DNA-A260值减低明显,治疗后期有逐渐恢复至正常的趋势。结果提示不同疾病患儿在住院和治疗期间的肠道菌群有紊乱,其紊乱程度各有不同。     

荧光定量PCR检测大剂量甲氨喋呤化疗急性淋巴细胞白血病患儿肠道乳酸杆菌和大肠埃希菌量的变化

目的研究大剂量甲氨喋呤（HDMTX）化疗急性淋巴细胞白血病（ALL）患儿肠道菌群的变化,并和健康儿童进行比较。从微生态的角度分析HDMTX化疗与肠道菌群变化的相互关系,为微生态制剂用于HDMTX化疗副作用的预防和治疗提供依据。并探讨荧光定量PCR技术在该领域应用的实用性和可行性,以便推广应用。方法收集36例HDMTX化疗前后ALL患儿及36例健康对照组儿童的粪便标本,并提取目标细菌DNA,用分子生物学专用分光光度仪进行DNA的A值测量。用细菌的16S rRNA/DNA序列设计乳酸杆菌和大肠埃希菌的引物,行常规PCR完成细菌的定性,然后取准确定量的两种细菌DNA,经系列稀释后做荧光定量PCR,制作出标准曲线,待测样品同时进行荧光定量PCR反应,并和标准曲线进行比较,获得各样品中两种细菌的量。结果HDMTX化疗ALL患儿的肠道菌群与健康儿童比较发生了明显的变化,患儿化疗前1天、化疗后第3天、化疗后第7天和对照组儿童的粪便标本中细菌的A260值分别为（2436.3±768.6）、（1496.5±577.1）、（1966.6±598.3）和（3479.3±870.5）ng/μl;患儿化疗前1天、化疗后第3天、化疗后第7天和对照组的肠道乳酸杆菌数量的对数值分别为（8.10±0.43）、（6.73±0.45）、（7.45±0.43）和（9.12±0.50）ng/μl,而大肠埃希菌数量的对数值分别是（6.62±0.4）、（5.96±0.42）、（7.02±0.42）和（7.52±0.43）ng/μl。对照组和ALL组,ALL组化疗前和后,大便标本中乳酸杆菌和大肠埃希菌数量的对数值差异均有非常显著性（P〈0.01）。结论HDMTX化疗ALL患儿肠道中乳酸杆菌和大肠埃希菌的数量较正常对照组明显减少。在HDMTX化疗治疗过程中,采用微生态制剂,调整细菌比例,使肠道内益生菌的数量尽快恢复正常是必要的。16S rRNA/DNA荧光定量PCR技术在临床细菌定量分析中切实可行。     

籼型杂交稻亲本成熟胚愈伤组织再生体系的建立

本文给出了6个籼型杂交稻亲本成熟胚愈伤组织再生体系建立优化措施。采用6个有重要育种价值的杂交籼稻亲本成熟胚盾片诱导愈伤组织作为分化再生的外植体,通过调节2,4-D浓度、培养基成分、接种方式、激素组合和愈伤组织分化途径,建立适合籼稻遗传转化的再生体系。结果表明,MB培养基是较为合适的愈伤组织诱导培养基类型,6个品种在MB培养基上的愈伤组织诱导率均在60％-80％之间。半粒米的接种方式能够明显提高愈伤组织诱导率,提高幅度达到28．2％。通过调节2,4-D浓度和激素组合,愈伤组织诱导率最高可达到97．9％,两步分化法和适当干燥处理能够提高愈伤组织的分化效率,6品种愈伤组织分化率均在50％-90％之间。初步建立了6个杂交籼稻亲本品种成熟胚愈伤组织的再生体系,为以后遗传转化奠定基础。     

单方中药马蹄香散剂和几种微生态制剂中氨基酸和微量元素含量的测定和比较

目的 测定马蹄香和微生态制剂中氨基酸和微量元素的含量,深入认识马蹄香和微生态制剂的特点.方法 应用国家标准GB/T 5009.124-2003高效液相法和应用日本岛津公司ICPS-1000Ⅱ型等离子体发射光谱仪测定马蹄香和微生态制剂中氨基酸和微量元素含量.结果 氨基酸含量在乳酸菌素片＞亿活＞马蹄香＞金双歧＞贝飞达＞思连康＞合生原＞妈咪爱.谷氨酸在所有制剂中含量均高,天冬氨酸在多数制剂中含量也高.而胱氨酸在所有制剂中含量均低或未能测出.元素钙、磷、镁和硫含量在马蹄香＞乳酸菌素片＞亿活＞思连康＞金双歧＞妈咪爱＞贝飞达＞合生原.马蹄香中微量元素含量较丰富.结论 马蹄香和不同的微生态制剂所含的氨基酸和微量元素各有特点,这对不同制剂的微量营养素的认识有特殊意义.     

肠道菌群相关代谢物丁酸的量效和时效对人脐带间充质干细胞增殖的影响

目的探讨人肠道菌相关代谢物丁酸对人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,hUC-MSCs)增殖的影响。方法用含不同浓度丁酸(0.02、0.08、0.32、1.25和5.00 mmol/L)的干细胞培养基培养hUC-MSCs,采用CCK-8增殖实验检测24、48和72 h细胞增殖情况,并与正常对照组比较。结果 hUC-MSCs的增殖与丁酸的量效和时效均有关系,作用24 h内抑制hUC-MSCs增殖,到48 h则表现出低浓度促进细胞增殖、高浓度抑制细胞增殖的作用;当时间达到72 h,则低浓度丁酸对hUC-MSCs的促增殖作用减弱,高浓度组对其增殖抑制的作用有所增强。结论丁酸对hUC-MSCs增殖的影响存在量效和时效的共同作用,适宜的丁酸浓度和作用时间对机体肠道的功能维持及平衡有重要影响。     

NaCl胁迫对烤烟K326种子萌发及幼苗生理生化特性的影响

以烤烟品种K326为材料,研究不同浓度NaCl胁迫处理下种子萌发及幼苗生理生化指标的变化。结果表明,低浓度NaCl处理对幼苗生长具有一定的促进作用,而高浓度NaCl胁迫处理具有显著或极显著抑制作用;随着NaCl处理浓度的增加,发芽势、发芽指数、简单活力指数、形态指标、钾离子含量、单株干鲜重均呈明显下降趋势,而钠离子含量则相反;随着NaCl处理浓度的增加以及胁迫时间的延长,K326幼苗叶片中丙二醛、游离脯氨酸、可溶性糖含量及电解质渗透率均呈上升趋势,而可溶性蛋白、叶绿素含量及根系活力变化则相反。     

住院8天过敏性紫癜患儿肠道菌群的变化研究

目的研究住院1～8d过敏性紫癜患儿肠道菌群的变化。方法（1）提取43例过敏性紫癜患儿（观察组）住院1～8d和43例健康儿童（对照组）粪便标本的细菌DNA,测量并比较对照组和观察组标本细菌的DNA-A240值;（2）采用16SrRNA／DNA荧光定量PCR技术进行对照组和观察组粪便标本中双歧杆菌、乳酸杆菌和大肠埃希菌的定量分析和比较。结果（1）粪便标本中细菌的DNA-A240值分别为：对照组d0（3605．9±1096．9）ng／μl,观察组治疗前1天d1（2225．9±616．1）ng／μl,治疗第3～4天d2（1780．3±547．4）ng／μl,治疗第7～8天d3（2055．6±570．2）ng／μl;对照组和观察组治疗前以及观察组治疗不同时期相比,d0与d1差异有显著性（P〈0．05）,d1与d2差异有显著性（P〈0．05）,d1与d3差异有显著性（P〈0．05）,d2与d3差异无显著性（P〉0．05）;（2）粪便标本中3种细菌量的对数值比较差异均有显著性（P〈0．05）。观察组双歧杆菌和乳酸杆菌数量在治疗第3—4天较低,第7—8天有所回升;大肠埃希菌的对数值亦有减少,治疗第3—4天较低,但第7～8天没有明显回升。结论（1）过敏性紫癜患儿肠道菌群总DNA-A260量和健康儿童相比有减少;（2）过敏性紫癜患儿肠道双歧杆菌、乳酸杆菌和大肠埃希菌量与正常儿童相比有下降,治疗的第7天有回升的趋势。过敏性紫癜患儿肠道益生菌数量减少可能影响其发病和转归。     

双歧杆菌的定植机制及其作用的研究进展

定植可被定义为微生物在身体特定部位长久存在而在正常情况下并不导致健康宿主病变,不同于感染,因为后者是指微生物在体内长期停留而有引起病变的可能.胃肠道是人体细菌定植最多的地方,胃肠道的细菌定植是一复杂的有多因素决定的过程,其特征是环境、食物、微生物和宿主相关因素动态作用的结果。双歧杆菌是人体肠道最重要的生理性细菌,对宿主发挥生物屏障、营养、免疫、抗肿瘤和改善人体代谢等多种生理作用。但是双歧杆菌定植于肠黏膜上皮细胞上是它发挥上述生理作用的前提,故有关双歧杆菌定植的研究正日益受到人们的关注。决定双歧杆菌能否在肠道中定植的条件有：一是双歧杆菌必须先与肠道细胞发生作用而粘附于肠道细胞上;二是粘附后的双歧杆菌进一步改变肠道环境而实现对肠道细胞的稳定粘附（定植）。     

足月小样儿与正常足月儿母亲胎盘菌群差异研究CSCD

目的探讨足月小样儿与正常足月儿母亲胎盘菌群差异,为今后开展深入研究提供数据参考。方法采集2018年1月至9月在昆明医科大学第一附属医院产科规律产检并住院分娩的足月儿母亲的胎盘组织,共9例,按出生体重分为足月小样儿组和正常足月儿组。应用组织DNA提取试剂盒提取胎盘组织菌群DNA,采用16S rDNA高通量测序技术检测样本,分析测序结果,比较两组胎盘菌群差异。结果两组胎盘菌群在门水平上无差异(P>0.05),均以厚壁菌门、变形菌门、拟杆菌门和放线菌门为主。在属水平上,链球菌属、副普雷沃菌属、黄曲霉属、小杆菌属、梭状芽孢杆菌属XI、Pelomonas和丁酸菌属的相对丰度在足月小样儿组中显著升高(P<0.05)。结论足月儿胎盘组织中可检测到细菌,足月小样儿与正常足月儿其母亲胎盘菌群的组成和丰度在属水平上存在差异。     

腹腔镜联合胆道镜治疗胆囊息肉合并胆囊结石的临床效果

目的:探讨腹腔镜联合胆道镜治疗胆囊息肉并发胆囊结石的临床成效及并发症。方法:选取我院肝胆外科收治的胆囊息肉并发胆囊结石患者92例,随机分为两组。其中对照组46例,行传统开腹手术治疗;实验组46例,行腹腔镜联合胆道镜保胆手术治疗。对比两组患者手术平均时间、术中出血量、术后排气时间、术后下床活动时间、平均住院时间以及术后并发症发生率。结果:1实验组手术时间明显长于对照组,实验组患者术中出血量、术后排气时间、术后下床活动时间、平均住院时间明显较对照组明显缩短,差异有统计学意义(P0.05);2实验组术后并发症发生率(6.52%)明显低于对照组(16.67%),差异有统计学意义(P0.05)。结论:腹腔镜联合胆道镜治疗胆囊息肉并发胆结石能够明显减少患者术中出血量,缩短术后排气时间、术后下床活动时间、平均住院时间,降低术后并发症发生率,有利于提高临床疗效,改善预后,对临床具有指导意义。