牙龈卟啉单胞菌分子生物学研究进展

牙龈卟啉单胞菌已公认为是牙周炎的致病菌,它的一些表面结构诸如细胞外囊泡,菌毛,外膜蛋白,凝集素介导该菌对牙周组织粘附、定植,或作为毒性因子破坏牙周组织,随着分子生物学技术的发展,已对这些结构进行了分子克隆,本文拟就牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonasgingivalis)简称Pg)分子生物学进展作一简要综述。1　菌毛基因的分子克隆牙龈卟啉单胞菌菌毛作为该菌表面结构之一介导了该菌对牙周组织的粘附和定植。已纯化了41kda菌毛亚单位蛋白,并克隆了菌毛蛋白基因[1]。使用寡核苷酸M1和M2作为引物,采用PCR从9株Pg菌株中扩增了1.3kb的DNA片段,E…     

用降钙素原和白细胞联合能预测心脏手术病人的感染

为了探讨通过结合C反应蛋白(C-reactive protein, CRP)、白细胞(leukocyte, WBC)和降钙素原(procalcitonin, PCT)来预测大批心脏病手术患者术后感染的可行性,本研究病例对照研究涉及423例接受心肺心脏搭桥手术的心脏病患者。基于在术后期间是否有严重的败血症或化脓性休克,病人被分成两组。在重症监护病房的第1天,提取用于生物测量(PCT, CRP和WBC)的血液样本,然后每天早上提取1次,直到术后第10天。研究发现,两组群体的CRP中值类似。在10 d术后期间,感染病人群体中的WBC和PCT中值明显比未感染的群体高。高程截止≤3次(概率:4.058, 95%置信区间:2.206～7.463; p=0.001)和高程截止≥4次(概率:10.274, 95%置信区间:3.690～28.604; p<0.001),在术后第2天,随着感染的发展,PCT中值(1.7 ng/mL)和/或WBC中值(13 000个细胞/mm3)发生了明显的变化。本研究初步表明,在术后前3 d,PCT和WBC水平结合,能够预测接下来30 d心脏手术的术后感染情况,具有一定的临床应用价值。     

应用寡核苷酸圈套技术研究胰岛素调控人α1（Ⅰ）型胶原基因转录

目的 应用寡核苷酸圈套技术研究胰岛素对人COL1A1基因转录的调控.方法 建立稳定转染pCOLH12.5质粒（含CAT基因与人COL1A1基因-2483～＋42bp片段）的WI-38细胞株,加入不同剂量胰岛素,测CAT值;分别瞬时转染不同序列ssPT入克隆细胞株中,加入2.5 μmol/ml的胰岛素,测CAT值.结果 2.5 μmol/ml的胰岛素显著增加了COL1A1基因启动子活性;含sp1l位点的ssPT浓度为120 nmol/L时,受胰岛素刺激所增加的CAT值得到显著抑制,不含sp1位点的ssPT无此作用.结论 ssPT能够应用于基因转录调控的研究.胰岛素在人COL1A1基因上的反应元件可能位于启动子-129至-105区域内.     

黄鳝碱性磷酸酶的分离纯化及其部分性质研究

经Tris-HCl缓冲液(pH8.6)抽提,正丁醇处理,30%-75%硫酸铵分级沉淀分离,DEAE-Sepharose离子交换柱层析,Sephacryl S-200凝胶过滤纯化,从黄鳝内脏组织中分离纯化出电泳纯的碱性磷酸酶。该酶提纯倍数为564倍,比活力达到3015U/mg。酶学性质和动力学性质研究表明,该酶催化磷酸苯二钠的水解反应,最适pH值为10.2,pH小于7和大于12均不稳定;最适温度为40℃,温度高于50℃不稳定;米氏常数Km值为1.17mmo1/L。金属离子对该酶的催化活力有不同的影响,K+对该酶活力无影响,Mg2+对该酶有激活作用,Zn2+对该酶有抑制作用。       

几株国内外Q热立克次体生物学特性的研究

Q热是人类和动物共患的立克次体病,其病原体是贝纳柯克氏体(Coxiella burneti),可通过多种途径进行传播。本文对几株Q热立克次体国际标准株和国内分离株的某些生物学特性进行了研究,结果如下。     

复合生态系统工程中高效去除磷,氮植被植物的筛选研究

对８种漫灌和垄沟处理和利用单元的植被植物进行了去除污水中磷、氮效能的筛选研究,以皇草为植被的垄沟系统具有较高的净化效能,ＴＰ和ＴＮ的去除率分别为８３．２％和７６．３％;以水稻Ｉ（８８－１３２）和水稻Ⅱ为植被的漫灌系统对污水中的Ｎ有很高的去除利用效能,去除率分别为８４．７和８４．３％。质量平衡的研究结果表明,对于以水稻Ｉ和水稻Ⅱ为植被的漫灌系统以及皇草为植被的垄沟系统而言,植物的吸收作用最主要的是去     

综述: 衰老相关microRNAs研究进展

microRNAs(miRNAs)是一类长度约22个核苷酸的非编码RNA.这是一种广泛存在于真核生物中的内源性单链小分子RNA,miRNAs通过部分碱基对互补方式与靶基因结合,在转录和转录后水平调节靶基因表达.最近研究发现,miRNAs可以靶向多个衰老相关信号通路,在线虫、果蝇、小鼠和人类的衰老过程中发挥了重要的调控作用.本文总结了近年来与衰老相关的miRNAs的研究进展,首先介绍衰老相关的信号通路,然后重点介绍与线虫和哺乳动物衰老有关的miRNAs,以及这些miRNAs如何调控衰老相关信号通路,从而影响细胞、组织和整个机体的衰老进程和衰老相关性疾病,最后展望该领域未来的研究方向.     

SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴别口腔二氧化碳噬纤维菌的研究

细菌的全细胞蛋白的 SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳是近年来国内外广泛采用的一种有效的鉴别细菌的方法。二氧化碳噬纤维菌(Capnocytophage)是近年来从人牙菌斑中分离的革兰氏阴性兼性厌氧的新菌属。文献报道该菌属包括三个种:黄褐二氧化碳噬纤维菌(c.orchraea),生痰二氧化碳噬纤维菌(c.sputigena)和牙龈二氧化碳噬纤维菌(c.gingivalis)。本实验采用 SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴别二氧化碳噬纤维菌的三个菌种,为口腔细菌的鉴定建立一个准确而经济的方法。1.细菌全细胞蛋白的提取用0.02MPBS 液分别收集在 BHI 血琼脂上富集的二氧化碳噬纤维菌标准菌株的菌落,离心收集菌细胞沉淀,TE 缓冲液溶解沉淀,分两种方法破碎细菌。一种是加入 SDS 并沸水浴破碎细菌;另一种是超声震荡破碎细菌。细菌破碎后,离心收集上清液,贮于-20℃。2.细菌全细胞蛋白的电泳实验采用垂直板状电泳,凝胶浓度7.5%,交     

衰老相关microRNAs研究进展

microRNAs(miRNAs)是一类长度约22个核苷酸的非编码RNA.这是一种广泛存在于真核生物中的内源性单链小分子RNA,miRNAs通过部分碱基对互补方式与靶基因结合,在转录和转录后水平调节靶基因表达.最近研究发现,miRNAs可以靶向多个衰老相关信号通路,在线虫、果蝇、小鼠和人类的衰老过程中发挥了重要的调控作用.本文总结了近年来与衰老相关的miRNAs的研究进展,首先介绍衰老相关的信号通路,然后重点介绍与线虫和哺乳动物衰老有关的miRNAs,以及这些miRNAs如何调控衰老相关信号通路,从而影响细胞、组织和整个机体的衰老进程和衰老相关性疾病,最后展望该领域未来的研究方向.     

水稻杂种两优培9与亲本苗期基因表达比较分析

利用包含9198条非重复cDNA序列芯片研究了水稻两系杂交组合两优培9及其亲本培矮64s和93-11发芽后72 h的幼苗和根中基因表达变化. 结果显示: 8587条序列在3个基因型的幼苗和根中同时检测到表达信号; 1571条(18.3%)序列在幼苗或根中3个基因型间检测到显著表达差异(P<0.01), 亦即表达多态性, 其中121条(1.4%)序列在幼苗和根中同时检测到表达多态性; 870条(10.1%)序列在杂种与双亲或与亲本之一有显著表达差异. 基因功能预测分析表明: 多态性表达序列的分布与基因功能有关, 碳水化合物、能量和脂类代谢以及逆境应答等功能类型出现多态性表达基因的数量明显高于期望值, 而氨基酸代谢、转录翻译调节以及信号转导等功能类多态性表达基因的数量明显低于期望值. 214条(2.5%)序列在表达水平上存在显著杂种优势(P<0.05), 其中117条(54.7%)与已知基因存在同源性, 涉及基础代谢、遗传信息传递、细胞生长和死亡、信号转导、物质转运和逆境应答等功能. 研究结果为理解基因表达多态性与性状表型变异的关系以及水稻苗期发育和杂种优势的分子机制提供了有用信息.