绿色荧光蛋白——一种新的基因表达标记物

绿色荧光蛋白──一种新的基因表达标记物黄涛（中国医学科学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室,北京１００００５）关键词绿色荧光蛋白,基因表达标记物发育生物学家一直想找到一种可以直接在活组织或细胞生长和分化的任何时刻随时被检测到的细胞标记物（ｃ...     

次适温下腐胺对水稻种子萌发的影响

０．０１—０．１ｍｍｏｌ／Ｌ腐胺Ｐｕｔｒｅｓｃｉｎｅ（Ｐｕｔ）浸种处理４８ｈ,可以促进水稻种子（加粒２２２）在次适温下（１６±１℃）萌发,显著地提高发芽指数和活力指数。但在２８℃时对种子萌发无显著影响。进一步研究表明,在次适温下（１６±１℃）,Ｐｕｔ可以促进α－淀粉酶合成,提高α－淀粉酶活性。增加呼吸强度和ＡＴＰ含量。但在２８℃时,Ｐｕｔ对种子内α－淀粉酶活性无影响。研究结果表明,Ｐｕｔ对种子萌发的影响与温度有关,在次适温下（１６±１℃）可促进水稻种子（加粒２２２）萌发。     

克隆化反向杂交探针的制备

反向斑点杂交是将寡核苷酸探针固定在膜上,用标记的靶序列与固定在膜上的探针进行杂交．与正向杂交相比,它通过一次杂交即可确定多种基因型,是一种快速筛查DNA点突变的诊断方法.我们选择β－地中海贫血基因-28 (A→ G), CD17 (A→T) and CD41～42 (-TTCT) 三种点突变为模型采用PCR扩增产生串联多拷贝序列探针并将其克隆化．将克隆化探针固定于尼龙膜上,与同位素标记的β－珠蛋白基因PCR片段进行杂交,检测β－地贫患者的基因型．     

Sperm Mediated Transfer of Genes into Goldfish and Detection by Polymerase Chain Reaction

Goldfish sperms were mixed with eggs for fertilization after incubation with antifreeze protein gene(AFP)from ocean pout for 30 min.A number of embryos and 145 adult goldfish were obtained.DNA from adult goldfish and embryos was extracted separately.Results of the amplification by PCRand Southern blot molecular hybridization indicate the integration of exogenous antifreeze gene intothe genome of a part of the recipient goldfish.Of the 45 samples detected by PCR,twelve showedpositive reaction with distinct hybridization band.The positive rate was 26%.     

碳离子诱导的DNA双链断裂

ＤＮＡ双链断裂（ＤＳＢｓ）是电离辐射诱导的最重要的原发损伤,研究ＤＳＢｓ有利于揭示细胞辐射敏感性的机理。用倒转脉冲场凝胶电泳结合荧光扫描进行ＤＮＡ定量研究７５ＭｅＶ／ｕ１２Ｃ６＋对小鼠Ｂ１６黑色素瘤细胞ＤＳＢｓ的诱导,结果表明：ＤＳＢｓ产额约为０．７４ＤＳＢｓ／１００Ｍｂｐ／Ｇｙ;ＤＮＡ片段分布在两个区域。大片段区分子量约为１．４Ｍｂｐ～３．２Ｍｂｐ,分子量小于１．２Ｍｂｐ的为小片段区;并且随着剂量的增加,大片段区ＤＮＡ含量逐渐下降,而小片段区的ＤＮＡ含量显著增加。表明Ｂ１６ＤＮＡ分子上可能存在对重离子较为敏感的位点。     

TRAIL与顺铂联用对人骨肉瘤细胞杀伤作用的实验研究

目的探讨TRAIL与顺铂联合应用对人骨肉瘤细胞的杀伤作用.方法将TRAIL与顺铂单独及联合应用于体外培养的骨肉瘤OS-732细胞,采用MTT法测定细胞抑制率,于倒置相差显微镜、荧光显微镜、扫描及透射电镜下观察细胞的形态学改变及超微结构变化.结果 50ng/ml的TRAIL与5μg/ml顺铂合用于OS-732细胞24小时后,细胞抑制率为84.37%,明显高于单用TRAIL(50μg/ml)时的9.68%及单用顺铂(5μg/ml)时的24.39%(P<0.01).细胞的形态与超微结构观察均显示,合用比单用促凋亡效应更显著.结论 TRAIL与顺铂合用,可高效杀伤人骨肉瘤细胞,此协同作用主要是通过诱导肿瘤细胞凋亡来实现的.     

柑桔无病原体苗培育研究进展

简述了柑桔无病原体苗培育的 2种主要方法 :热处理法和组织培养法。其中重点介绍了利用珠心培养、胚珠培养以及茎嫁接脱除柑桔病原体的研究现状和最新进展 ,并就目前存在的问题及今后的发展方向进行了探讨     

纤维桩树脂核修复老年残根残冠的疗效及对炎性因子的影响

目的:探讨纤维桩树脂核修复老年残根残冠的疗效及对炎性因子的影响。方法:抽取2012年1月至2013年4月期间行老年残根残冠修复的患者80例,共92颗患牙,按随机数字表法分为研究组和对照组各40例,其中研究组患牙47颗,采用纤维桩树脂核修复;对照组患牙45颗,采用金属铸造桩核修复。收集两组患者的血清和龈沟液样本,采用酶联免疫吸附法(Enzyme-Linked Immunosorbnent Assay,ELISA)分别检测两组的IL-8、IL-6及TNF-α水平。对比两组疗效及炎性因子水平。结果:研究组治疗患牙总体成功率明显高于对照组,失败率明显低于对照组(P0.05);研究组不同牙位的治疗成功率均较对照组高,但差异不明显(P0.05);修复前两组的IL-8、IL-6及TNF-α的水平差异不明显;研究组修复后1周、1个月及1年的IL-8和IL-6水平均明显低于对照组(P0.05),研究组修复后1年的TNF-α水平明显低于对照组(P0.05),两组患者修复后1周和修复后1月的TNF-α水平相差不大(P0.05);重复测量方差分析结果显示,两组IL-8、IL-6及TNF-α的水平均随着修复时间的延长而降低(P0.05)。结论:纤维桩树脂核修复老年残根残冠具有更好的疗效,对降低牙龈沟液中炎性因子水平的作用明显,值得在临床上应用和推广。     

生长素与乙烯在沙田柚上胚轴不定芽再生中的作用

结果表明,6 BA只能诱导较低频率的不定芽再生,IBA的加入可以促进不定芽的再生。从再生率与单位外植体再生芽数综合考虑,以高浓度IBA(1.5mg·L 1)与低浓度6 BA(0.5mg·L 1)配合的效果最佳,加入生长素极性运输的调节剂TIBA与Flavone可进一步提高不定芽的再生频率。乙烯抑制上胚轴不定芽的再生,而乙烯生理作用的拮抗剂Ag+与生物合成抑制剂AOA、Co+可以显著提高不定芽再生频率。水杨酸(SA)也抑制不定芽的再生。