假定蛋白CT440在沙眼衣原体感染细胞中的定位研究

包涵体膜蛋白在沙眼衣原体致病过程中发挥重要的作用.为确定假定蛋白CT440在沙眼衣原体感染细胞中的定位及特征,本研究采用PCR方法从D型沙眼衣原体的基因组中扩增Ct440基因,克隆入pGEX-6p原核表达载体构建pGEX-6p/Ct440原核表达重组体,重组体转化到XL1-blue大肠杆菌,IPTG诱导表达融合蛋白GST-CT440.纯化后的CT440融合蛋白免疫小鼠制备抗体,间接免疫荧光(IFA)和Western blot测定抗体的特异性.特异性抗体用于分析CT440蛋白在衣原体感染细胞内的定位、表达时相特征及其对衣原体感染的影响.结果表明,CT440蛋白定位于沙眼衣原体包涵体膜上,为沙眼衣原体包涵体膜蛋白;该蛋白在衣原体感染12h后开始表达,直至持续到整个感染周期;转基因在胞浆表达的CT440融合蛋白不影响其后的衣原体感染.本实验为深入研究衣原体与宿主细胞间的相互作用,阐明衣原体致病机制提供了重要的实验依据.     

连香树科及其近缘植物matK序列分析和系统学意义

测定和分析了连香树科(Cercidiphyllaeeae)、交让木科(Daplmiphyllaceac)、金缕梅科(Hamamelidaceae)代表植物的叶绿体marK序列(5′端31bps除外),以木兰属作为外类群,应用邻接法构建分子系统树,结果表明：连香树科与水青树科的亲缘关系较远。连香树科、交让木科和金缕梅科形成了一个自展数据支持率(bootstrap)为100％的单系类群,其中金缕梅科枫香属(Liquidambar)、红花荷属(Rhodoleia)和金缕梅属(Hamamelis)虽构成了一个单系类群,但自展数据支持率仅为68％;连香树科与交让木科构成的单系分支自展数据支持率仅为53％。由于连香树科、交让木科、金缕梅科之间的进化距离相当短,表明这3个科之间亲缘关系密切,内部分支的自展数据支持率不高,表明它们之间准确的亲缘关系有待进一步研究。本研究结果与rbcL、aptB、18S rDNA序列分析结果相似,但自展数据支持率更高,表明marK序列分析可应用于较高等级分类群系统发育关系的研究。     

真空负压和常规ABC法显示HPV—1抗原的应用比较

应用真空负压 ABC 法显示 HPV-1抗原比常规 ABC 法效果好,敏感性高,时间短,整个过程只需一个多小时,阳性物明显突出,颗粒均匀,色泽鲜艳,呈黄棕色,背景清晰等优点。还可提高抗体的稀释度,降低成本。与微波技术相比,具有设备简单,易于操作,安全可靠,不受条件限制,经对26例尖锐湿疣的病例进行多层次稀释度的研究,取得了满意的结果,认为该法值得推广应用。     

灰白蚕蛾生物学特性及其防治

灰白蚕蛾OcinaravariansWalker是小叶榕 (FicusbenjamingMig)的主要害虫之一。幼虫危害叶片或嫩梢 ,被危害的叶片呈透明状或缺刻 ,严重时将整株叶片吃光。此虫在海南岛 1年发生 1 0代 ,1代一般需要 30d左右 ,最长的需要 6 0d。完成 1代有效积温为 5 0 1 5日·度 ,发育起点温度为 1 0 6℃ ,可采用90 %的敌百虫 80 0倍稀释液喷雾防治     

中国4个少数民族中SDF1多态性研究

研究与HIV 1感染相关的基质细胞衍生因子 (SDF1)等位基因突变频率和多态性在中国 4个少数民族的分布特征。应用PCR/ RFLP等方法检测回族 (5 7例 )、鄂伦春族 (71例 )、蒙古族 (30例 )及锡伯族 (2 6例 )共 184个个体中SDF1 -3’A基因突变频率。结果得出中国 4个民族中SDF1- 3’A基因的基因频率分别为 :蒙古族为 38 3%,锡伯族为 2 3 .1%,回族为 2 0 .2 %,鄂伦春族为 10 .6 %。中国 4个少数民族中SDF1- 3’A等位基因频率存在较大的差异 (χ2 =37 .82 6 ,P<0.01) , 提示这 4 个民族的遗传结构存在着一定的差异。 本研究 为评估中国不同民族对 HIV-1 的易感性及艾滋病的流行病学研究提供了基本数据。     

人源性抗腮腺炎病毒噬菌体抗体库的构建

应用噬菌体表面呈现技术,从腮腺炎病毒抗体阳性者淋巴细胞中提取总RNA,经RT-PCR扩增出抗体重链Fd和轻链基因,经XhoI/SpeI、SacI/XbaI双酶切,先后克隆入噬粒载体pComb3中,再电转化大肠杆菌XL1-blue,以辅助噬菌体VCSM13进行超感染。从分离出的淋巴细胞中共提取高质量RNA约110μg,经逆转录、PCR,分别扩增出约700 bp大小的κ、λ和Fd基因。PCR产物和载体经纯化、双酶切后进行连接,在2.5 kV、200 Ω、25μF的条件下电转化,转化率为2.48×107。最终得到库容量为6.4×106,滴度为7.8×1013 cfu/L的噬菌体抗体库。所构建的抗腮腺炎病毒特异性噬菌体抗体库容量中等大小,能满足从中筛选抗HN蛋白噬菌体抗体的需要。     

雌激素受体α和β亚型在文昌鱼神经系统、哈氏窝和性腺中的定位

用兔抗人ER-α和ER-β多克隆抗体对文昌鱼神经系统、轮器哈氏窝和性腺进行免疫细胞化学的定位研究。结果揭示幼年和成年两性不同发育时期文昌鱼在这些部位分布ER-α和ER-β蛋白。ER-α定位在端脑、中脑、后脑和神经管中大多数神经细胞核,少数在胞质及其突起和神经纤维,ER-β则定位在细胞质或细胞膜上,少数在核内。ER-α免疫阳性物质主要分布在哈氏窝下层的上皮细胞核,少数在上层细胞质,β受体则在上层细胞核。在性腺,ER-α分布在卵巢中卵原细胞和小生长期卵母细胞胞质与核仁,生发泡(核)显免疫阴性,在大生长期卵母细胞核膜和核仁的免疫阳性显著增强,成熟期则在卵细胞生发泡表达;ER-β免疫阳性物质分布在卵原细胞和早期卵母细胞质以及成熟卵细胞的卵被膜检测到,生发泡显免疫阴性。在精巢,这两种ER亚型均定位在精原细胞、初级与次级精母细胞和足细胞质,精子细胞在胞核,精子显免疫阴性。另外,双染结果还揭示ER-α和ER-β在上述部位多数共存于同一细胞,少数在不同细胞表达,且在细胞定位有不同。首次发现这两种雌激素受体亚型在文昌鱼有广泛分布,它们介导雌激素对文昌鱼神经内分泌组织的调节作用。α和β受体在靶细胞定位的不同,提示两者在介导雌激素信号路线和基因转录机制可能有不同生理作用。     

栅藻对水环境中镍的累积效应与机理分析

对不同Scenedesmus品种的藻细胞从含镍水溶液 (10mg/L)中累积金属镍的能力进行了分析 ,结果表明 :藻细胞对镍的生物累积量表现出明显的品种差异性。ScenedesmusquadricaudaFACHB 4 4和ScenedesmusquadricaudaFACHB 5 0 6表现出很强的累积能力 (累积量达到 5～ 6mgNi /g干重 ) ,而Scenedesmussp .FACHB 4 16和Scenedesmussp .FACHB 4 89在相同条件对金属镍累积量要少得多 (1～ 1.5mgNi /g干重 )。这种差异可能与不同品种藻细胞间的形态结构和生理特性是相关的。对S .quadricaudaFACHB 4 4重金属抗性和累积能力进一步的分析表明 ,S .quadricaudaFACHB 4 4用于含镍重金属废水处理是非常有效的 ,在高浓度 (10 0mg/L)的镍溶液中 ,藻细胞的最大累积量能达到 (2 6 .7mgNi/g干重 )。对该藻细胞镍累积动力学分析发现 :藻细胞对镍的生物累积包括一个快速的被动吸附过程 (5min ,结合 70 %的镍 )和一个缓慢的耗能累积过程 (2～ 3h时间内的累积量占总量的 2 0 %～ 30 % )。与其他藻类相比 ,S .quadricaudaFACHB 4 4对水溶液中镍的耗能累积量明显高于其他藻类。透射电子显微镜(TEM)和X射线能谱 (EDX)分析结果均表明 ,藻细胞耗能累积的镍主要集中在原生质体中 ,尤以淀粉粒和染色质中为多。     

独花兰野生种群研究——开花与营养体状态的关系

对安徽省天堂寨自然保护区独花兰野生种群的花果期节律和营养体状态研究表明 ,开花植株占观察样本的 3 7 5 %,个体是否开花与假鳞茎数目、地下茎总体积和叶面积呈极显著相关关系。绝大多数开花个体具有 3个假鳞茎且其总体积通常达 8cm3,叶面积达 3 3cm2 。个体较大的植株开花持续期较长。花葶在花果期具有不同的生长时相 :开花期中止生长 ,幼果期呈逻辑斯谛型生长。面对日益增长的人类采掘风险 ,独花兰开花与大型植株的关联可能是其生活史中影响种群生存的脆弱点之一。     

NCBI的数据库资源及其应用

NCBI是美国的一个大型生物信息学系统,它主要通过NCBI网站为全世界的科学家服务,它拥有GenBank,RefSeq,UniGene,dbSNP等等多种大型生物学数据库,并且提供了多种数据库查询工具,如：Entrez,PubMed,LocusLink,TaxonomyBrowser等等,以及多种数据库分析资源,对于我们查询文献,人类基因组信息、基因表达、蛋白质结构、肿瘤遗传信息,以及不同种属遗传信息等等有非常大的帮助。是一个非常重要的生物医学资源。