黄曲霉毒素B1抗独特型抗体的制备和应用研究II.抗独特型抗体应用

以抗独特型抗体(anti-idiotypeantibody,Ab2)的酶切片段Fab2替代黄曲霉毒素B1(AFB1)建立一种不需要使用AFB1的无毒酶联免疫吸附(Enzyme-LinkedImmunosorbentAssay,ELISA)试剂盒,研究该试剂盒特异性、稳定性和AFB1的加标回收,并将该试剂盒用于农产品和饲料中AFB1的检测。结果表明,该试剂盒具有和常规ELISA试剂盒一样的特异性和加标回收能力,无毒试剂盒和常规试剂盒一样都可以用于农产品和饲料中AFB1的检测,并且两种试剂盒的检测结果并无显著差异,无毒ELISA试剂盒在适当处理后,40C放置3个月和-200C放置5个月,以间接非竞争ELISA测定的吸光值分别是起始时的85%和87%。     

S1核酸酶作用与微环DNA分子的克隆策略

米曲霉来源的S1 核酸酶具有降解单链DNA或RNA的作用。在适当的条件下 ,该酶能将不同的环形DNA分子从超螺旋转变成开环和线形结构 ,对质粒pUC19的实验证明 ,S1 核酸酶的这种转变作用与加入的酶量呈正相关。在 2 5 μL总反应体积中 ,按 10 0ngDNA加入 5u至 17u的S1 核酸酶 ,能获得较高比例的线形DNA。由于微环DNA分子太小 ,单酶切位点的出现率较低 ,很难用常规方式进行克隆 ,以S1 核酸酶进行线形化是微环DNA克隆的途径。pC3是已知最小的真核生物线粒体DNA类质粒 (5 37bp) ,经S1 核酸酶线形化后 ,成功地克隆到pMD18 T载体上。     

蚕豆核酮糖1，5-磷酸羧化酶／加氧酶大亚基基因的分子克隆

核酮糖l,5－二磷酸羧化酶／加氧酶由大亚基(Ls)和小亚基组成。Ls由叶绿体DNA编码。蚕豆Ls的基因已被克隆到pBR322。应用几种限制性内切酶酶解以及Southern印迹法构建了该重组质粒的物理图谱。     

人白细胞介素12在昆虫细胞中的表达

人白细胞介素12(hIL-12)是一种异源二聚体细胞因子,由p40和p35两个亚基通过二硫键连接而成。首先构建了两个表达载体pVL1392-hp40和pVL1393-hp35,并分别与线性化多角体病毒基因组DNA共转染昆虫细胞株Sf9,用目视法筛选出重组病毒AcNPV-hp40和AcNPV-hp35。利用PHA激活的人淋巴细胞增殖试验,在条件培液中检测到重组hIL-12的生物活性,表达量约为1.5～2μg/10⁶细胞。经实时BIA和Northern blot分析,hp35和hp40两亚基在昆虫细胞中获得表达。非还原条件下的Westernblot结果显示,重组hIL-12的表观分子量为76kDa,hp40同源二聚体的表观分子量为92kDa。重组ph40具有明显抑制hIL-12生物活性的作用。     

乳链菌素生物合成基因启动子的结构、功能与应用研究

乳酸乳球菌 (Lactococcuslactis)中的乳链菌素 (Nisin)的生物合成由含 1 1个基因的基因簇nisA(或Z)BTCIPRKFEG控制。在这个基因簇共有 3个启动子 :nisA启动子 ,nisF启动子和nisR启动子 ,科学家已经克隆了它们并对其结构与功能进行了研究 .nisR启动子是组成型表达的 ,而nisA/nisF启动子由应答调控蛋白NisR和组氨酸激酶NisK所组成的双组分调控系统调控表达 :NisK接受外源nisin信号 ,自身磷酸化后将磷酸基团递给NisR ,NisR激活nisA/nisF启动子 ,进行下游基因的转录。利用这种特点 ,开发出了能在革兰氏阳性菌中可诱导表达的质粒载体 ,包括单质粒载体系统和双质粒载体系统 ,它们在理论及应用研究上具有很大的价值。     

青蛙与蟾蜍

青蛙与蟾蜍是我国到处都有的两棲類动物。从它们的外表上看起来,谁都能区别,如果要追问一句,它们的区别在那些地方?非得要有一些比较解剖学、胚胎学与生态学等生物科学知识,才能很確切地指出     

广州不同生境类型区域昆虫多样性

2005—2006年,对广州全域4个不同生境类型区域(中心城市区、农田区、沿海湿地区和森林区)的昆虫群落进行6次调查,共获得昆虫标本10595号,分属于22个目、216个科。多样性分析结果表明,森林区昆虫群落的丰富度指数、多样性指数、复杂性指数最高,其次为农田区、中心城市区,最低为沿海湿地区;沿海湿地区昆虫群落的优势度最高,其他依次为中心城市区、农田区和森林区。不同生境类型昆虫群落多样性指数的时间动态不同,森林区、农田区和沿海湿地区的丰富度指数及Shannon-Wiener多样性指数均为6—7月最高,中心城市区以9—10月最高;农田区昆虫群落的Shannon-Wiener多样性指数及均匀度指数随时间波动最大,森林区的丰富度指数时间波动最大,中心城市区的优势度时间波动最大。相似性分析结果表明,森林区和农田区昆虫群落具有的相同科数最多,相似性系数最高,沿海湿地区和森林区、农田区、城市区具有的相同科数都较少,相似性系数也较低。广州不同生境类型区域昆虫多样性存在差异,森林区受城市化进程影响较小,生境得到较好保护,昆虫多样性丰富,沿海湿地区由于城市化发展改变了原生生境,昆虫多样性遭到较大破坏,因此在城市化进程中,要加强...     

桂黔吊石苣苔的组织培养与快速繁殖

以桂黔吊石苣苔的茎段和叶片为外植体材料,对桂黔吊石苣苔进行离体培养与快速繁殖技术研究.结果表明：桂黔吊石苣苔茎段腋芽可直接诱导萌发,在 MS＋6-BA 1．0 mg·L-1＋IBA 0．1 mg·L-1培养基上萌发率最高,达75％;适宜的继代增殖及壮苗培养基为1/2MS＋NAA0．2 mg·L-1,繁殖系数为6．0/60 d,继代培养中茎段外植体可以诱导出愈伤组织,但诱导率较低,未能进一步分化成苗;最佳生根培养基为1/2MS＋6-BA 0．2 mg·L-1＋NAA 0．8 mg·L-1＋AC 0．1％＋香蕉5％,生根率达100％;在大棚中模拟桂黔吊石苣苔自然生境对生根苗进行移栽,成活率在95％以上.     

免疫诊断细胞方法(续八)

<正>(二)用毛细管测定白细胞移动的方法 1.用水平毛细管,细胞在表面上移动的方法测定抗原的效果。 原理 放在毛细管的细胞象在玻璃表面一样形成移动带,白细胞移动比其它细胞好。如培养液中存在致敏淋巴细胞和其它白细胞(粒细胞,巨噬细胞),则加入相应抗原时,致敏淋巴细胞随之分泌出MIF。因此,根据抑制白细胞移动程度可评价抗原对淋巴的致敏效果。