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781.
为创制棉花耐旱种质资源,解决棉花耐旱资源贫乏以及提高水资源利用率,研究依据CRISPR/Cas9编辑原理,对课题组前期利用RT-PCR技术筛选耐旱相关基因GhNAC3(Gh_D02G0790)的第一外显子区域设计2个20 bp的编辑靶点,并在陆地棉基因组数据库中比对分析靶点序列,排除非特异性编辑,将2个靶点核苷酸片段分别与gRNA-AtU6载体连接,通过2次PCR扩增,得到含特异性连接接头的AtU6-GhNAC3表达盒,再将表达盒连接到CRISPR/Cas9(pRGEB32-7)载体上,获得CRISPR-GhNAC3重组表达载体,利用农杆菌介导法转化陆地棉受体YZ-1,再生培养得到T0代转基因幼苗,通过PCR检测Cas9蛋白基因获得阳性株系。对T0代植株的靶点区域序列进行PCR扩增和测序分析,鉴定GhNAC3编辑类型。结果发现,CRISPR9-GhNAC3表达载体成功转化YZ-1,并获得40株转基因再生植株,经Cas9蛋白基因鉴定得到30株阳性株系,从阳性植株选择10株进行编辑类型测序分析,发现7株在靶点区域发生编辑,编辑类型主要为碱基片段缺... 相似文献
782.
遗传操作已用在一些能抗卡那霉素(一种抗生素)的棉花植株中。Agracetus 公司(米德尔顿,威斯康星州)的 Paul Unbeck 博士本月在新奥尔良对美国农学会说,他利用 Ti 质粒载体已将一种能编码抗抗生素特性的基因转移到一些棉属植物中。Unbcck 博士向美国作物科学会(美国农学会的一个小组)讲述了他的功绩。该会主席是 Dwight Tomes 博士。他告诉本刊,“据表明,这种对抗生素有抗性的基因在成熟植株中是存在的,其本身并不明显。既然他们能这样做,他们在昆虫抗性方面也能继续这样做,这是棉花中的一个重要农学问题。” 相似文献
783.
本实验报道了以离体培养方式诱导日本冷杉(AbiesfirmaSieb.etZucc.)与二色蜡蘑(Laccariabicolor(Maire)Orton)的外生菌根合成的方法。日本冷杉能否与广谱性的外生菌根菌二色蜡蘑形成人工菌根?菌根结构的诱导是否只发生在植物体整体水平上?这些是本实验的关注点。研究结果显示:无菌幼苗接种10周后,在光学显微镜下可观察到典型的外生菌根的特征,即由高度分叉的外延菌丝体形成的厚实的菌套以及由内延菌丝体形成的哈蒂氏网。将来源于下胚轴的愈伤组织与二色蜡蘑的菌丝体进行共同培养,3周后,菌丝体开始接触愈伤组织的表面,并且侵入到愈伤组织的细胞间,形成拟哈蒂氏网结构。愈伤组织可以作为一种菌根学研究的有效的培养体系。这一方法可望为冷杉类植物菌根学的研究提供有效的实验工具。 相似文献
784.