MicroRNA-146a抑制胶质瘤细胞增殖的研究

目的:检测胶质瘤中miR-146a的表达水平,并研究miR-146a对胶质瘤细胞增殖的影响。方法:应用实时定量PCR的方法检测胶质瘤组织和癌旁组织中miR-146a的表达水平,采用脂质体细胞转染miRNA模拟物的方式过表达miR-146a,MTT法检测转染后细胞的增殖率,利用在线软件targetScan预测miRNA可能的靶基因。结果:miR-146a在胶质瘤组织中表达明显降低(P<0.01),相对表达水平为癌旁组织的35%,细胞转染miR-146a模拟物后,miR-146a表达明显增加,癌细胞增殖率明显降低(P<0.01),仅为原细胞的47%。Notch1基因是miR-146a影响胶质瘤细胞增殖活力的可能靶基因。结论:miR-146a可能通过抑制Notch1基因的表达调控胶质瘤细胞的增殖。     

肺癌恶性胸腔积液中稀有肿瘤细胞的鉴定与单细胞测序分析

肿瘤细胞的异质性是指肿瘤细胞在基因组或表型水平上具有不同特征。在外界环境压力或人为杀伤因素刺激下,肿瘤细胞具有不同的响应方式,从而导致它们在细胞增殖、侵袭转移及耐药能力等方面产生差别,尤其是一部分具有转移能力的肿瘤细胞能脱离原位组织并在远处器官形成转移灶。因此,肿瘤细胞的异质性为其发生转移和耐药提供了可能。传统的肿瘤异质性研究主要基于不同位置原位组织样本中的群体细胞,缺乏单细胞层面的解析,尤其是对具有转移能力的肿瘤细胞的异质性研究。本研究建立了基于肺癌恶性胸腔积液中转移性肿瘤细胞的单细胞研究路线,首先利用代谢标志物鉴定恶性胸腔积液中高代谢活性的肿瘤细胞,其次通过单细胞Sanger测序揭示这些肿瘤细胞具有一致的驱动基因突变特征,然后利用高通量测序技术对肿瘤细胞染色体拷贝数变异进行分析,从而揭示同一患者具有转移能力的肿瘤细胞即使具有相同的驱动基因突变特征,但在基因组层面上仍具有异质性,可进一步细分为若干子群。本研究结果对于更深入地理解肿瘤转移机制具有重要意义。     

正选择基因无启动子的供体质粒pN(CDS)(N2)-R的构建及应用

为提高对发生基因编辑细胞的筛选效率,本研究构建了具备正负筛选功能的供体质粒pN(CDS)(N2)-R,其正选择基因是无启动子NeoR,负选择基因是能自主表达的RED。利用该质粒和CRISPR-Cas9系统对小鼠B16细胞FasL进行编辑。G418筛选2周,获得混合克隆。镜下观察显示,混合克隆质量较高。junction PCR结果表明,有基因编辑发生。DNA测序结果表明,NeoR准确插入靶位点。细胞杀伤实验表明,FasL功能被有效敲除。该供体质粒的多克隆位点,充分利用同尾酶酶切位点,因而具有广泛的适用性。综上所述,在对各种位点进行编辑时,使用该供体质粒有助于混和克隆的筛选。     

实验室食菌螨的生活史及对果蝇繁殖的危害

观察到实验室食菌螨的生活史有卵、幼螨、第一若螨、第二若螨（休眠体）、第三若螨和成螨6种虫态。从卵至成螨的发育在23～25℃和78％～89％相对湿度下需3．0～4．5天。结果表明：孳生实验室食菌螨能明显降低果蝇的繁殖力,其危害程度随孳生数量不同而呈现明显差异。     

RNA干扰药物用于疾病治疗的安全性问题

RNA干扰（RNA interference,RNAi）是指由双链RNA介导的序列特异的转录后基因沉默。RNAi技术因其特异性、高效性而备受青睐,在疾病治疗方面表现出广阔的应用前景。然而,近年来的研究发现,基于RNAi技术开发的药物存在安全性问题,主要包括引起免疫反应、产生脱靶效应、以及存在竞争微RNA通路等。这些问题的突破将使RNAi技术获得更加广泛的应用。     

桂热杧系列品种(系)的亲缘关系分析

从100条ISSR引物中选取12条多态性好的引物,对广西亚热带作物所选育的16个杧果（Mangifera indica L．）品种（系）及其可能亲本共22个样品的亲缘关系进行了分析。结果表明：这12条引物共扩增出127条DNA谱带,其中多态性条带为85条,条带多态百分率为66．93％。聚类分析显示,所有供试品种（系）之间的亲缘关系都比较近,相似系数在0．81以上;如果以相似系数0．82为标准,可将供试的22个品种（系）分为3大类。利用ISSR技术能较好地区分桂热杧系列品种（系）的亲缘关系。     

饥饿对鱼类生理生态学影响的研究进展

由于自然界中食物分布在空间上的不均匀性、季节更替或环境剧变等原因,鱼类经常会在生活周期的一定阶段面临食物资源的缺乏而受到饥饿胁迫。不同种类的鱼对饥饿的耐受力和适应性特征不同。有关饥饿对鱼类生理生态学状况影响的研究有助于了解鱼类适应饥饿胁迫的生态对策,具有重要的理论意义;该方面的资料对渔业资源管理及水产养殖等方面的实践也有重要的指导意义。本文综述了近年来有关饥饿对鱼类代谢、身体组成、形态结构、行为、繁殖习性、 作用。l饥饿对鱼类代谢水平的影响鱼类可调节自身的能量分配以适应食物的缺乏,饥饿状态下鱼…     

乙型肝炎肝硬化患者外周血单核细胞基因表达谱研究

目的：探索基因表达谱技术在肝硬化形成的分子生物学机制研究及其诊断方法研究的应用。方法：应用含8192个人体cDNA的微阵列芯片和来自外周血单核细胞的标记cDNA,分析慢性乙型肝炎、肝炎肝硬化各15例基因表达谱。通过CenePix4000B扫描芯片仪和ImaGene3．0软件分析Cy3、Cy5两种荧光信号的强度和比值。结果：在8192个基因中,2组中筛选出有差异的基因60个,占0．73％,其中主要是炎症、凋亡基因、细胞外基质蛋白基因、细胞生长调节基因,占71．6％。结论：基因表达谱技术可为乙型肝炎肝硬化形成的分子生物学机制及其诊断研究提供大量有益的生物学信息。     

水稻OsRPK2基因的克隆及功能初步鉴定

类受体蛋白激酶基因OsRPK1在水稻的抗逆信号传导中起着重要作用。本研究扩增获得与OsRPK1高度同源的OsRPK2基因,构建p1300:35S:OsRPK2过表达载体后转化拟南芥。对35S:OsRPK2纯合体拟南芥进行抗逆性分析表明,在盐、ABA、PEG胁迫下,OsRPK2过表达拟南芥萌发率都明显低于野生型拟南芥,其幼苗的根长生长和成株生长状况方面比野生型拟南芥表现出更为明显的受抑现象。生理检测表明,盐胁迫处理后,与野生型拟南芥相比,35S:OsRPK2转基因拟南芥中叶绿素含量下降更为明显,脯氨酸上升量较小,丙二醛含量上升更为明显,这些内在生理机制使得OsRPK2过表达拟南芥抗逆性明显下降。通过对35S:OsRPK2拟南芥的qRTPCR检测发现,OsRPK2的过量表达使拟南芥抗逆信号通路下游的SAD、SOS3和FRY基因表达明显受到抑制,OsRPK2基因可能通过SOS和CDPK信号通路影响拟南芥的抗逆性。