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气相色谱-质谱联用技术及其在代谢组学中的应用 总被引:5,自引:0,他引:5
代谢组学是以高通量、高灵敏度、高分辨率的现代仪器分析方法为手段,对细胞、体液、组织中所有代谢物进行无偏向的定性与定量分析的一门学科。气相色谱-质谱联用技术具有较高的检测灵敏度和鉴定准确度,通过标准谱图库的比对可对代谢物进行快速的鉴定,因此被广泛应用于生物样品的代谢产物的检测中。文中对近年来气相色谱-质谱联用技术的发展以及在代谢组学研究中取得的成果进行了综述。首先介绍了气相色谱-质谱联用技术的分类和常用的样品衍生化方法;继而从样品预处理、定性与定量分析、数据分析三方面介绍了气相色谱-质谱联用技术分析代谢物的方法,并系统地对该技术在微生物、植物、疾病诊断领域的应用实例进行了评述;最后提出了当前气相色谱-质谱联用技术在代谢组学研究中存在的问题并对后续的研究进行了展望。 相似文献
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【目的】薇甘菊是世界最具危害性的入侵杂草之一,对我国生态环境和农业、林业生产造成了严重的危害。颈盲蝽是控制薇甘菊的一种潜在的重要天敌昆虫。本研究旨在探讨薇甘菊被颈盲蝽取食后,叶片防御相关酶系活性、营养物质和叶绿素含量的变化,阐明颈盲蝽取食对薇甘菊生理功能的影响,为利用颈盲蝽防控薇甘菊提供依据。【方法】从云南瑞丽野外采集薇甘菊的本地天敌昆虫颈盲蝽,测定了颈盲蝽取食前及取食12、24、48、96 h后,薇甘菊叶片中过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)活性,以及可溶性糖、可溶性蛋白及叶绿素含量,以取食前的植株作为对照。【结果】与对照相比,颈盲蝽取食12 h时,薇甘菊叶片中的POD、CAT活性升高,SOD活性降低;之后POD、SOD活性上升,CAT活性降低,取食48 h时,POD和SOD活性达到最高值,CAT活性达到最低值;取食96 h时,POD与SOD活性降低,但仍高于对照,CAT活性与取食48 h时相近。颈盲蝽取食后,薇甘菊叶片中的可溶性糖含量明显上升,取食96 h达到最高值;可溶性蛋白和叶绿素含量显著降低,在96 h达到最低值,分别低于对照39.30%和69.94%。【结论】颈盲蝽取食严重破坏了薇甘菊叶片的正常生理功能,并最终导致其叶片萎蔫和坏疽。 相似文献
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65.
叶轮血泵的溶血问题,即高速旋转叶轮破坏红细胞,导致血红蛋白游离到血浆中,是一个经过长期探索但并未完全解决的问题。尽管在理论上已经找到溶血的主要原因,并在实际上发展了低溶血叶轮血泵,但是叶轮设计跟血泵溶血性能之间的关系,人们知道得仍然很少。本文有选择地将五种不同设计的叶轮进行比较,发现对数螺旋角为30°的光滑柱形叶片,同螺旋角为45°、螺旋角为30°但分别扭曲30°和45°、以及螺旋角为30°的粗糙柱形叶片相比,溶血性能最好。材料和方法两台完全相同的叶轮血泵,分别装上两个不同设计的叶轮,接到双通道比较型血动力试验模拟台(图1)。模拟台由两个相同的循环系统组成,每个系统有人工心房、人工 相似文献
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以梯度提取的方法对硬枝树花进行石油醚(30–60)、二氯甲烷、乙酸乙酯提取,浸膏经过色谱柱层析分离纯化得到6个单体化合物,分别为松萝酸(1)、黑茶溃素(2)、巴尔巴地衣酸(3)、去甲环萝酸(4)、地弗地衣酸(5)、藻纹苔酸(6),并且都是首次从硬枝树花中分离得到。通过对清除DPPH?和ABTS?+能力的测定,对这6个化合物体外抗氧化活性进行评价。结果表明:藻纹苔酸在检测浓度范围内的?DPPH的清除率和终浓度呈现一定的量效关系,在55μmol/L时,藻纹苔酸的清除率为57.05%(P0.01)。黑茶溃素、巴尔巴地衣酸、去甲环萝酸在13.75–55μmol/L检测浓度范围内的DPPH自由基清除率与终浓度呈量效关系。松萝酸对DPPH?的清除能力较强,在3.4375μmol/L及27.5μmol/L时,DPPH自由基清除率达到74.78%(P0.01)及74.82%(P0.01),接近对照组BHT浓度为55μmol/L的清除率。地弗地衣酸、藻纹苔酸、巴尔巴地衣酸的ABTS?+自由基清除率与终浓度呈现一定的量效关系,在浓度为55μmol/L时,地弗地衣酸ABTS?+自由基清除率为50.79%(P0.01),藻纹苔酸为44.53%(P0.01),巴尔巴地衣酸为44.34%(P0.01),在13.75–55μmol/L浓度范围内,黑茶溃素ABTS?+自由基的清除率随着浓度的增大而逐渐增大。硬枝树花中含有多样的苯骈呋喃类和缩酚酸类化合物及其衍生物,是具有开发利用潜力的抗氧化剂资源。 相似文献
67.
苎麻体细胞胚胎发生研究初报 总被引:1,自引:0,他引:1
将苎麻“浏阳大叶绿”的子叶培养在附加0.55mg/L CPA、 0.05 mg/L BR 的CXW培养基上,可获得淡黄色或浅灰绿色的颗粒状愈伤组织。将愈伤组织转移至附加0.1 mg/L CPA、 0.05 mg/L NAA 、1.5 mg/L ZT的CXW培养基上继代;颗粒状结构非常明显。继续培养在添加2 mg/L Met, 3 g/L YE 的上述继代培养基上,可分化出一些相互独立的胚状体,继而发育成为胚状体幼苗。 相似文献
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为了探明Ayu17-449基因在小鼠生长发育过程中的功能, 用特殊的诱捕载体(Gene trapping vector)导入小鼠ES细胞中,5′RACE、Southern blot方法鉴定成功地单一捕获Ayu17-449基因后,由这种ES制作了Ayu17-449 敲除小鼠并用Northern blot方法该基因在突变小鼠体内的表达。结果在Ayu17-449 敲除小鼠体内,诱捕载体位于Ayu17-449基因的翻译起始密码上游,Ayu17-449基因的转录被抑制。表明Ayu17-449敲除小鼠为分析Ayu17-449基因的功能提供了可靠的实验材料。
相似文献
69.
70.
目的:在大肠杆菌中表达人胸腺肽β4(Tβ4)的融合蛋白,通过CDAP介导的化学切割将融合部分切除,获得人Tβ4。方法:分别以质粒pET-Tβ4和pET-L12为模板,扩增Tβ4和核糖体亚基蛋白L12的基因片段,再以这2段基因为模板进行重叠PCR,并在连接处引入一个半胱氨酸(Cys)密码子,将得到的融合蛋白Tβ4-Cys-L12基因片段与pET-22b载体连接,构建表达质粒,将其与N-末端乙酰转移酶质粒共转化至大肠杆菌BL21(DE3)并共表达,获得N端乙酰化修饰的融合蛋白Tβ4-Cys-L12;利用CDAP氰基化Cys的巯基,于pH10.0条件下在Cys残基N端完成切割,分离纯化获得Tβ4。结果:质谱分析目的产物相对分子质量为4962.70,与天然Tβ4一致,表明获得了Tβ4。结论:CDAP介导的化学法可以有效切割融合蛋白获得Tβ4,建立了一套Tβ4的生物制备方法。 相似文献