木瓜蛋白酶的固定化及其性质研究

在海藻酸钠-壳聚糖固定化木瓜蛋白酶(immobilized papin on sodium alginate-chitosan,IPSAC)的实验中,当给酶量为1 mg g1载体时,酶活性为39.2 U,酶活力回收为21.1%.在尼龙布固定化木瓜蛋白酶(knmobilized papain onnylon,IPN)的实验中,当每块尼龙布(3 cm×3 cm)给酶量为1 mg时,酶活性为35.6 U,酶活力回收为19.2%.木瓜蛋白酶(papain,PA)、IPSAC、IPN的最适pH分别为7.2、7.2和6.8.PA及IPSAC在70℃以下活性稳定;IPN在50℃以下活性稳定.IPSAC与IPN半衰期分别为59 d和66 d.     

菠萝各器官蛋白酶的提取与保活

研究了菠萝各器官的蛋白酶含量、活性和提取过程中酶活性的保护作用,结果表明,“无刺卡因”品种的青果、７０％成熟果肉、７０％成熟果皮、茎、果柄、叶的粗酶含量分别为０．３５９、０．１９４、０．１３２、０．９９４、０．３０３和０．１９５％。各器官酶活性以青果酶活性最高。在提取过程中使用乙二胺四乙酸二钠、醋酸锌、氯化钠、抗坏血酸可使果肉蛋白酶、茎蛋白酶和叶蛋白酶活性分别提高６９．３７％、９３．８８％和１３９．６９％。１０００ｐｐｍ硫代硫酸钠＋１０００ｐｐｍ半胱氨酸是菠萝蛋白酶活性的有效保护剂,可使果蛋白酶和茎蛋白酶活性分别提高３５．５１％和６９．０６％。     

关于酶促反应速度与酶促反应的初速度的教学

酶促反应速度是酶促反应动力学中的一个基本概念。一定条件下，酶催化反应的活力大小要由该反应条件下酶促反应速度来反映和确定：酶促反应速度越小，酶活力越小；反之，酶促反应速度越大，酶活力也越大。在研究底物浓度、酶浓度、温度、pH、激活剂、抑制剂等因素对酶活力的影响时，都必须测定酶促反应的速度。为了排除实验中存在的一些干扰，一个酶的酶促反应的速度要在酶促反应进行的初期测定，即测定所谓的酶促反应的初速度。在教学过程中，学生不易弄清楚酶促反应速度与酶促反应的初速度之间的关系。我们发现：当一般地问起酶反应速度在何时测定时，绝大多数学生都会回答在酶促反应的初期；而当问起酶促反应动力学中的v-[S]曲线(图1)上的酶促反应初速度在哪里和为什么时，却有相当一些学生指出在曲线的原点处做切线，切线的斜率就是；有的则指出是与1/2vmax相应的位置的速度值；个别的则指出是与vmax相应的位置的速度值。只有极少数学生指出曲线上的每一点相应的速度值都是酶促反应初速度所在。实际上，正确的答案应为曲线上的每一点相应的速度值均为该底物浓度[S]处的酶促反应初速度值。     

超声波对酵母过氧化氢酶及多酚氧化酶活性的影响

用微超声处理酵母过氧化氢酶(CAT)和多酚氧化酶(PPO),结果表明,在一定参数范围内CAT和PPO活性都升高。对CAT来说,其最适当的超声参数是135kHz、40Wcm2、处理10min。对PPO来说,其最适当参数是135kHz、25Wcm2、处理10min。经光谱分析,PPO超声处理后紫外差示光谱在一定的波长下呈现出明显的正峰和负峰 。     

吲哚丁酸处理桉树插条后过氧化物酶活性和同工酶变化与插条生根的关系

尾叶桉MLA无性系（简称MLA）为难生根植物,属叶桉U6无性系（简称6）和刚果12号桉W5无性系（简称W5）为相对易生根植物。MLA的插条中的过氧化物酶（POD）活性较U6、W5的高。用吲哚丁酸（IBA）处理桉树的插条后,在扦插生根的不同阶段,插条内的POD活性呈现规律性的变化。蛋白质含量呈上升趋势。POD同工酶谱带也随生根的进程出现增多的现象。本文讨论了过氧化物酶与桉树插条生根的关系。     

甲醇对酵母过氧化氢酶活性的影响机理研究

将酵母过氧化氢酶加入一定比例的甲醇,测定其活性变化。结果表明:在含2%甲醇时酶活比对照提高4026%。将粗酶液用70%饱和度的硫酸铵盐析后离心所得的上清液再加入硫酸铵至80%饱和度,离心的沉淀溶解在缓冲液中,上SephadexG75柱,分离出的有酶活性的蛋白峰经电泳得一条蛋白带,说明过氧化氢酶已经被提纯到电泳纯。光谱分析发现,甲醇处理后过氧化氢酶纯酶的吸收光谱和荧光发射光谱与未经处理的比较基本不变,而差示光谱出现明显的正峰和负峰。由动力学分析可知,在甲醇中,过氧化氢酶的Vmax和Km值均有不同程度提高 。     

纤维素酶在二甲基亚砜微扰条件下的动力学行为和光谱学变化

为了探索二甲基亚砜对纤维素酶催化活性的影响,以羧甲基纤维素钠(CMC)为底物来研究纤维素酶纯酶在二甲基亚砜中的动力学变化、紫外吸收光谱、紫外差示光谱和荧光发射光谱。实验表明:在3%的二甲基亚砜中,纤维素酶的催化活性下降了46.78%;其Km值从缓冲液中的2.500 mg/mL上升到二甲基亚砜中的3.922 mg/mL;在二甲基亚砜中,酶分子的肽键紫外吸收稍有改变,但其氨基酸基团的紫外吸收没有改变;其紫外差示光谱出现明显的正峰和负峰;其荧光发射光谱没有改变。研究结果证明:二甲基亚砜通过轻微改变酶分子的肽链结构,使分子构象改变,导致酶分子对底物的亲和力下降,从而降低其催化活性。     

甲醇对胰蛋白酶催化活性影响的机理研究

为了探索甲醇影响胰蛋白酶催化活性的作用机理,将胰蛋白酶纯化到电泳纯的水平,用纯酶进行了催化动力学研究;测定了酶分子的紫外吸收光谱、紫外差示光谱和荧光发射光谱的变化.试验结果表明:胰蛋白酶经7%甲醇处理时,其比活力比对照提高了17.97%.经甲醇处理后的胰蛋白酶,其动力学参数Km值及Vmax值均得到提高,且Vmax提高幅度比较大.甲醇处理后,酶的紫外吸收光谱基本没有变化,其差示光谱出现明显的正峰和负峰,而其荧光发射光谱也基本不变,只是荧光强度有所增加.实验结果证明,在7%甲醇存在下,胰蛋白酶分子构型不变,酶活性的变化是甲醇引起酶分子构象改变的结果.     

几种保护酶活性变化与马占相思树对低温胁迫的抵抗性的关系研究

马占相思(Acacia mangium)QLD19835家系树苗在人工气候室经低温处理后,体内相关的生理指标及酶活性产生明显变化。随着温度不断下降至-6℃产生的冻害导致植株细胞膜ATP酶活性有所下降,而蛋白质的含量则显著升高,同时,细胞保护酶SOD、POD、CAT的活性呈下降趋势,但仍能维持较高的活性水平。这些实验结果表明,马占相思QLD19835对低温胁迫能产生一种防卫反应,从而对冻害有一定适应性,而具有一定活性的细胞保护酶及蛋白质的含量提高可能是植株有较强抗寒力的重要原因。     

红龙草红色素稳定性的研究

分析了pH值、温度、光、过氰化氢、亚硫酸钠、Vc、葡萄糖、蔗糖和苯甲酸钠等对红龙草（Altemanthera dentate ‘Ruliginosa’）红色素稳定性的影响。结果表明,红龙草红色素对热的耐受性较强,但耐光照和耐氧化性较差,且还原剂亚硫酸钠对其也有微弱的影响;在不同的pH值条件下,其吸收峰没有改变,最大吸收波长为530nm;Vc和蔗糖对该色素没有破坏作用,并有一定的护色效果;葡萄糖和苯甲酸钠对该色素也无明显影响。