五指山猪和长白猪背最长肌差异基因的筛选与注释

为了筛选五指山猪和长白猪背最长肌组织差异表达基因,本研究采用RNA-seq技术和生物信息学方法对6月龄、8月龄五指山猪和长白猪的背最长肌进行转录组测序分析,并对差异表达基因进行GO和KEGG Pathway显著性富集分析。通过与猪基因组比对分析后发现,在6月龄和8月龄五指山猪和长白猪均有约44 000 000条Clean reads能够比对到猪基因组上相关基因,每个文库均获得约18 200个表达基因,而转录本的数据为25 000个。在6月龄五指山猪与长白猪中共有30个基因差异表达,在8月龄五指山猪与长白猪中获得29个差异表达的基因。这些差异表达的基因主要富集在与糖酵解代谢、MAPK信号代谢通路和胰岛素信号通路等肌肉发育信号通路,通过筛选获得了与肌肉生长发育有关的候选基因,为探索五指山猪肌肉发育的分子机制提供了理论依据。     

粗纤维对定安鹅MSTN基因表达量及肌纤维发育的影响

为研究日粮粗纤维水平对生长中期定安鹅腿肌MSTN基因表达量及肌纤维发育的影响,选遗传背景相近、体重一致的30日龄定安鹅120只,采用单因子随机试验设计,共分3个处理组,每处理组设4个重复,每重复10只鹅.分别饲喂粗纤维水平为4.29％,5.29％和6.29％的三种日粮.试验期为35 d.结果表明:(1)日粮粗纤维水平为5.29％时,可以提高生长中期定安鹅试验末重和平均日增重,并且与6.29％组比较达到了显著水平(P＜0.05);(2)日粮粗纤维水平可以显著影响生长中期定安鹅腿肌中MSTN的基因表达量(P＜0.05),且腿肌中MSTN的基因表达量与生长中期定安鹅的试验末体重和平均日增重呈负相关关系;(3)日粮粗纤维水平为5.29％时,与6.29％组相比可显著提高生长中期定安鹅血清中IgA和IgG的含量(P＜0.05);(4)日粮粗纤维水平显著影响生长中期定安鹅腿肌纤维数量和腿肌纤维密度的影响(P＜0.05).综上所述,日粮粗纤维水平为5.29％可以显著影响生长中期定安鹅的试验末体重、平均日增重和腿肌中MSTN基因的表达水平,对腿肌纤维的发育也有一定的促进作用.     

小麦全蚀病菌胞外β-1,3-葡聚糖酶的产生和部分特性的研究*

本文就小麦全蚀病菌胞外-1,3-葡聚糖酶的产生和部分酶学特性进行了研究。结果表明,小麦全蚀病菌能够产生胞外-1,3-葡聚糖酶。在供试的三种培养基中,最佳产酶培养基为改进的MS培养基。当以改进的MS为基础培养基时,最佳碳源为麦麸皮;最佳氮源为牛肉浸膏;产酶的最适条件为培养基初始pH为6,培养温度为26℃,250ml三角瓶中装培养基量为50ml时接菌量为4块菌饼(直径5mm)。另外,对酶的部分性质的研究结果表明,酶最适作用温度和pH分别为60℃和7.0,在50℃以下以及pH 5.5～7.5范围内稳定。     

甾醇生物合成抑制剂粉锈宁对苹果黑星病发育的影响

采用电子显微镜和细胞化学技术,研究了杀菌剂粉锈宁（甾醇生物合成抑制剂）对苹果黑星病菌在苹果叶片上发育的影响。观察结果表明,接种前24h施药对病菌入侵有明显的影响。表现为分生孢子的萌发受阻,推迟萌发及萌发率降低。并引起芽管畸形,不能形成附着胞。接种后6天（显症前）施药,可引起叶片角质层下菌丝细胞和子座细胞的原生质坏死、细胞壁不规则增厚及液泡增大,从而使菌丝进一步发育受阻。接种后12天（显症后）施药,不仅导致菌丝、子座细胞发生上述变化,而且引起分生孢子和分生孢子梗塌陷、畸形,阻止了病菌的进一步产孢和扩展。细胞化学定位分析结果表明,β－1,3－葡萄糖和几丁质这两种胞壁主要成分在对照菌丝和药剂处理后的菌丝细胞壁内含量有很大差异。在药剂处理的菌丝细胞壁中,这两种成分的标记密度明显高于对照菌丝,表明杀菌剂对病质膜透性的不利影响使β－1,3－葡聚糖和几丁质在菌丝细胞壁中过度累积。     

苹果黑腐皮壳菌CAP超家族蛋白VmPR1c的降解功能域和降解途径

真菌与寄主互作过程中常分泌多种效应蛋白,但植物病原真菌CAP超家族蛋白是否参与致病过程尚不明确。基于苹果黑腐皮壳菌Valsa mali基因组CAP同源基因研究发现VmPR1c敲除后突变体致病性明显下降,但VmPR1c蛋白在表达过程中被降解。本研究借助BLAST、NCBI CDD web server、SignalP 4.1、TMHMM 2.0等进行序列分析,利用缺失突变法及在蛋白表达过程中加蛋白酶抑制剂分别对该蛋白的降解功能域和降解途径进行了探索。C端区段缺失突变结果显示,突变涉及CAP结构域中的α-helix结构和CBM区域时,Western blot条带呈现明显加深;涉及CTE区域及CAP结构域中的半胱氨酸时,Western blot条带则呈现不同程度地减弱。替换VmPR1c的信号肽或突变其信号肽切割位点序列,Western blot条带均有不同程度地加深。分别对CTE和NTE中的脯氨酸进行点突变后,蛋白降解更加严重。在蛋白表达过程中加入蛋白酶体抑制剂MG132和溶酶体抑制剂chloroquine,与对照VmPR1c ^△SP-GFP相比,Western blot结果无明显变化,表明VmPR1c蛋白序列C端区域中的CTE、信号肽及其切割位点序列以及CAP结构域中的α-helix结构介导其降解,其中CTE和NTE中的脯氨酸对该蛋白具保护作用。此外,VmPR1c的降解不通过蛋白酶体和溶酶体途径。     

PEG 介导的苹果腐烂病菌原生质体转化

摘要: 【目的】建立PEG 介导的苹果腐烂病菌原生质体遗传转化体系。【方法】本文利用带有hph 基因的质粒,以苹果腐烂病菌(Valsa mali var.mali) 03-8 为受体菌株,通过PEG 融合法对其原生体进行转化。【结果】于YEPD 内培养48 h 的菌丝,在酶解液浓度为50 mg /mL Driselase + 10 mg /mL Lysing Enzymes 情况下,按10 mL酶液/0. 5 g湿菌体比例,酶解2 h时可以释放出4 × 107 个/mL 原生质体,其转化效率为44 个/μg DNA。对转化子的PCR 检测和Southern 杂交分析表明,hph 基因已经整合进苹果树腐烂病菌的基因组中。转化子在PDA 培养基中继代5 次后,87. 5% 的转化子仍能正常生长,表明外源基因hph 能在苹果树腐烂病菌中稳定遗传。【结论】该转化体系的建立为苹果树腐烂病菌致病相关基因的深入研究奠定了基础。     

陇南越夏区自生麦苗条形柄锈菌毒性表型及分子基因型分析

为了解陇南地区越夏自生麦苗上条形柄锈菌的毒性组成及群体遗传结构,将采自天水、陇南及定西的自生麦苗上的39个单孢子堆菌系采用中、美鉴别寄主毒性分析法和TP-M13-SSR荧光标记技术,进行毒性鉴定并对其基因组DNA进行SSR标记分析。结果显示：在中国鉴别寄主上供试菌系被区分为9个致病类型,在美国鉴别寄主上则得到24个毒性类型,在中美鉴别寄主上共得到30个毒性表型。通过中国鉴别寄主鉴定的CYR32、CYR33为优势小种,毒性比率分别达到35.9%和30.8%。SSR标记将这些菌系划分为36个基因型,毒性分析与     

银杏叶滴丸联合瑞舒伐他汀对老年冠心病患者的临床效果

摘要 目的：研究银杏叶滴丸联合瑞舒伐他汀对老年冠心病患者的临床效果。方法：选择2017年8月～2019年12月于我院的75例老年冠心病患者,将其随机分为两组。对照组口服瑞舒伐他汀,观察组联合口服银杏叶滴丸联合瑞舒伐他汀。比较两组的左室舒张末径(Left ventricular end diastolic diameter, LVEDD)、心输出量(Cardiac output, CO)和左室射血分数(Left ventricular ejection fraction, LVEF);血清白细胞介素-2 (Interleukin-2, IL-2)、P 选择素、肿瘤坏死因子-α(Tumor necrosis factor -α, TNF-α)水平。结果：观察组的有效率95.49 %,明显高于对照组71.05 %(P<0.05);治疗后,两组的纤维蛋白原、全血高切黏度、红细胞聚集指数、全血低切黏度、最大血小板聚集率和血浆黏度、LVEDD、血清IL-2、P 选择素、TNF-α水平明显降低(P<0.05),且观察组明显低于对照组,CO以及LVEF明显升高(P<0.05),且观察组上述指标的变化均优于对照组(P<0.05)。结论：银杏叶滴丸联合瑞舒伐他汀能有效抑制老年冠心病患者体内的炎性反应程度,改善血液流变学,恢复患者的心功能,值得推广。     

流程重组在病案质量控制中的实践应用

??????? 目的 对病案质控流程重组,总结完善工作流程,提高工作效率,改善工作质量。方法 在分析病案出院前质控流程现状基础上,从缩短审核时间、增加病床合理使用和保证病历质量等方面阐述如何在现有条件下来改善病案质控流程。结果 加强病案质量控制,不断提高病历书写质量。结论 使病案质控最大限度服务于临床需要。     

口服葡萄糖耐量试验负荷后1小时血糖筛查糖调节受损和糖尿病的最佳切点值及糖调节受损患者转归的随访研究

摘要 目的：研究分析口服葡萄糖耐量试验（OGTT）负荷后1 h血糖筛查糖调节受损（IGR）和糖尿病（DM）的最佳切点值及糖调节受损患者转归的随访结果。方法：选择2018年6月-2019年6月于西安交通大学第二附属医院行OGTT试验的340例受试者。采用受试者工作特征（ROC）曲线分析OGTT负荷后餐后1h血糖（1hPG）筛查DM及IGR的切点值。按照上述切点值将受试者分为正常组81例，IGR组106例，DM组153例。对比三组人员胰岛功能及血脂指标水平。对IGR组患者进行为期3年的随访观察，将其按照随访结果的差异分为进展组35例与无进展组71例。以单因素及多因素Logistic回归分析进展成DM的危险因素。结果：经ROC曲线分析，OGTT负荷后1hPG筛查IGR的最佳切点值为10.0 mmol/L，筛查DM的最佳切点值为13.0 mmol/L。正常组、IGR组及DM组胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）、总胆固醇（TG）水平均呈逐渐升高趋势，β细胞功能指数（HOMA-β）呈逐渐降低趋势，且经单因素方差分析发现：各组间对比差异均有统计学意义（均P＜0.05）。进展组年龄、体质量指数（BMI）及TG水平均高于无进展组（均P＜0.05）。经多因素Logistic回归分析发现：年龄高、高BMI及高TG水平均是IGR患者进展成DM的独立危险因素（均P＜0.05）。结论：OGTT负荷后1 h血糖筛查IGR的切点值为10.0 mmol/L，筛查DM的切点值为13.0 mmol/L，且1hPG可有效反映胰岛功能及血脂水平。此外，IGR患者转归的影响因素与年龄、BMI及TG有关。