酶放大镧系元素发光法测定碱性碱酸酶

报告了应用酶放大镧系元素发光法测定碱性酸酶的方法。应用５－氟水扬酸磷酯作为酶底物,并对方法学中的多种因素进行了最佳化。用甲基硅油（Ｉ）改进了信／噪比的稳定性。方法的灵敏为４Ｕ／Ｌ。精密度为１０％,精密度为１０％的浓度范围是２．００￣３．００×１０＾２Ｕ／Ｌ。测量值的相对误差〈１０％,测定了血清中的碱性磷酸酶浓度,回收率为９３％￣９５％。     

中国凤尾蕨属（凤尾蕨科）的孢粉学与叶表皮形态学研究

对中国凤尾蕨属44个分类群进行孢粉学与叶表皮形态学研究。结果表明：在属的水平,该属的孢子形态稳定。根据赤道环的有无和脊类纹饰的情况,该属可划分成6种类型。但这与该属的孢子体形态不相关。在属和种的水平,该属的气孔器类型均具有较高的稳定性,大部分种类以极细胞型和腋下细胞型为主。气孔器密度、面积、长宽比这3个定量特征在属和种的水平上稳定性都较差,因此不具有分类学价值。基本气孔器类型在种间重复性较高,可作为该属稳定的形态特征之一,在属的水平上具有一定的分类学价值,但不宜作为该属属下的分类学依据。综合两方面的数据,对部分疑似种进行初步的分类学处理,并探讨了易混淆种的分类学关系。     

外源5 氨基乙酰丙酸对盐胁迫下决明幼苗生理特性的影响

为寻找提升决明幼苗耐盐性的方法,测量了不同处理下决明幼苗叶片的光合色素、超氧阴离子、丙二醛的含量,以及保护酶系统中SOD、POD、CAT的活性。结果表明,经150 mmol?L 1 NaCl处理,决明幼苗叶片的光合色素含量显著降低,而超氧阴离子、丙二醛的含量以及保护酶SOD、POD、CAT的活性显著升高。不同浓度的外源5 氨基乙酰丙酸在不同程度上增加了决明幼苗叶片的叶绿素、类胡萝卜素含量,进一步增强了保护〖JP2〗酶SOD、POD、CAT的活性,降低了超氧阴离子、丙二醛的含量。在外源5 氨基乙酰丙酸浓度为50 mg?L 1时,恢复效果最为明显(80.0 、196.4 和 114.1 U?g 1),有效地缓解了盐胁迫对决明幼苗的伤害。     

表达广谱抗真菌蛋白转基因水稻秸秆的化学成分与纤维素结构

为了给表达广谱抗真菌蛋白转基因水稻的安全性评估提供基础数据,本文以表达广谱抗真菌蛋白转基因水稻转品1和转品8及非转基因七丝软粘（对照）为试材,对其秸秆化学成分进行分析,同时,采用傅立叶变换红外光谱（FTIR）和X 射线衍射（XRD）方法观察秸秆中不同部位纤维素结构的变化情况。研究结果显示：（1）转基因水稻转品1和转品8与对照在秸秆相同部位的化学成分含量不存在显著差异;（2）转基因水稻转品1和转品8及对照在秸秆相同部位纤维素的红外吸收峰形状基本一致,且品种间的吸收峰强度和结晶指数(O′KI和N〖KG-*2〗·〖KG-*4〗O′KI)也无显著差异;（3）转品1和转品8秸秆的X 射线衍射图与对照相似,且结晶度(CrI)与对照无显著差异。综上所述,广谱抗真菌基因的导入不会对水稻的化学成分、纤维素结构及晶体结构产生明显影响。     

蓝莓浓缩汁对小鼠疲劳的改善作用及机制初探

目的:对蓝莓浓缩汁进行抗疲劳功效评价,并对其所涉及的作用机制进行初步探究。方法:小鼠通过预筛选和强制游泳预处理后,以生理盐水为对照组,蓝莓浓缩汁高、低剂量和VC分别作为实验组。经给药及游泳处理后,观察各组小鼠的行为学特征,测定力竭游泳时间,检测血浆和脑组织匀浆中T-SOD活力、MDA含量、LDH活性及血浆中BUN含量的变化,并经HE染色察看小鼠组织病变状况。结果:与S对照组相比,高剂量蓝莓浓缩汁可明显改善疲劳小鼠的行为学特征,延长力竭游泳时间;在血浆和脑组织匀浆中,可增加T-SOD活性((136.92±10.39)%,(50.31±7.26)%),降低MDA含量((58.32±2.91)%,(50.89±2.91)%),提高LDH活性((72.79±19.11)%,(65.11±6.55)%),并减少血浆中BUN((46.92±3.36)%)的产生,(P0.01);还可防止细胞病变间隙的发生。低剂量蓝莓浓缩汁和VC处理组的改善效果不如高剂量组明显。结论:蓝莓浓缩汁有明显抗疲劳功效,所涉及的机制可能与其增强抗氧化酶活性,提高机体有氧代谢能力及改善机体物质代谢等有关。     

利用转座子构建靶向侵袭性抗肿瘤工程菌

转座子是一类在基因组上可以自由跳跃的移动序列,同时也是对微生物进行基因修饰和插入突变的有效工具,但尚未见有利用转座子导入革兰氏阴性菌E.coli Nissle1917菌株的报道.本研究通过构建p R6K转座载体,对肠道益生菌E.coli Nissle1917菌株进行了转座插入诱变,将假结核耶尔森菌的侵袭素基因inv和单核细胞增多性李斯特菌的溶血素基因hly随机整合至E.coli Nissle1917菌株的染色体上,从而使非致病性大肠杆菌E.coli Nissle1917获得侵袭哺乳动物细胞的能力.通过细胞体外侵袭实验发现,本研究所构建的工程菌对B16,HCT-116等肿瘤细胞有较好的侵袭活性,同时与抗肿瘤蛋白Azurin一起作用B16细胞,抗肿瘤效果显著增强,为进一步运用以大肠杆菌E.coli Nissle1917作为DNA疫苗或者基因治疗的载体开辟了新的技术途径.     

凉水国家自然保护区天然红松林遗传变异的RAPD分析

采用随机扩增多态DNA(random amplified polymorphic DNA RAPD)技术,研究了凉水国家自然保护区天然红松林的遗传变异水平及其分布规律。16个10bp长度的随机引物在8个实验样地内72个个体中共检测了96个位点,其中55个是多态位点。在种水平上,红松的多态位点比率为P=58.51%;Nei's遗传变异指数为H=0.2868;Shannon's指数为I=0.3654,所有的变异中,有92.47%的变异存在于样地内, 7.53%的变异存在于样地间。根据各遗传多样性在不同样地的分布,初步探讨了红松遗传变异水平与其种群发生及生境的相互关系。     

天蓝苜蓿单细胞培养植株再生

采用了改良K8p和Ay3两种培养基,对天蓝苜蓿进行单细胞培养并得到再生植株。来自天蓝苜蓿胚轴愈伤组织的细胞系,在单细胞培养中的愈伤组织分化率明显高于来自子叶愈伤组织的细胞系。改良K8p培养基较之Ay3培养基更利于天蓝苜蓿单细胞培养。生物素、泛酸钙和葡萄糖对细胞系的细胞分裂、愈伤组织诱导和分化有促进作用。赤霉素促进再生幼芽向植株发育。     

过表达钾转运蛋白基因trkH提高玉米的钾营养

钾是植物生长发育必须的营养元素,参与多种生理生化过程。土壤缺钾严重影响了玉米的产量和品质,通过遗传改良的方式提高玉米的钾营养是解决这个问题的有效途径。本实验室前期从海洋微生物宏基因组DNA中克隆得到细菌钾转运蛋白基因trkH,在酵母和烟草中验证了功能。为进一步分析trkH基因在玉米中的功能,以Hi-Ⅱ基因型玉米为转化受体,采用农杆菌介导法将trkH基因转入玉米,获得具有Baster抗性的独立转化苗21株。PCR检测结果表明trkH基因已成功转入到玉米基因组中。Bar试纸条检测结果表明Bar基因在蛋白水平上成功表达。将部分T₀代转基因植株与玉米骨干自交系PH6WC杂交,获得8个T₁代株系,半定量RT-PCR检测结果表明转基因植株在转录水平上均能表达。三叶一心期喷洒除草剂进行筛选,选择比例接近1：1的L3、L5和L7转基因株系进行PCR检测,统计检测结果并进行χ²测验,结果表明符合孟德尔分离定律。L3、L5和L7转基因株系玉米苗期的钾耗竭实验结果表明过表达trkH基因能够提高转基因玉米的K⁺吸收,为培育钾营养高效玉米新品种奠定基础。     

飞机草浸提液对斜纹夜蛾生长发育及种群参数的影响

[目的]明确飞机草浸提液对斜纹夜蛾生长发育和繁殖的影响。[方法]在实验室内利用不同浓度的飞机草水浸提液处理香蕉叶后喂养斜纹夜蛾幼虫,并观察记录斜纹夜蛾的生长发育情况。[结果]随着飞机草浸提液浓度的升高,斜纹夜蛾幼虫和蛹的发育历期逐渐延长,蛹重逐渐降低;母液处理下的幼虫和蛹发育历期最长,分别比对照处理延长了7.92和2.88 d,母液处理下的蛹重最轻,较对照降低了25.4%;飞机草浸提液处理降低了斜纹夜蛾低龄幼虫的存活率,对高龄幼虫和蛹的存活率影响不显著。随着飞机草浸提液浓度的升高,斜纹夜蛾种群净增值率R₀、内禀增长率r_m和周限增长率λ均逐渐降低,种群平均世代周期T和种群加倍时间t逐渐延长。[结论]飞机草对斜纹夜蛾具有一定的生防潜力,可应用于斜纹夜蛾的生物源农药开发研究。