从耐药鲍曼不动杆菌中发现β-内酰胺酶ADC基因和膜孔蛋白carO基因新的变异型

目的 调查一组耐药鲍曼不动杆菌中β-内酰胺酶基因和膜孔蛋白基因的存在和变异情况.方法 收集2010年1月至2010年12月浙江某医院ICU患者痰液标本中分离的多耐药和泛耐药鲍曼不动杆菌各10株,用分子鉴定法鉴定菌种,再用聚合酶链反应(PCR)及序列分析的方法分析34种β-内酰胺酶基因与膜孔蛋白carO基因.结果 本组20株耐药鲍曼不动杆菌共检出TEM-1型20株(100％)、OXA-23型10株(50.0％)、ADC-30型12株(60.0％)、ADC基因新的变异型ADC-60型8株(40.0％)(GenBank登录号:JQ692087).10株PDR菌均检出OXA-23型β-内酰胺酶基因,而10株MDR菌则均未检出OXA-23型β-内酰胺酶基因.20株耐药鲍曼不动杆菌膜孔蛋白carO基因均存在有义突变,19株测得序列相同,翻译成氨基酸序列后与鲍曼不动杆菌敏感株(SDF)比较,一致率为76.0％.8号株carO基因序列与其他19株测得DNA序列不同,第351位缺失了12个碱基并导致过早出现终止密码子.结论 本组鲍曼不动杆菌对β-内酰胺类药物耐药主要与产TEM、ADC、OXA-23和carO基因存在有义突变相关.OXA-23型β-内酰胺酶基因阳性是PDR菌耐碳青霉烯类药物的原因.ADC基因存在新变异型:ADC-60是国内外首次报道.     

基于熵值法的独立董事综合评价体系研究——心浙江民营上市公司为例

在公司治理领域中引入产业组织理论的S-C-P分析框架,研究将独立董事的价值实现划分为制度结构、独立董事行为表现以及治理效果三个维度。研究针对不同维度的不同影响因素选择具体的衡量指标,采用熵值法确定各指标和维度的权重,最终形成综合独立董事价值指数和三个分维度指数。运用浙江民营企业治理现状的相关数据对评价体系的有效性进行检验,结果表明,浙江民营上市公司的独立董事价值实现程度存在一定的梯度差异,且构成独立董事价值评价体系的各价值实现环节得分很不均衡。为此,企业应以防范内部代理问题和改善内部治理机制为目的,从制度结构和独立董事监督态度与行为两方面共同推动独立董事价值的最终实现。     

经桡动脉和经股动脉途径PCI治疗冠状动脉慢性闭塞性病变的可行性和安全性比较

目的:比较经股动脉和经桡动脉途径介入治疗冠状动脉慢性闭塞性病变的可行性和安全性。方法:选择2011年1月至2012年8月南京市第一医院收治的325例因为冠状动脉慢性闭塞性病变行经皮冠状动脉介入治疗的患者为研究对象,根据手术途径分为经桡动脉治疗(n=211)和经股动脉(n=114)组,回顾性分析和比较患者的基线特征、病变特征、手术经过和手术相关并发症。结果:经桡动脉和经股动脉组手术成功率分别为79.62%和80.70%(P0.05)。两组患者的性别、年龄、危险因素(高血压、糖尿病及高脂血症)以往PCI及CABG手术史及冠心病临床表现比较均无统计学差别(均P0.05);两组患者的慢性闭塞性病变病变数量、术中主动脉内球囊反搏(intra-aortic balloon pump,IABP)使用率、术后TIMI血流、手术时间、冠状动脉穿孔并发症的发生率比较无统计学差别(均P0.05),但经股动脉手术组较经桡动脉组术中血管内超声(intravascular ultrasound,IVUS)的使用率更高(57.01%vs45.02%,P=0.039)。结论:经桡动脉PCI治疗冠状动脉慢性闭塞性病变更安全、有效,其IVUS的使用率低于经股动脉PCI治疗,但对于复杂慢性闭塞性病变病变术者可能更倾向于采用经股动脉途径。     

B 超引导下甲状腺肿块细针穿刺细胞学诊断的临床病理分析

摘要目的：比较B 超引导下细针吸取穿刺和传统细针吸取穿刺在甲状腺肿块性质确定中意义。方法：使用B 超引导下细针吸取穿刺（UG-FNAB）和传统细针吸取穿刺技术（c-FNAB）对225 例甲状腺肿块进行穿刺活检,然后进行涂片,染色,镜检,结合临床作出细胞学诊断,并与组织切片诊断对照,比较两种方法的确诊率。结果：在UG-FNAB 检测病例中59.3%的结节位于甲状腺右叶,40.7%肿块位于左叶和峡部。87%的患者甲状腺机能正常,结节最长径平均为2.8± 1.1 cm,部分病例符合甲状腺恶性肿瘤的超声影像学改变。在本研究中诊断为甲状腺乳头状癌的病例细胞学和组织学特点均符合甲状腺癌形态学特点。在225 例研究病例中,总确诊率为72.89%（164/225）,其中UG-FNAB组确诊率为90.58%（77/85）,C-FNAB 组确诊率为62.14%(87/140) ,两组确诊率比较有显著性差异（P<0.05）。结论：本组研究数据显示比较C-FNAB,UG-FNAB在诊断甲状腺复杂性结节中具有更高的确诊率,特别是在C-FNAB方法不能得出明确诊断时。     

Chelex-100快速提取放线菌DNA作为PCR扩增模板

旨在建立有效扩增16S rRNA基因序列的放线菌DNA快速提取的方法。采用Chelex-100法提取放线菌DNA,使用PCR扩增16S rRNA基因序列评价提取核酸的质量。结果显示,Chelex-100法能够在10 min之内从放线菌中快速提取DNA,所提取的DNA可以直接用于PCR扩增反应,PCR扩增产物电泳条带清晰,符合理论预期结果。因此,Chelex-100法提取放线菌DNA可以作为16S rRNA基因序列PCR扩增的模板,该方法具有经济、简便、快速的特点,适合于放线菌菌株大规模地筛选和分类鉴定。     

甘菊ClCOL16基因的克隆与功能初步研究

CO基因通过光周期途径整合昼夜规律、光信号以及分生组织相关基因来调节开花时间,在植物成花过程中起着至关重要的作用。该研究利用RT-PCR法从甘菊(Chrysanthemum lavandulifolium)中克隆得到一个CO家族基因,命名为ClCOL16(GenBank登录号：AOA52174);采用农杆菌介导的花序浸染法转化拟南芥,抗性筛选并经过PCR鉴定得到T3代转基因植株;随机抽取6个转基因拟南芥株系与野生型(WT)共同于长日照环境(16 h/8 h光暗交替)培养,观察其表型,并于定植后37 d检测WT和转基因拟南芥植株叶片的ClCOL16表达,以明确甘菊ClCOL16基因在植物光周期调控开花中的作用,为进一步解析菊花花期调控机理奠定基础。结果显示：(1)甘菊ClCOL16基因含有一个1 278 bp的编码框,编码425个氨基酸;ClCOL16编码蛋白含有一个B-box和一个CCT保守结构域,为典型的CO家族第Ⅲ组成员。(2)NCBI同源比对分析显示,ClCOL16蛋白与除虫菊COL16蛋白(GenBank登录号：GEZ38716.1)的一致性最高,达到94.38%。(3)荧光定...