TAT-Cloan-DH-EGFP融合蛋白的原核表达及其在舞毒蛾幼虫体内的跨膜转导

【目的】为了探究滞育激素经昆虫取食的生物效应, 需设计一种能够加速跨膜运输的融合蛋白, 克服经昆虫消化道的降解作用。【方法】本研究以分月扇舟蛾Clostera anastomosis滞育激素基因Cloan-DH和TAT穿膜肽编码序列为基础, 构建TAT-Cloan-DH融合基因; 然后以增强型绿色荧光蛋白（enhanced green fluorescent protein, EGFP）为标签, 构建在pET-22b载体中。在0.2 mmol/L IPTG诱导下, 在大肠杆菌Escherichia coli BL21 Rosetta(DE3)中表达出TAT-Cloan-DH-EGFP融合蛋白。 再分别将表达有TAT-Cloan-DH-EGFP和EGFP融合蛋白的大肠杆菌BL21菌体拌入人工饲料,经舞毒蛾Lymantria dispar幼虫持续取食0, 8, 24, 48, 72和90 h后, 随机挑选试虫进行组织固定并制作石蜡切片, 选取中肠所在体段切片进行组织荧光分析。【结果】37℃ 0.2 mmol/L IPTG诱导条件下, 表达的TAT-Cloan-DH-EGFP融合蛋白的分子量为61 kD, 主要以包涵体形式表达, 融合蛋白约占细胞总蛋白含量的18.1%; 随着试虫取食含TAT-Cloan-DH-EGFP融合蛋白饲料的增加, 虫体组织的绿色荧光强度逐渐增加, 取食72 h后, 组织荧光强度达到最高。【结论】实验结果说明融合蛋白TAT-Cloan-DH-EGFP可以通过消化道横向跨膜运输, 到达虫体其他组织, 且该过程与蛋白的摄入量成比例。     

利用植物多级净化广州污染河涌水体及景观修复设想

对广州市水系污染状况及其综合治污的重要性和必要性进行了分析,对以往靠比较单一的污水处理厂处理污水效果较差的原因从多个角度进行了探究.对于采取建立利用植物多级处理、净化水污染物的立体处理系统的原理、必要性及可行性进行了分析;针对广州市土地紧张,在水厂内难以建立大型植物氧化塘的特点,提出了在各个河涌建立各级以高等植物为主的植物净化系统等措施,对主要技术措施进行了论述,并对其所能达到的改善水生态系统、实现良好的景观效益和生态效益方面进行了深入的探讨.     

微生态调节剂－乳果糖对肝损伤和内毒素血症防护效果的研究

本文研究了乳果糖口服对急性肝损害的防治效果。发现：（１）乳果糖灌服可迅速减少正常大白鼠门脉血中的内毒素。（２）给用Ｄ－氨基半乳糖破坏肝脏,乳果糖做预防性及治疗性口服,可明显地保护肝细胞及减轻内毒素血症并减轻肝组织损害。（３）首创了一种暴发性肝衰竭模型,即用内毒素叠加Ｄ－氨基半乳糖致小鼠肝衰竭模型。其肝脏损害速度与程度及２４小时死亡率远大于单用上述二种中毒成分之一。用乳果糖口服可明显预防此种暴发性肝坏死之发生,但用乳果糖腹腔注射则毫无保护作用。乳果糖只经口服通过对肠道菌群的调整才有降低内毒素血症效果。（４）用ｓｈｗａｒｔｚｍａｎ反应证明乳果糖对内毒素的生物活性没有阻断或抑制作用。本文证明乳果糖对Ｇａｌ－Ｎ致肝坏死的保护作用,并经临床观察证明对肝脏病人内毒素血症的治疗效果。     

沙生柽柳扦插生根过程插穗相关理化特征分析

选取沙生柽柳半木质化枝条进行苗床扦插,通过实验测定插穗生根过程中内源激素(IAA、GA3、ZR、ABA)含量、可溶性营养物质(糖、蛋白质)含量及相关氧化酶(PPO、POD、SOD、IAAO)活性的动态变化特征,探讨沙生柽柳插穗扦插生根机理。结果表明:(1)沙生柽柳插穗内源激素含量随生根进程而发生变化,其中,IAA含量在扦插35d最大,并出现较大的波动变化;ZR含量在扦插55d前后变化明显,呈现低水平向高水平转化趋势;ABA、GA3含量依次呈先升高后降低再升高的变化过程,并在扦插15d和55d(80d)呈现变化的峰值和谷值。(2)沙生柽柳扦插生根与相关氧化酶活性密切相关,其中,POD、IAAO活性在插穗扦插35d后长时间保持较高水平,直至插穗生根后POD活性明显降低,IAAO活性有所增加;PPO、SOD活性则在插穗扦插15d保持较高活性,且PPO活性的变化均匀,SOD活性的高低交替变化明显。(3)在沙生柽柳扦插生根期间,插穗可溶性糖含量呈现生根前消耗减少与生根后积累增加两大变化过程,可溶性蛋白质含量表现为扦插后逐步积累增加的变化趋势。研究表明,高水平的IAA、ZR和低水平的GA3、ABA共同调控着沙生柽柳插穗生根;IAA能够通过促进插穗POD、PPO、IAAO活性变化来影响生根,较高的POD、IAAO活性可调节插穗IAA水平,高水平的PPO活性则催化插穗IAA-酚酸复合物的形成,进而诱导插穗生根。     

Ca2+信号途径参与稻瘟病菌分生孢子萌发及附着胞形成的调控

为了确定Ca²⁺信号途径是否参与、在哪一时期参与稻瘟病菌分生孢子萌发及附着胞形成过程的调控,用四种可从不同位点阻断Ca²⁺信号途径的抑制剂分别处理分生孢子,观察抑制剂对孢子萌发及附着胞形成过程的抑制作用。结果表明:Ca²⁺螯合剂EGTA、Ca²⁺通道抑制剂Verapamil、抑制磷脂酶C活性的抑制剂U-73122、影响钙调素与钙调素依赖蛋白激酶作用位点的抑制剂KN-93,随着浓度的增加,对孢子萌发和附着胞形成过程的抑制作用明显增强;同一浓度下,抑制剂对附着胞形成过程的抑制作用大于孢子萌发过程;抑制剂影响孢子萌发和附着胞形成过程在萌发早期(1~4h)最有效;在完全被抑制、不能萌发的孢子内出现了许多颗粒状囊泡;抑制剂可使附着胞形态明显变小甚至不能形成。以上结果表明钙信号途径参与了稻瘟病菌孢子萌发及疏水条件下附着胞形成过程的调控。     

内毒素血症致胰岛素抵抗的机理

内毒素（ｅｎｄｏｔｏｘｉｎＥＴＸ）是革兰氏阴性杆菌细胞壁的成分之一,其化学结构为脂多糖（ｌｉｐｏｐｏｌｙｓａｃｈａｒｉｄｅｓＬＰＳ）。内毒素是在肠道细菌死亡溶解时被释放出来。结肠内的内毒素部分可被细菌灭活,部分经门静脉进入肝脏,在枯否氏细胞内解毒。如...     

肠道微生态调节剂（乳果糖）对肝坏死大鼠脑内神经递质的影响

本文用高效液相色谱电化学检测和氨基酸分析仪等技术证明,大剂量Ｄ－氨基半乳糖引致的急性肝坏死大鼠,其脑内单胺神经递质（儿茶酚胺,５－羟色胺及其代谢产物）及血清氨基酸谱均有紊乱。预先用国产乳果糖灌服,可明显纠正此种紊乱。因此,对乳果糖治疗肝性脑病的机理补充了新的认识,并证明清除肠道腐败物,调整肠道菌群对脑内神经递质代谢的良好影响。     

生物炼制技术的发展

随着石油资源的日益枯竭,化石经济面临严峻的挑战,而以町再生生物质资源为基础的生物炼制正展现出其广阔的前景。通过石油炼制与生物炼制的对比,分析了生物炼制任各个方面所具有的优势。并以生物乙烯为例,阐述了其发展现状、存在问题及解决途径、未来发展趋势等。[编者按]     

广东省兴宁县红细胞葡糖-6-磷酸脱氢酶缺乏症的基因频率

遗传性红细胞葡萄糖-6一磷酸脱氢酶 (GOD）缺乏症在我国长江以南各省,尤其是 华南地区比较多见。它是导致伯氨哇嘛类药物 性溶血、蚕豆病、某些感染性溶血以及新生儿黄 疽的重要原因。了解此种致病基因在群体中的 分布,对溶血性疾病的防治和群体遗传学、遗传 流行病学以及人类学都有理论和实践意义。我 国广东、广西、云南、浙江、湖南、河南、四川、福 建、江苏、宁夏等省（区）某些地区都对本症的发 生率（incidence）进行过一些调查。但由于调查 对象的挑选不够严格,以及多采用间接反映 GOD活性的高铁血红蛋白还原试验筛选,故 难以准确计算本症的基因频率。我们于1980 年3月,采用了特异性较强的四氮哩蓝纸片法, 结合荧光斑法及四氮哩蓝定量法,对经严格挑 选的广东兴宁县居民和学生1,545人进行了 GOD缺乏症的群体普查,现将结果报告如下。