辣木叶黄精多糖组合物的抗疲劳作用及其机制研究*

目的: 探讨辣木叶黄精多糖组合物的抗疲劳作用,并探讨相关的机制。方法: 将30只雄性昆明小鼠随机分为正常对照组(C)、组合物组(MP),每组15只。C组灌胃蒸馏水,MP组灌胃组合物,每组灌胃体积均为0.5 ml。每日灌胃,处理14 d后进行负重游泳实验,按小鼠体质量的3%进行尾部负重,记录力竭游泳时间。在另一项实验中,将48只雄性昆明小鼠随机分为安静对照组(QC)、游泳对照组(SC)、组合物组(MP),每组16只。QC和SC组灌胃蒸馏水,MP组灌胃组合物,灌胃体积均为0.5 ml,每日灌胃,处理14 d。实验第15日,灌胃30 min后,QC组立即取血、肝脏和后腿骨骼肌;SC和MP组进行90 min非负重游泳实验,游泳结束后取血液、肝脏、后腿骨骼肌。采用试剂盒测定血清、组织中的疲劳相关指标、氧化/抗氧化指标、能量代谢指标。结果: MP组小鼠力竭游泳时间较C组显著延长(P<0.05)。与对照组比较,非负重游泳显著降低小鼠血糖和血清谷胱甘肽(GSH)水平、肝糖原和肝脏ATP含量,抑制肝脏超氧化物歧化酶(SOD)、乳酸脱氢酶(LDH)和ATP酶活性,以及肌肉谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性(P<0.05)。而血尿素氮(BUN)和血清丙二醛(MDA)水平显著升高(P<0.05)。与SC组比较,MP显著增加小鼠血糖和肝糖原含量,增加血清GSH水平、肝脏SOD活性、肌肉GSH-Px活性,增强肝脏LDH、ATP酶活性,增加肝脏ATP含量(P<0.05),降低血清BUN(P<0.05)。结论: 辣木叶黄精多糖组合物具有抗疲劳作用,抗氧化和改善能量代谢可能是其发挥作用的重要机制。     

促甲基化因子对西索米星发酵的影响

研究发现,发酵培养基中添加2．0—3．0g,／L蛋氨酸或7．5—10．0mg,／L氯化钴可明显促进西索米星的合成。蛋氨酸的添加时机和添加方式对西索米星产物合成的作用明显不同。在产物合成中前期（30-48h）添加蛋氨酸的效果最佳。当发酵液中蛋氨酸初始浓度为0．656g／L时,与在产物合成初期一次性添加相比,1．5g／L蛋氨酸在产物合成初期、中期和后期均分成3次添加的效果更优,当发酵至91h结束时,发酵液中西索米星浓度可达0．70g／L。     

胰岛素瘤相关蛋白-2在HEK293中的重组生产及抗原性分析

胰岛素瘤相关蛋白-2（insulinoma-associated protein-2,IA-2）,是属于酪氨酸磷酸酶样蛋白家族的跨膜糖蛋白,也是诊断1型糖尿病的重要自身抗原,相关产品已在欧美国家上市。目前,商业化的IA-2抗原主要为重组IA-2ic结构域,或从牛胰岛中天然提取的IA-2,其中重组IA-2抗原在临床上存在弱阳性漏检的问题,无法完全替代天然提取IA-2抗原。本研究利用HEK293表达系统探究IA-2的重组生产。通过瞬时表达IA-2的第449-979位氨基酸跨膜片段（IA-2 transmembrane fragment,IA-2 TMF）这一天然形式的膜蛋白,并优化表达条件和膜蛋白溶解条件,纯化后膜蛋白得率为0.78 mg/L细胞发酵液。随后,通过酶联免疫吸附（enzyme linked immunosorbent assay,ELISA）,对比IA-2 TMF与RSR rhIA-2的抗原活性,检测了77位1型糖尿病患者血清和32位健康志愿者血清,测试的结果通过接受者操作特性曲线（receiver operating characteristic curve,ROC）表征敏感性和特异性。结果表明：IA-2 TMF的敏感性为71.4%（55/77）,而RSR rhIA-2的敏感性为63.6%（49/77）,2种抗原特异性均为100%。2种抗原在特异性上无明显差异,而IA-2 TMF的敏感性略优于进口金标RSR rhIA-2抗原。综上所述,本研究基于HEK293重组表达的IA-2 TMF能够作为1型糖尿病体外诊断试剂开发的原料。     

杂交瘤细胞的大量培养

杂交瘤细胞的大量培养是一项迅速发展的技术。本文评述了杂交瘤细胞培养条件和代谢调控方面的研究进展,包括反应器培养中的过程参数优化、细胞损伤和保护、营养物质利用和有害副产物的形成、细胞生长和单抗分泌的动力学以及长期培养的稳定性等问题。同时,本文也讨论了在生物反应器中培养杂交瘤细胞和操作模式和控制策略的研究工作,特别是近年来备受重视的灌注培养和补料培养。     

不同甲醇流加策略对重组毕赤醇母高密度发酵生产水蛭素的影响

考察了不同甲醇流加策略对毕赤酵母高密度发酵生产水蛭素的影响。溶氧控制法不能有效地防止甲醇的过量流加。气相色谱离线检测法虽然防止了甲醇流加过量 ,但甲醇浓度的波动较大。利用甲醇传感器在线检测控制甲醇的流加可维持较恒定的甲醇浓度。在流加甲醇的同时 ,以限制性速率流加甘油可以增加表达期间的能量供应 ,提高产物的表达量。经优化后 ,采用甲醇甘油混合流加时细胞干重达到 16 2g L ,水蛭素活性达到 2 4×10 4ATU mL ,即 1 7g L。     

基于流域单元的海湾农业非点源污染负荷估算——以莱州湾为例

生产力较高、生物多样性丰富、人类利用较早的区域之一,也是全球生态系统中最有价值和最受人类关注的区域之一。同时,海湾也是全球变化反映最敏感、陆海相互作用过程最激烈的地带,是人类活动最频繁的地域。开展海湾入海污染物总量控制研究对保护海洋环境和维护生态健康,协调和促进沿海经济发展与海洋的合理开发利用,实现海洋经济的可持续发展具有重要意义。入海污染物总量是开展海湾环境保护的重要指标,因进入海湾的河流往往较多,河流入海污染物的估算受监测频率、流量的季节变化等因素影响,存在很多困难。农业非点源污染是我国海湾入海污染负荷的重要来源。基于DEM(SRTM Data,90 m分辨率),借助美国ESRI公司的ARC/INFO软件中的ArcHydro模块,进行莱州湾主要入海河流水文分析,利用GIS提取河网,划定流域边界,并划分汇水区和子流域,为流域农业非点源污染入海总量的估算提供基础数据平台。在此基础上,与该流域土地利用专题图叠加,计算各个子流域内不同土地利用类型的面积,利用主要污染物排放系数和入河系数,估算农业污染入海总量。结果表明:COD、NH3-N、TN和TP的每年入海排污总量分别约为236933、23956、53684 t和15922 t。COD、NH3-N、TN和TP的排放量占总排放量的比例分别为71.69%、7.25%、16.24%和4.82%,这说明莱州湾入海主要污染物为COD。在陆海统筹理念指导下,以入海河口为源头,采取溯源追踪的思路,确定影响海湾入海污染负荷的流域单元,提供一种海岸带地区农业非点源负荷估算方法,可为莱州湾入海污染物总量调控提供科学依据,也可作为海岸带综合管理过程中确定陆地范围的参考。     

瞬时基因表达可溶性的VEGFR2: I-IV

通过RT-PCR的方法从三个月的流产绒毛组织中克隆目的基因VEGFR2 (Vascular endothelial growth factor receptor 2, 血管内皮细胞生长因子受体2) 胞外I-IV区, 连接到真核表达载体上构建了重组表达载体。首先在无血清悬浮培养的HEK293细胞中, 使用报告基因GFP(Green fluorescence protein, 绿色荧光蛋白)优化转染条件, 发现在转染时DNA: PEI=1:2 (W/W)、1.5 mg DNA/106 cells及开始转染4 h内使用无血清、摇床(120 r/min)时可以达到最佳的转染效率和细胞数量。在确定转染条件之后, 将构建的表达载体分别在HEK293细胞、COS-7细胞和CHO-K1细胞中进行瞬时转染表达, 结果发现仅在CHO-K1细胞的培养上清中检测到目的蛋白的表达。瞬时转染CHO-K1细胞至总体积约为1.5 L, 由于目的蛋白的羧基端有8-His标签, 通过Ni2+-IDA柱纯化得到5 mg左右的目的蛋白。     

北京青少年科技创新市长奖揭晓首届

“联想1+1”第23届北京市青少年科技创新大赛于3月28—31日在海淀展览馆举行。参加决赛的项目在海淀展览馆中进行了展示交流与竞赛答辩,共有一万六千余人次参观。经大赛评委会评议,共评出一等奖68项,二等奖118项,三等奖268项。同时,首次“北京青少年科技创新市长奖”也在大赛期间揭晓。为了鼓励青少年参加科技创新活动,本届大赛正式设立了“北京青少年科技创新市长奖”,该奖每年评出5名。北京市第一零一中学的马尧,北京市第四中学的王思远,北京市第一零一中学的陈炜,北京市第八十中学的孟奂和北京市第六十五中学的曹鹏飞成为了首次“市长奖…     

夏玉米叶片气体交换参数对干旱过程的响应

目前已经开展了大量的干旱对作物叶片气体交换参数影响的研究,但关于作物叶片气体交换参数对干旱过程的响应及其关键阈值的研究仍较少。基于夏玉米七叶期开始的5个初始水分梯度的长时间持续干旱模拟实验资料,分析了不同强度持续干旱过程中夏玉米叶片气体交换参数(净光合速率Pn,气孔导度Gs,蒸腾速率Tr,胞间CO_2浓度Ci和气孔限制值Ls)的变化规律及其关键阈值。结果表明,玉米的净光合速率(Pn),蒸腾速率(Tr)和气孔导度(Gs)在干旱发生初期呈大幅度下降,但随着干旱持续会出现一定的适应性。利用统计容忍限方法确定了夏玉米拔节期Pn,Tr和Gs响应干旱的临界土壤相对湿度(0—30cm)分别为53%,51%和48%,对应的临界叶含水率分别为81.8%,81.3%和81.2%。夏玉米光合作用由气孔限制向非气孔限制转换的0—30cm土壤相对湿度均为44%±2%,对应的叶含水率均为77.6%±0.3%。研究结果可为夏玉米干旱发生发展过程的监测预警提供依据。     

春玉米最大叶面积指数的确定方法及其应用

玉米叶面积指数达到最大时光合产物基本停止向营养器官分配,是玉米进入生殖生长阶段的标志.对锦州农田生态系统野外观测站2005-2011年多品种的春玉米大田试验资料分析发现春玉米最大叶面积指数出现于吐丝后2周左右,提出了春玉米叶面积指数达到最大时的积温指标,即播种至叶面积指数最大时的≥10℃有效积温为1085.3℃·d和(或)出苗至叶面积指数最大时的≥10℃有效积温为1010.4℃·d.在此基础上,采用修正的Logistic方程构建了春玉米相对叶面积指数动态普适模型.研究结果为准确模拟春玉米叶片生长及光合产物分配提供了依据.