前脑特异性CCKR-2双转基因小鼠的繁育及基因鉴定

摘要 目的：繁殖及鉴定可调控前脑特异性胆囊收缩素受体2（Cholecystokinin receptor-2,CCKR-2）双转基因小鼠（tTA/tetO- CCKR-2 double transgenic,简称dtg）,为进一步研究CCKR-2在焦虑相关疾病,如焦虑症、恐惧行为、创伤后应激障碍等发病过程中的作用及分子机制提供实验模型。方法：（1）利用α-CaMKII/tTA单转基因小鼠与tetO/CCKR-2单转基因小鼠杂交,所得子代尽可能远亲繁殖获得dtg小鼠,提取子代鼠尾基因组DNA,采用PCR法及琼脂糖凝胶电泳法鉴定PCR产物以确定其基因型;（2）采用原位杂交方法验证CCKR-2双转基因前脑特异性表达,筛选CCKR-2双转基因型及前脑特异性表达者作为继代种鼠和实验用鼠。结果：（1）PCR凝胶电泳图显示清晰的tTA（350 bp）和CCKR-2（550 bp）条带,野生型无条带显示,表明琼脂糖凝胶电泳结果与dtg模型预期基因片段大小相符;（2）原位杂交结果显示dtg小鼠前脑区域有强烈的CCKR-2表达而野生型小鼠不明显。此结果表明dtg双转基因小鼠在本实验室的成功建立与繁殖及继代,同时繁殖出更多的dtg小鼠。结论：通过正确的饲养繁育和基因鉴定方法能成功获得dtg双转基因小鼠,为本实验室进行后续相关研究奠定了基础。     

促卵泡激素结合片段通过PI3K/Akt-cyclinD1通路抑制卵巢癌细胞增殖活性

目的:研究促卵泡激素（FSH）结合片段对卵巢上皮性细胞癌细胞株hey增殖活性的影响。方法:应用卵巢上皮性细胞癌细胞株hey作为实验对象,分别加入FSH、FSH结合片段、FSH+FSH结合片段。用四甲基偶氮唑蓝（MTT）法检测卵巢癌hey细胞的生长状况,Western blot检测cyclinD1、Akt、pAkt分子的表达。结果:FSH对卵巢癌hey细胞的生长有明显的促进作用,细胞生长活性提高21%。FSH结合片段对卵巢癌细胞的生长有明显抑制作用,对细胞平均抑制率为22%,且能下调cyclinDI的表达,在2.5×10^-9Mol/L达70%。FSH结合片段对FSH有竞争抑制作用,细胞抑制率为18%,能抑制FSH上调cyclinD1的作用,抑制率为61%。FSH能上调pAkt的表达,对Akt的表达没有明显影响,在40mIU/ml的浓度时pAkt/Akt上调率达224%。FSH结合片段对Akt的表达没有明显影响,但能明显下调pAkt的表达,且呈时间依赖性（在1 5分钟时达66%）和剂量依赖性(在2.5×10^-9Mol/L达31%)。FSH结合片段能抑制FSH上调pAkt的作用,抑制率为80%。结论:FSH结合片段可通过抑制FSH诱导的PI3K/Akt-cycl-inD1信号通路进而抑制上皮性卵巢癌hey细胞的增殖活性。     

老年住院患者口咽部念珠菌定植状况及菌种分布调查

目的调查老年住院患者口咽部念珠菌定植状况及菌种分布特点,为有效预防念珠菌感染提供参考。方法对解放军第44医院收治的894例住院患者口咽部念珠菌定植状态进行调查分析。结果894例住院患者口咽部标本共培养出念珠菌121株,念珠菌定植率为13．5％,老年患者的定植率高于非老年患者。念珠菌定植以白色念珠菌所占比例最大,占74．5％。年龄≥80岁、肺部基础疾病的存在及使用抗菌药物患者口咽部念珠菌定植率高于普通患者,两者比较差异有统计学意义（P〈0．05）。结论老年患者口咽部念珠菌定植率较高,菌种分布以白色念珠菌最为常见。念珠菌定植与患者年龄、肺部基础疾病的存在及抗菌药物使用情况密切相关。     

意大利蜜蜂工蜂唾腺和中肠消化酶活性比较研究

对意大利蜜蜂 Apis mellifera ligustica L工蜂唾腺和中肠中淀粉酶、蛋白酶、蔗糖酶、果胶酶和海藻糖酶5种消化酶进行活性测定,发现巾肠的蛋门酶和蔗糖酶活性较唾腺高,有显著性差异;唾腺的果胶酶活性较中肠高,有显著性差异;唾腺与中肠的淀粉酶和海藻糖酶没有显著性差异.表明意大利蜜蜂工蜂对蔗糖和蛋白的消化主要由中肠分泌的消化酶来完成,唾腺起辅助作用;对果胶的消化主要在唾腺,中肠起辅助作用;而在淀粉和海藻糖的消化过程中唾腺和中肠都有很重要的作用.     

山稻蝗不同种群的遗传多样性研究

应用RAPD技术对我国长江以南丘陵山区6个种群山稻蝗Oxya agavisa进行了遗传多样性分析.10条随机引物共扩增出90条清晰稳定的片段,其中多态性位点为87个,总的多态位点百分率96.7%.采用Shannon's遗传多样性值和Nei's基因多样性指数分析种群内的遗传多样性及种群间的遗传分化,结果表明山稻蝗湖南通道种群遗传多样性最高;两种指数估算的种群间遗传分化系数(44.5%,41.3%)均表明:山稻蝗种群内的遗传多样性稍大于种群间的遗传多样性.分别用Between-groups linkage、UPGMA和NJ法构建所有个体间的聚类关系图,聚类结果分析表明:位于同一纬度附近且地理上相距较近的种群优先相聚,聚类关系与生境条件、地理距离间呈现出一定的相关趋势.     

生物钟与肠道菌群调控哺乳动物能量代谢研究进展

生物钟作为哺乳动物进化过程中产生的一种适应机体内外环境昼夜变化的内在机制,控制着机体的睡眠-觉醒及进食等生理活动,使生物体在每个昼夜周期的能量需求和营养供给呈现出与环境相适应的节律性变化。哺乳动物的肝脏、骨骼肌、胰腺、心血管等组织的葡萄糖代谢、脂质代谢和激素分泌等都受到生物钟的调控。作为宿主特殊的“器官”,肠道菌群在共同进化过程中与宿主微环境(组织、细胞、代谢产物)构成了一个微生态系统,在宿主对营养物质的消化和吸收过程中发挥重要作用。近年来的一些研究证据表明,肠道菌群的构成、数量、定植以及功能活动均具有显著的昼夜节律性变化,而这与生物钟调控下的各种生理功能变化是密切相关的。此外,有研究发现肠道菌群可通过分解宿主无法消化的膳食纤维等营养物质产生短链脂肪酸等代谢产物,部分代谢产物具有调节宿主生物钟并影响代谢的功能。本文将重点阐述生物钟与肠道菌群的互作及其对哺乳动物能量代谢的影响,以期为代谢性疾病的预防和治疗提供新的线索和思路。     

利伐沙班和达比加群酯在高龄非瓣膜性房颤患者中的有效性及安全性观察

目的:探讨利伐沙班及达比加群酯在高龄老年非瓣膜性AF患者中应用的有效性及安全性。方法:回顾性分析2016年9月至2018年3月于我院心血管内科住院治疗的高龄非瓣膜性房颤患者202例(利伐沙班组116例,达比加群酯组86例),平均随访9个月,比较两组患者基本临床资料、栓塞事件和临床相关出血事件。结果:利伐沙班组和达比加群酯组各有4例患者达到有效性终点,两组药物有效性无显著性差异(P0.05)。其中,缺血性脑卒中是最常见的栓塞事件(4/8)。利伐沙班组共有15例患者发生出血事件,达比加群酯组共有10例患者发生出血事件,两组药物安全性亦无显著性差异(P0.05)。胃肠道出血是最常见的出血事件(7/25)。结论:利伐沙班及达比加群酯在高龄老年非瓣膜性AF患者中应用的有效性及安全性均无明显差异。     

宫颈癌患者液基细胞学与组织学诊断的比较分析 仇

目的:通过对液基细胞学检测(TCT)与组织学活检的比较分析,探讨TCT出现漏诊的原因。方法:收集83例宫颈癌患者的宫颈活检组织蜡块和宫颈脱落细胞标本,组织蜡块行常规病理切片检查,脱落细胞标本进行TCT检测。结果:和组织病理学诊断结果比较,这些患者的TCT诊断漏诊18例。进行过抗HPV治疗的宫颈癌患者,其TCT漏诊率明显高于未治疗者(P<0.05)。结论:TCT在宫颈癌筛查中存在一定的漏诊,其产生的原因与癌细胞分化程度、宫颈糜烂程度、非诊断细胞的干扰、不当的采集方法及抗HPV治疗有关。     

引起阿尔茨海默病的γ-分泌酶作用机制

γ-分泌酶剪切C99形成的Aβ在脑中的聚集认为是阿尔茨海默病的元凶,.GXGD结构域",含水腔隙"的发现使得对γ-分泌酶有了进一步认识。本文对γ-分泌酶的结构、作用机制及其抑制剂的研究做综述。