竞争性RT-PCR测定法及BMP-2mRNA的定量检测

建立竞争性 PCR方法 ,以期用于转录水平基因表达的定量研究 .以检测大鼠颅骨骨细胞总RNA中骨形态发生蛋白 - 2 ( BMP- 2 ,bone morphogenetic protein- 2 ) m RNA含量为例 ,构建大鼠BMP- 2基因的竞争模板 ,以之为内对照进行竞争性 PCR.PCR反应结束后 ,电泳、拍照 ,扫描所扩增条带密度 ,作回归方程 .根据回归方程 ,计算出正常 7d Wistar大鼠颅骨总 RNA中 BMP- 2 m RNA含量为 1 .1 2 5amol/μg RNA.结果显示 ,成功构建了大鼠 BMP- 2基因的竞争模板 ,建立了可以测定大鼠颅骨骨细胞总 RNA中 BMP- 2 m RNA含量的竞争性 PCR方法 .     

中国淡水硅藻新记录——偏肿内丝藻兴凯变种

于2016年5月对浙江省仙居国家公园进行藻类多样性调查时,发现了中国淡水硅藻的1个新记录种——偏肿内丝藻兴凯变种[Encyonema ventricosum var.hankensis(Skvortzov) RodionovaPomazkina]。该文采用光镜和扫描电镜对偏肿内丝藻兴凯变种浙江种群的形态特征进行了观察和描述,并将其与该种的其他地理种群及内丝藻属其他相似物种的形态特征进行比较,同时讨论了该物种的生境特征。结果表明:(1)偏肿内丝藻兴凯变种壳面均具明显背腹之分,背缘明显拱起,腹缘轻微波曲;端部呈头状至喙状。(2)偏肿内丝藻兴凯变种浙江地理种群在背部中央区域具一孤点,而其兴凯种群对孤点这一特征未有描述。(3)偏肿内丝藻兴凯变种在俄罗斯的兴凯湖和贝加尔湖等地有分布,该种在中国是首次报道。     

杂色鲍人工繁殖的初步研究

杂色鲍(Haliotis diversicolor Reeve)是一种经济价值很高的海产软体动物,肉味鲜美,可鲜食或制成鲍干,为海产“八珍”之一。鲍壳即中药“石决明”,是我国重要的南药,据《本草纲目》记载,具平肝明目之功效。 杂色鲍产于我国东海、南海一带,主要分布广东的南澳、靖海、南碣、遮浪、宝安、(石匈)州岛、徐闻、海南岛和福建的东山、平潭、漳浦、龙海、晋江、南日岛等地。     

喀喇昆仑山-喜马拉雅山脉生态区类型与保护地空间分布格局

喀喇昆仑山-喜马拉雅山脉是泛第三极区域的重要组成部分。对中国与阿富汗、巴基斯坦、印度、尼泊尔、不丹和缅甸等6国交界的喀喇昆仑山-喜马拉雅山脉地区生态区和保护地分布开展研究。喀喇昆仑山-喜马拉雅山脉地区总面积902843.76 km²,跨古北界和东洋界两大全球重要的生物地理区域,分布有14个生态区,其中有55处保护地。保护地由国家公园和自然保护区组成,主要分布在东喜马拉雅亚高山针叶林、喜马拉雅亚热带阔叶林和东喜马拉雅阔叶林3个生态区内,面积为159063.30 km²,占喀喇昆仑山-喜马拉雅山脉地区总面积的17.62%。保护地中有41处国家公园,占保护地总数的74.5%;有25处为多国毗邻,占总数的45.45%。保护地的地理集中指数都大于完全平均分布值（37.796）,空间分布呈集聚状态;其中自然保护区分布的不均衡度高于国家公园,分布在中国,尼泊尔和印度三国境内。核密度分析显示中尼边境与中印边境区域的保护地分布集中度高。20世纪30年代开始,特别是80年代以来各国建立保护地,目前已经形成全球著名的保护地集群带。对于进一步推进喀喇昆仑山-喜马拉雅山脉地区国家公园跨境合作具有重要意义。     

草原红牛IGF—I基因5’调控区序列的生物信息学分析

胰岛素样生长因子-I（IGF—I）基因为多启动子基因,也是影响动物生长发育和肉用性状的重要候选基因。在克隆草原红牛IGF-I基因5’调控区1954bP的基因组序列基础上,利用生物信息学软件,分析了IGF—I5’调控区的启动子结构;预测出评分在95分以上的转录因子结合位点有71个;分析结果没有发现CpG岛和TATA—box。研究结果为进一步研究IGF-I转录效率以及对草原红牛生长和肉用性状的影响奠定基础。     

利用Pseudonocardia sp.微生物转化制备骨化醇类化合物

【背景】近年来骨化醇类化合物(活性维生素D及其类似物)在肿瘤治疗、免疫调节中的作用逐渐被发现,药用价值显著,但目前化学合成法制备困难,因此高效制备骨化醇类化合物成为研究热点。【目的】利用假诺卡氏菌(Pseudonocardiasp.)转化骨化醇类底物分子并提高转化率。【方法】从化学合成方法常用的原料及中间体中筛选能被有效转化的底物分子,利用单因素及正交试验对转化条件进行优化。【结果】筛选到阿法骨化醇(Alfacalcidol,1α-(OH)VD3)、艾地骨化醇中间体(Eldecalcitolintermediate, AD-M07)、帕立骨化醇中间体(Paricalcitol intermediate,PC-M07) 3种底物分子,分别被转化为骨化三醇(Calcitriol,1α,25(OH)2VD3)、艾地骨化醇中间体(Eldecalcitol intermediate,AD-M08)、帕立骨化醇(Paricalcitol,PC)。确定最优转化条件:蛋白胨20.0 g/L,葡萄糖15.0 g/L,部分甲基化的β-环糊精(PMCD) 0.5%(质量体积比),转化温度25-30°C,接种量5%-10%(体积比),转化时间72、72、96 h,底物浓度1.2、0.6、0.6mg/mL,初始pH6.0-8.0。在此条件下3种底物的最高转化率分别达到85%、96%、75%。【结论】通过转化条件的优化3种产物的转化率大幅提高,为更加快速高效地利用微生物转化法制备骨化醇类化合物提供参考。     

内质网及其标志酶在离体培养脊髓神经元中的发育变化

本文采用形态学与细胞化学相结合的方法,在超微结构水平观察了与突触酶、受体和结构蛋白的合成有关的内质网和高尔基复合体、GERL以及它们的标志酶的发育变化。结果表明神经元本身有一发育过程,发育早期的细胞器较少,成熟时逐渐增多,以内质网和高尔基复合体最为明显。用G一6一Pase、TPPase和CMPase可分别标记内质网及同源结构、高尔基复合体的成熟而膜囊和GERL。这些酶的出现及阳性水平与神经元的发育呈同步关系。可作为判断细胞分化程度和功能状态的指标。G-6-Pase还分布在突触后树突的内质网中,突触形成大都从含G-6-Pase阳性内质网的树突开始。本文对内质网及G-6-Pase在神经元中的发育变化及功能进行了讨论。     

鲤脑促性腺激素释放激素分布的进一步研究

鱼类促性腺激素释放激素GRH核群与神经纤维的分布,潘家秀等1979曾报道11月份采集的卵巢处于Ⅳ期准备过冬的鲤鱼(Cyprinus carpio)颅腔经甲醇注射后下丘脑GRH的酶免疫标记定位结果:免疫活性GRH(ir-GRH)核群在视前区、视前隐窝区、前脑侧束区、下丘脑外侧区、视交叉等处均有ir-GRH纤维分布。本文报道的是2月份采集的鲤,即垂体促性腺激素GTH含量最丰富时(曹术超等1975),怀卵鲤脑及垂体ir-GRH的酶免疫标记。 结节外侧核(NLT)对于鱼类生殖功能有调节作用(Peter等,1978;Roi,1973),然而11月鲤鱼NLT未能染出ir—GRH。本文除采用另一季节的鲤鱼继续标染外,也试用抗     

皇甫山蝶类资源及区系的研究

通过对安徽省皇甫山自然保护区蝶类资源的调查,共发现蝶类４８种,隶属８科３７属,所发现的蝶类中除枯叶峡蝶未采到标本外,其它均有１至数例标本。研究表明该地区蝶类具有东洋界属性及由东洋界向古北界过渡的特征。     

鲤(Cyprinus carpio)促性腺激素释放激素分泌核群的酶免疫细胞化学定位

利用抗DS-LRH 血清和PAP 免疫标记技术,作卵巢处于Ⅳ期的鲤鱼GRH 分泌核群定位,证叫NPO 系统是合成与释放GRH 的部位。NPO 细胞呈锥形,核周体有明显的棕色分泌颗粒,细胞核大,不着色。其神经纤维,含有棕色分泌颗粒者,排列呈串珠状,分布于(1)NPO 的周围,(2)前脑侧束区,(3)视前隐窝腹侧和尖端,(4)视交叉中部,(5)沿视束和下丘脑外侧区。对NPO 的功能进行了讨论。